Estafilococos: Taxonomia, Testes e Importância Médica

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ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 1
Visão Geral da Taxonomia dos Cocos Gram Positivos:Visão Geral da Taxonomia dos Cocos Gram Positivos:
Cocos Gram PositivosCocos Gram Positivos
(cerca de 21 gêneros)
Cocos Gram Positivos de Cocos Gram Positivos de 
Importância MédicaImportância MédicaImportância MédicaImportância Médica
Staphylococcus
Catalase Catalase ++
EnterococcusStreptococcus
Catalase Catalase --
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 2
Teste da Catalase:Teste da Catalase:
Suspensão da Bactéria em Solução de Peróxido de HidrogênioSuspensão da Bactéria em Solução de Peróxido de Hidrogênio
Streptococcus
Enterococcus
Streptococcus
H2O2 + catalase = H2O + O2 ����
Staphylococcus
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 3
� Agrupados predominantemente em “cacho de uva”;
� São cocos Gram positivos;
Descrição Morfológica:
� Não são esporulados;� Não são esporulados;
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 4
� São mesófilos;
� São facultativos;
Descrição Fisiológica:
� Não são exigentes nutricionalmente;� Não são exigentes nutricionalmente;
� São halotolerantes;
Crescem em meios de alta osmolaridade (até 10% de NaCl)
Manitol +Manitol +Manitol Manitol --
Agar Salgado Manitol
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 5
Espécies de Importância Médica Humana:
S. epidermidisS. aureus
Pigmento Pigmento 
AmareloAmarelo “Pigmento“Pigmento
Branco”Branco”
S. saprophyticus
S. epidermidis
S. haemolyticus
S. lugdunensis
Coagulase Coagulase --
S. aureus
Coagulase Coagulase ++
Humanas / Animais:
S. intermedius (+); 
S. hyicus (v); ... GrupoGrupo
GrupoGrupo
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Outras Espécies do Grupo Coagulase Negativo:Outras Espécies do Grupo Coagulase Negativo:
SS.. captiscaptis
SS.. auricularisauricularis
SS.. hominis,hominis,
SS.. schleiferischleiferi
S. warneriS. warneri
S. simulansS. simulans
Microbiota do 
HomemS. simulansS. simulans
S. xylosusS. xylosus
S. cohniiS. cohnii
……
S. caprae
Microbiota de 
Outros Animais
em particular da pele
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 7
Teste da Coagulase:Teste da Coagulase:
Teste da Coagulase Teste da Coagulase --
Cultura da Bactéria + Plasma de Coelho + IncubaçãoCultura da Bactéria + Plasma de Coelho + Incubação
plasma + coagulase = fibrinogênio ���� fibrina
Teste da Coagulase Teste da Coagulase ++
CoáguloCoágulo
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 8
Importância Médica do Importância Médica do Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus::
Antes da descoberta dos antibióticosAntes da descoberta dos antibióticos
sua importância em infecções no homem: sua importância em infecções no homem: 
�� só era inferior a do só era inferior a do StreptococcusStreptococcus pyogenespyogenes;;
�� só era inferior a dos agentes pandêmicos;só era inferior a dos agentes pandêmicos;
� é um dos principais agentes de Infecções HospitalaresInfecções Hospitalares;
Atualmente sua importância em infecções no homem:
� é um dos principais agentes de Infecções ComunitáriasInfecções Comunitárias;
� é uma das principais bactérias em Resistência a Antimicrobianos;
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 9
Infecções Superficiais da Pele pelo Infecções Superficiais da Pele pelo S. aureusS. aureus::
FoliculiteFoliculiteFoliculiteFoliculite
FurúnculoFurúnculo
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 10
Infecções Superficiais da Pele pelo Infecções Superficiais da Pele pelo S. aureusS. aureus::
HordéoloHordéolo
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 11
Infecções Superficiais da Pele pelo Infecções Superficiais da Pele pelo S. aureusS. aureus::
PústulaPústula PiodermitePiodermite
ImpetigoImpetigo
CrostaCrosta
FoliculiteFoliculite da Barbada Barba
CrostaCrosta
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 12
Infecções Superficiais da Pele pelo Infecções Superficiais da Pele pelo S. aureusS. aureus ::
Denominações EquivocadasDenominações Equivocadas
“Carbúnculo”“Carbúnculo”
Carbúnculo HemáticoCarbúnculo Hemático
BacillusBacillus anthracisanthracis
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 13
“Antraz”“Antraz”
Infecções Superficiais da Pele pelo Infecções Superficiais da Pele pelo S. aureusS. aureus ::
Denominações EquivocadasDenominações Equivocadas
AnthraxAnthrax
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 14
Infecções de Tecidos Profundos pelo Infecções de Tecidos Profundos pelo S. aureusS. aureus ::
Embolia “Séptica”
Endocardite
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 15
Infecções de Tecidos Profundos Infecções de Tecidos Profundos pelo pelo S. aureusS. aureus ::
OsteomieliteOsteomielite
Artrite SépticaArtrite Séptica
PielonefritePielonefriteAbscessoAbscesso
PneumoniaPneumonia
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 16
Infecções de Tecidos Profundos pelo Infecções de Tecidos Profundos pelo S. aureusS. aureus::
Disseminação HematogênicaDisseminação Hematogênica
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 17
Porque o Porque o S. aureusS. aureus é tão freqüente em Infecções da Pele?é tão freqüente em Infecções da Pele?
�� Ácidos Teicóicos e LipoteicóicosÁcidos Teicóicos e Lipoteicóicos
Ligação a Ligação a Ligação a Ligação a 
FibronectinaFibronectina
Colonização da Tecidos Lesados
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 18
Porque o Porque o S. aureusS. aureus é tão freqüente em Infecções da Pele?é tão freqüente em Infecções da Pele?
�� Fator de AgregaçãoFator de Agregação
Ligação ao FibrinogênioLigação ao Fibrinogênio
Ligação a FibrinaLigação a Fibrina
- +
GrumosGrumos
Colonização da Tecidos Lesados
Ligação a ColágenoLigação a Colágeno
Ligação a FibronectinaLigação a Fibronectina
Ligação a ElastinaLigação a Elastina
MSCRAMM = Microbial Surface Components Recognizing Adhesive Matrix Molecules 
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 19
Porque o Porque o S. aureusS. aureus resiste aos mecanismos de defesa?resiste aos mecanismos de defesa?
�� Cápsula ou Camada MucóideCápsula ou Camada Mucóide
Protege da FagocitoseProtege da Fagocitose
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 20
Porque o Porque o S. aureusS. aureus resiste aos mecanismos de defesa?resiste aos mecanismos de defesa?
�� Proteína AProteína A
Afinidade pela Porção Afinidade pela Porção 
FC da IgG1, IgG2 e IgG4FC da IgG1, IgG2 e IgG4
Protege da Fagocitose Protege da Fagocitose 
OpsonizadaOpsonizada
Mecanismo de EvasãoMecanismo de Evasão
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 21
�� Proteína A : Outras AçõesProteína A : Outras Ações
Produzida e Liberada Produzida e Liberada 
para o Meio Extracelularpara o Meio Extracelular
Atinge o Sistema Atinge o Sistema Atinge o Sistema Atinge o Sistema 
Linfático Linfático -- SanguíneoSanguíneo
Forma “IMUNOCOMPLEXOS” Capazes Forma “IMUNOCOMPLEXOS” Capazes 
de Ativar o Sistema Complementode Ativar o Sistema Complemento
Dano ao Endotélio Vascular Dano ao Endotélio Vascular 
e Tecidos Adjacentese Tecidos Adjacentes
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 22
Porque o Porque o S. aureus S. aureus determina uma reação inflamatória intensa?determina uma reação inflamatória intensa?
��Peptidioglicano:Peptidioglicano: Produção de Pirógenos Produção de Pirógenos EndógenosEndógenos��Peptidioglicano:Peptidioglicano:
Atração de Atração de 
PolimorfonuclearesPolimorfonucleares
Ativação Inespecífica do Ativação Inespecífica do 
Sistema ComplementoSistema Complemento
EndógenosEndógenos
Produção de Interleucina 1Produção de Interleucina 1
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 23
Porque o Porque o S. aureus S. aureus determina uma produção de pús intensa?determina uma produção de pús intensa?
��Produção de Citolisinas:Produção de Citolisinas:
Fagócitos
Células do Hospedeiro
Toxina AlfaToxina Alfa Fagócitos
Piócitos
Células Necrosadas
Toxina GamaToxina Gama
Toxina AlfaToxina Alfa
Toxina BetaToxina Beta
Toxina DeltaToxina Delta
LeucocidinaLeucocidina (PVL)(PVL)
S. aureus
PVL= Leucocidina de Panton Valentine
MRSA Comunitário→→→→ Infecções Cutâneas e Pneumonias Graves
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 24
Porque o Porque o S. aureus S. aureus determina a formação de abscessos?determina a formação de abscessos?
��PeptidioglicanoPeptidioglicano
�� CoagulaseCoagulase
Atração de Atração de 
PolimorfonuclearesPolimorfonucleares
Parede do Abscesso Parede do Abscesso 
(Células + Fibrina)(Células + Fibrina)
�� CoagulaseCoagulase
Necrose TecidualNecrose Tecidual
(Células + Fibrina)(Células + Fibrina)
PAREDEPAREDE
(PÚS)(PÚS) ��PeptidioglicanoPeptidioglicano
��Produção de CitolisinasProdução de Citolisinas
Ativação Inespecífica do Ativação Inespecífica do 
Sistema ComplementoSistema Complemento
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 25
O S. aureus O S. aureus consegue se disseminar para outros tecidos?consegue se disseminar para outros tecidos?
Necrose Tecidual
* * * * Pús * * * *
PAREDEPAREDE
PÚSPÚS
�� Enzimas ExtraEnzimas Extra--CelularesCelulares
Hialuronidase
Fiblinolisina
Lipases
�� CápsulaCápsula
�� Proteína AProteína A
Protege da FagocitoseProtege da Fagocitose
Protege da Fagocitose OpsonizadaProtege da Fagocitose Opsonizada
TecidosTecidos
Rede LinfáticaRede Linfática
Corrente SanguíneaCorrente SanguíneaDisseminação HematogênicaDisseminação Hematogênica
Proteases
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Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Grupo Coagulase NegativoGrupo Coagulase Negativo
S. saprophyticusS. saprophyticus Outras EspéciesOutras Espécies
Infecções do Trato Urinário Infecções do Trato Urinário 
em Mulheres Jovens em Mulheres Jovens 
Sexualmente Ativas Sexualmente Ativas 
Infecções Associadas a Infecções Associadas a 
Cateteres, Próteses e Cateteres, Próteses e 
outros Materiais de outros Materiais de 
Implante em TecidosImplante em Tecidos
(Biomateriais)(Biomateriais)
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 27
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções do Trato Urinário em Mulheres Jovens Sexualmente Ativas: Infecções do Trato Urinário em Mulheres Jovens Sexualmente Ativas: 
Microbiota 
Colonização Bexiga
Aderência 
do Reto 
(S. saprophyticus)S. saprophyticus)
Colonização 
do Períneo
Bexigaa Mucosa 
da Uretra 
Aderência Mediada pela “Ssp” 
(Surface Associated Protein)
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Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
Infecção Incidência *
Prótese Valvular Cardíaca
Precoce 30-70%Precoce 30-70%
Tardia 20-30%
Prótese de Quadril 10-40%
Derivações para LCR 65-80%
Enxertos Vasculares 5-20%
Cateter de Diálise Peritoneal 30%
Cateter Intravascular 10-50%
* Gemmell and MacCartney, 1990.
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 29
Formação do Biofilme pelo S. epidermidis
Bactéria
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
Biofilme
Matriz Extracelular
Bactéria
� Resistência a Defesas do Hospedeiro e a Antimicrobianos;
� Redução da Resposta Inflamatória do Hospedeiro;
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 30
Fases da Formação do Biofilme:
Bactéria planctônica no meio líquido 
Aderência Inicial à superfície
Fase de 
Acumulação
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
Aderência Inicial à superfície
Multiplicação das bactérias
Ligação inter-celular das bactérias
Produção da matriz extracelular
Biofilme
Fase de 
Ligação Inicial
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 31
Fase de Ligação Inicial
Cateter Nú
Hidrofobicidade
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
SSP 1 e 2 “Staphylococcal Surface Protein“
Autolisina AtlE
Diferencial do Diferencial do S. epidermidisS. epidermidis em em 
relação a outros patógenosrelação a outros patógenos“Momento da Inserção”
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 32
Fase de Ligação Inicial
Cateter “Revestido” Proteína Fbe
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
ColágenoVitronectina
FibrinogênioFibrina Elastina
Proteína Ebp
Proteínas Sdr
Ácidos Teicóicos
...
Presentes no S. epidermidis, assim 
como em outros patógenos
“Horas após a Inserção”
Laminina
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 33
Fase de Acumulação
Ligação inter-celular 
das bactérias
Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:Infecções Causadas pelo Grupo Coagulase Negativo:
Infecções Associadas a Biomateriais: Infecções Associadas a Biomateriais: 
Produção da 
matriz extracelular
Proteina AAP - “Accumulation-Associated Protein”
CW TA - Ácidos Teicóicos Extra-Celulares
PIA - “Polissacharide Inter-Cellular Adhesin”
DNAe – Acido Desoxirribonucleico Extra-Celular
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 34
Qual a origem do Qual a origem do S. epidermidisS. epidermidis que coloniza o implante?que coloniza o implante?
IntraIntra--LuminalLuminal
Contaminação Contaminação 
do Conectordo Conector
Soluções Soluções 
ContaminadasContaminadasContaminação Contaminação 
Cateter Venoso 
Central
ExtraExtra--LuminalLuminal
ContaminadasContaminadas
�� Microbiota da Pele Microbiota da Pele 
do Pacientedo Paciente
�� Microbiota da “Pele” Microbiota da “Pele” 
da Equipe de Saúdeda Equipe de Saúde
Contaminação Contaminação 
Durante a InserçãoDurante a Inserção
“Geralmente “Geralmente 
Precoces”Precoces”
“Geralmente “Geralmente 
Tardias”Tardias”
HematogênicaHematogênica
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 35
Medidas de Prevenção da Contaminação de CVCMedidas de Prevenção da Contaminação de CVC??
Durante a Inserção:Durante a Inserção: Máxima Barreira Máxima Barreira de Proteção Estérilde Proteção Estéril
Proteção do Sítio Proteção do Sítio 
de Inserçãode Inserção
ParamentaçãoParamentação CompletaCompleta
Material EsterilizadoMaterial Esterilizado
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 36
Após a Inserção:Após a Inserção: Curativo Oclusivo + Curativo Oclusivo + AntissépticoAntisséptico
Medidas de Prevenção da Contaminação de CVCMedidas de Prevenção da Contaminação de CVC??
Infecção no Ponto de InserçãoInfecção no Ponto de Inserção
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 37
Medidas de Prevenção da Contaminação de CVCMedidas de Prevenção da Contaminação de CVC??
Modificações Funcionais nos Cateteres:Modificações Funcionais nos Cateteres:
Cateter Venoso Cateter Venoso 
Central Central TunelizadoTunelizado
“Manguitos”“Manguitos”
Manguito Manguito ImpreganadoImpreganado com com AntissépticoAntisséptico
Dificulta a Contaminação ExtraDificulta a Contaminação Extra--Luminal Nos Luminal Nos 
Primeiros Dias Após a ImplantaçãoPrimeiros Dias Após a Implantação
ManguitoManguito
Determina a Formação de uma Determina a Formação de uma 
Aderência Tecidual que Dificulta a Aderência Tecidual que Dificulta a 
Contaminação ExtraContaminação Extra--Luminal Luminal 
(Demora Dias para se Desenvolver)(Demora Dias para se Desenvolver)
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 38
Material Clínico Método de Coloração de Gram
Semeadura em Agar Sangue
Processamento Inicial do Material Clínico:Processamento Inicial do Material Clínico:
Semeadura em Agar Sangue
Teste da Catalase
Reação Tintorial ao Gram
Morfologia Celular
Morfologia Colonial
Teste da Coagulase
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS39
Teste da Coagulase
Positivo Estafilococos do Grupo Coagulase Positivo
Identificação de Grupos ou Espécies:Identificação de Grupos ou Espécies:
Detecção do 
gene mecA
Negativo Estafilococos do Grupo Coagulase Negativo
Teste de 
Sensibilidade a 
Novobiocina
Amostras 
Isoladas de ITU
Amostras “R”:
S. saprophyticus
Teste de Sensibilidade a AntimicrobianosTeste de Sensibilidade a Antimicrobianos
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 40
Caracterizações Adicionais das Amostras Envolvidas em Surtos:Caracterizações Adicionais das Amostras Envolvidas em Surtos:
� Fagotipagem;
� Biotipagem;
� Perfil de Sensibilidade a Antimicrobianos;
� Técnicas Moleculares;
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 41
Tratamento das Infecções Estafilocócicas:Tratamento das Infecções Estafilocócicas:
� Escolha baseada no Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos;
� Vancomicina;
Indicadas para Amostras 
Resistentes a “Meticilina”
� Linezolida;
� Quinupristina-Dalfopristina;
� Linezolida;
ESTAFILOCOCOSESTAFILOCOCOS 42
Tratamento das Infecções Estafilocócicas:Tratamento das Infecções Estafilocócicas: