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1. Pergunta 1 0 ponto O sequenciamento de Sanger foi desenvolvido por Frederick Sanger em 1997. Quais são os produtos/reagentes necessários para desenvolver esta metodologia molecular? 1. Taqpolimerase, nucleotídeos, nucleotídios modificados, DNA. 2. Taqpolimerase, primers, nucleotídeos, nucleotídios modificados, RNA. 3. Taqpolimerase, primers, nucleotídeos, nucleotídios modificados. 4. Taqpolimerase, primers, nucleotídeos, nucleotídeos modificados, DNA. 5. Taqpolimerase, primers, nucleotídios modificados, DNA. 2. Pergunta 2 0 ponto Até a década de 70 ainda era muito difícil de estudar a molécula de DNA, sequenciá-la para analisar os genes de forma mais aprofundada. Isso só melhorou após o desenvolvimento de técnicas modernas de sequenciamento. Assinale a técnica associada. 1. O desenvolvimento das polimerases estáveis permitiu um sequenciamento mais seguro e rápido, diferenciando-o das demais técnicas. 2. O método de DNA recombinante foi revolucionário, permitindo sequenciar um genoma completo de forma rápida, eficaz e com baixo custo. 3. As técnicas de reação em cadeia da polimerase foram as únicas técnicas capazes de revolucionar os métodos de sequenciamento de DNA 4. A técnica de sequenciamento de DNA sofreu pouco avanço nos últimos anos, muito devido ao alto custo de sua aplicação. 5. As metodologias de sequenciamento de Gilbert e Sanger revolucionaram a forma de se fazer o sequenciamento de DNA. 3. Pergunta 3 0 ponto A clonagem de um gene é um conjunto de técnicas que permite isolar uma sequência de DNA e amplificá-la para uma aplicação desejada. As técnicas do DNA recombinante são bastante usadas para esse fim, isso até o desenvolvimento das técnicas atuais de amplificação. Sobre as técnicas atuais para amplificar sequências de DNA, podemos afirmar que: 1. a técnica denominada reação em cadeia da polimerase — PCR vem substituindo os métodos de DNA recombinante por serem mais rápidas, sensíveis e baratas; 2. as técnicas de DNA recombinante ainda são as mais utilizadas para amplificar fragmentos de DNA, visto que nenhuma outra técnica melhor foi desenvolvida; 3. os processos para amplificar fragmentos de DNA ainda são pouco usados devido a sua complexidade e alto custo; 4. na atualidade, a reação em cadeia da polimerase — PCR é uma alternativa ainda pouco usada para amplificar o DNA, devido a sua alta complexidade; 5. a amplificação do DNA é um procedimento ainda em experimentação, por isso, ele só é utilizado nos institutos de pesquisa científica. 4. Pergunta 4 0 ponto A reação em cadeia da polimerase necessita de vários ciclos repetidos para poder se obter uma quantidade de fragmentos suficientes para serem analisados em eletroforese. Assinale a alternativa que contenha a ordem correta de cada um desses ciclos. 1. Desnaturação – Amplificação – Eletroforese. 2. Extração – Amplificação – Eletroforese. 3. Desnudamento – Anelamento – Extensão. 4. Desnaturação – Anelamento – Extensão. 5. Desnaturação – Extensão – Anelamento. 5. Pergunta 5 0 ponto A variabilidade genética de um genoma, também nomeado de polimorfismos genéticos, permite ao profissional realizar vários tipos de diagnóstico. Dentre eles: 1. diagnóstico de doenças causadas por bactérias e genética forense. 2. identificação de indivíduos, teste de paternidade, marcadores genéticos para o câncer; 3. diagnóstico de doenças virais, marcadores genéticos para asma, artrite e cânceres; 4. identificação de indivíduos, teste de paternidade e doenças virais; 5. apenas genética forense; 6. Pergunta 6 0 ponto Os Polimorfismos são regiões bastante específicas e aplicáveis a uma série de áreas de atuação, o que se sabe sobre essas regiões do DNA é que podem variar de acordo com a sequência ou com o comprimento de DNA. Com base nisso, em relação a esses polimorfismos podemos afirmar que: 1. as SNP’s são substituições de nucleotídeos em uma única base, sendo polimorfismos muito raros de acontecer; 2. os polimorfismos repetitivos, como os SSR, são os mais simples tipos de polimorfismos, sendo extremamente comuns sua ocorrência; 3. os polimorfismos mais simples e abundantes são os SNP’s, que consistem em polimorfismos de sequência de apenas uma base; 4. os polimorfismos mais complexos são os que apenas um nucleotídeo é trocado ou substituído ou deletado, esses polimorfismos são raros; 5. os SSR são polimorfismos de repetição que não tem aplicações observadas atualmente em nenhuma área. 7. Pergunta 7 0 ponto O conhecimento do código genético, caracterizado pelas sequências específicas de nucleotídeos, foi fundamental para o desenvolvimento das tecnologias do DNA. Assim, encontrar ferramentas que fragmentassem esse DNA nessas sequências específicas para permitir a manipulação desse código foi imprescindível na época. Sobre as ferramentas que possibilitaram isso é correto afirmar que: 1. o homem ainda busca o desenvolvimento de ferramentas que consigam clivar o DNA em regiões específicas e que não atuem de forma aleatória, como a maioria das enzimas atuais; 2. a descoberta de tesouras moleculares não é uma prioridade, na atualidade, para o desenvolvimento da tecnologia do DNA, visto que o grande enfoque no momento é sequenciar e conhecer os genes humanos. 3. um grande salto para as tecnologias do DNA foi a descoberta das enzimas bacterianas conhecidas como enzimas de restrição, porém, essa técnica é pouco aplicável por cortar apenas sequências curtas; 4. as enzimas de restrição se mostraram ferramentas importantíssimas para a sua utilização como tesouras moleculares, porém, sua obtenção a partir de bactérias torna essas enzimas não aplicáveis em seres humanos; 5. a descoberta de uma classe de enzimas bacterianas, denominadas enzimas de restrição, capazes de cortar o DNA em sequências altamente específicas, foi um marco no desenvolvimento das tecnologias do DNA; 8. Pergunta 8 0 ponto O sequenciamento do genoma de organismos vivos dependeu de uma série de fatores que vão desde o desenvolvimento de tecnologias até a evolução do conhecimento sobre biologia molecular e as características intrínsecas da molécula de DNA. Assim, podemos afirmar que, o estudo do genoma contribui: 1. no diagnóstico de microrganismos patogênicos que impactam a saúde, sendo o estudo do genoma focado somente nesta área da medicina, visto seu potencial de aplicação; 2. a genômica é uma área da ciência focada no estudo da natureza química dos genes dos diversos organismos vivos, sem se preocupar com a ordem das sequências nas quais eles estão dispostos; 3. o sequenciamento do DNA genômico por completo, por ser extremamente complexo, ainda não foi totalmente possível, sendo necessário maior investimento e desenvolvimento nessa área. 4. apenas na identificação de genes mutantes capazes de causar doenças genéticas em humanos, sendo outras aplicações, que não essas, impossíveis de serem desenvolvidas; 5. na identificação de genes capazes de causar doenças genéticas, no entendimento dos processos evolutivos e na medicina através da prevenção, diagnóstico e formas de tratamento para diversas doenças; 9. Pergunta 9 0 ponto As endonuclease de restrição, também denominadas de enzimas de restrição, são moléculas utilizadas em diversas técnicas moleculares, incluindo o CRISPR-CAS9. Sobre essas moléculas, assinale a alternativa correta. 1. Reconhecem uma sequência específica e clivam em uma determinada posição. 2. Sempre após a clivagem de uma enzima de restrição serão gerados dois fragmentos de DNA. 3. A adição da enzima de restrição deve ocorrer na fase de anelamento da PCR. 4. As enzimas de restrição são obtidas através de células humana. 5. Reconhecem uma sequência inespecífica e clivam semprena metade da sequência reconhecida, gerando dois fragmentos com tamanhos exatamente iguais. 10. Pergunta 10 0 ponto Polimorfismo no sentido literal significa “muitas formas” e, basicamente, refere-se a mudanças nas sequências de DNA que originam muitas versões alternativas de determinada região. Essas versões alternativas são denominadas alelos, porém, um polimorfismo só se caracteriza: 1. quando existe uma frequência alélica menor que 1% podemos determinar que aquela região ou sequência é polimórfica; 2. por frequências alélicas extremamente diminutas, por isso, praticamente impossível de serem detectadas; 3. quando não há variação nas sequências genômicas, ou seja, a ausência de alelos caracteriza um polimorfismo; 4. pela ocorrência de alelos predominantes que estão presentes em grande parte da população, em geral acima de 50%. 5. com uma frequência de alelos variantes em uma região do DNA maior que 1% dentro de uma população;
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