Exercícios 1 - Diagnóstico laboratorial 2 LUCIANA ROCHA DO NASCIMENTO

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Exercícios Diagnóstico Laboratorial 2 
 
Docente: Daniel Barros Fagundes 
Discente: Luciana Rocha do Nasimento - 03113539 
Discente: Giovana Sabino Alves - 03103149 
 
Com relação às bactérias abaixo, responda: 
 
• Enterobacter aerogenes 
• Staphylococcus aureus 
• Escherichia coli 
• Staphylococcus epidermidis 
• Mycobacterium tuberculosis 
• Clostridium botulinum 
• Pseudomonas aeroginosas 
• Mycobacterium leprae 
• Streptococcus pyogenes 
• Klebsiella pneumoniae 
 
1) Quais doenças estão associadas a cada uma destas bactérias. 
 BACTÉRIAS DOENÇAS 
Enterobacter aerogenes 
 
Pneumonia, Cistite ou Pielonefrite 
Staphylococcus aureus 
 
Infecções na corrente sanguínea, Endocardite, 
Osteomielite e Infecção pulmonar 
Escherichia coli 
 
Infecção do trato urinário (ITU; mais comum). Infecção 
entérica (certas cerpas), Infecção invasiva (raras, exceto 
em recém-nascido) 
Staphylococcus 
epidermidis 
 
Bacteremia estafilocócica, Infecções cutâneas 
estafilocócicas, Infecções neonatais estafilocócicas, 
Pneumonia estafilocócica 
Mycobacterium 
tuberculosis 
 
Tuberculose 
Clostridium botulinum 
 
Botulismo 
Pseudomonas 
aeroginosas 
 
Infecção Pulmonares, Fibrose Cítica,Foliculite 
Mycobacterium leprae 
 
Hanseníase (lepra) 
Streptococcus 
pyogenes 
 
Faringite estreptocócica, Escarlatina, Infecção cutânia 
estreptocócicas (impetigo, erisipela,celulite), 
Klebsiella pneumoniae 
 
Pneumonia, Infecção do trato urinario, Gastroenterite. 
 
2) De acordo com a morfologia e reação de Gram, classifique os microrganismos 
citados em bacilos ou cocos e em Gram positivos ou negativos. 
• Enterobacter aerogenes - Gram negativa; 
• Staphylococcus aureus - Cocos gram-positivos; 
• Escherichia coli - Gram-negativas; 
• Staphylococcus epidermidis - Gram-positiva; 
• Mycobacterium tuberculosis - considerados como Gram positivos pelas 
características da sua parede celular; 
• C. botulinum - Gram-positiva; 
• Pseudomonas aeruginosa - Gram-negativos; 
• Mycobacterium leprae - Gram-positivo; 
• Treptococcus pyogenes - Gram positiva; 
• Klebsiella pneumoniae - Gram-negativa. 
 
 
3) Descreva o procedimento técnico para a coloração de Gram. 
 
Antes de iniciar a coloração, assegure-se de que o esfregaço esteja seco. Não 
fixe o esfregaço em chama, pois este processo promove a desidratação brusca dos 
constituintes celulares. Lembre-se de que a violeta- de-metila já contém fixador químico. 
Para fazer a coloração, os seguintes passos: 
1. Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e deixe por aproximadamente 15 
segundos; 
2. Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de-metila e 
deixe agir por mais 45 segundos; 
3. Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; cubra a lâmina com lugol 
diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto; 
4. Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente; 
5. Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não 
desprenda mais corante; 
6. Lave em um filete de água corrente; 
7. Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos; 
8. Lave em um filete de água corrente; 
9. Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente, com o auxílio de um papel de filtro 
limpo; 
10. Coloque uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço; 
11. Leia em objetiva de imersão (100 X). 
 
 
4) O que são bacilos-álcool-ácido resistentes? Qual a diferença destes bacilos para as 
demais bactérias Gram positivas e negativas? 
 
Quando tratadas pelo corante fucsina fenicada, os bacilos coram-se de 
vermelho e persistem ao descoramento subsequente feito com uma solução de álcool-
ácido forte (diferenciador). É por isso que as micobactérias são conhecidas por serrem 
Bacilos Álcool-Ácido Resistentes (BAAR). 
As outras bactérias, que não possuem suas paredes celulares ricas em lipídeos, 
perdem sua coloração pela fuscina após a adição da solução de álcool-ácido, ficando 
azul após a adição do azul de metileno (contra-corante). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
5) Elaborem um mapa mental diferenciando as técnicas de HPJ, Ritchie, Willis e à 
fresco. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
6) Como diferenciar as formas tripomastigota e amastigota do Trypanosoma cruzi e 
Leishmania sp? 
Trypanosoma cruzi 
Tripomastigota: Forma flagelada, presente no inseto vetor. Tripamastigota 
metocíica (infectante) e no hospedeiro vertebrado (forma sanguínea com membrana 
ondulante. 
Amastigota: Intracelular obrigatorio no hospeideiro vertebrado. 
Leishmania sp 
Amastigota: Nos vertebrados, dentro dos macrófagos de diferentes tecidos 
(onde se multiplica), arredondada, com núcleo grande e cinetoplasto, sem flagelo livre. 
Promastigota: presente no vetor, nucleo central, cinetoplasto na região anterior 
e flagelo livre. 
 
7) Quais fatores (modificações biológicas e fisiológicas) favorecem o 
desenvolvimento do Trichomonas vaginalis na vagina? 
• Modificação da microbiota vaginal; 
• Diminuição da acidez local; 
• Diminuição de glicogênio; 
• Acentuada descamação nas células. 
 
8) Dos protozoários estudados em nossas primeiras aulas, quais são os parasitos 
sanguíneos e quais são os intestinais? 
Protozoários Sanguíneo 
Métodos Laboratórias em Parasitologia 
Técnicas de 
Sedimentação - HPJ 
Indicada para ovos, larvas e cistos 
As estruturas são retiradas no fundo 
do tubo, ao contrário das técnicas de 
flutuação 
Objetivam o aumento do número de 
ovos, larvas e cistos e a separação 
das gorduras e óleos da maioria os 
dentritos 
Vantagens: necessidade minima de 
vidrarias, dispensa o uso de centrífuga e 
reagentes. 
Desvantagens: Mais lenta, grande 
quandidade de detritos fecais 
Técnicas de 
Flutuação - Willis 
Indicada para ovos de baixa 
densidade espercífica, como os de 
ancoilostomídeos 
Baseiam-se na diferença de 
densidade esspecífica entre os ovos 
de helmitos, cistos e oocistos de 
rotozoários e o material fecal, a fim 
de que estes organismos flutuem na 
suoerficie dos reagentres. 
 
Desvantagens: Ovos pesados, como os 
de Ascaris, Taenia, Schistosoma e 
Fasciola podem não flutuar (HPJ 
indicado) . Alguns cistos e larvas podem 
ser distorcidos. 
Técnicas de 
Centrífugo-
Sedimentação- 
RITCHIE 
Eficiente para ovos, cistos e 
larvas 
Mais cara que HPJ, mas 
mais rápida e ocupa 
menos espaço. 
Utiliza quantidades 
menores de amostra 
Técnicas Direta 
á Fresco 
Finalidade: detetecção de 
trofozoítos móveis de 
protozoários 
Outras estruturas podem 
ser observadas 
Baixo custo, técnica rápida. 
 
• trypanosoma cruzi 
• Leishmania SP. 
• Toxiplasma gondii 
 
Helminto Intestinais 
 
• Ascaris Lumbricoides 
• Enterobius vermicularis 
• Trichocephalus trichiura 
• Ancylostoma doudenale. 
• Trichonomas vaginalis 
• Giardia lamblia 
• Entamoeba histolytica/dispar 
 
9) Diferencie os ovos férteis e inférteis de Ascaris lumbricoides. 
OVOS FÉRTEIS: São grandes, com cerca de 50 µm de diâmetro, ovais e com 
cápsula espessa, em razão da membrana externa mamilonada, secretada pela parede 
uterina e formada por mucopolissacarídeos. 
OVOS INFÉRTEIS: São mais alongados, possuem membrana mamilonada 
mais delgada e o citoplasma granuloso 
10) Na prova de disco-difusão em ágar, vários discos contendo antimicrobianos 
foram dispensados sobre a superfície de ágar, distribuído em placas de Petri, após 
a aplicação do inóculo bacteriano em determinada concentração. A placa foi, então, 
incubada por 4h e os diâmetros dos halos de inibição do crescimento bacteriano, ao 
redor de cada disco, foram avaliados. A cepa de bactéria foi altamente sensível, 
pois foi totalmente inibida, não apresentando crescimento no ágar. O teste, assim, 
forneceu um resultado quantitativo de concentração inibitória mínima de cada 
antimicrobiano. Nesta situação, verifica-se que 
A ( ) a concentração inibitória mínimade cada antimicrobiano permitiu adequar 
a dose terapêutica. 
B ( ) o resultado quantitativo foi importante para indicar a melhor terapia. 
C (X) o tempo de incubação foi insuficiente para crescimento bacteriano, invalidando 
a prova. D ( ) a infecção será controlada pelo uso de qualquer um dos 
antimicrobianos avaliados na prova. 
E ( ) a prova de disco-difusão foi muito bem realizada e útil para o tratamento do 
paciente. 
 
11) Diferentes métodos laboratoriais podem ser empregados para a realização de 
testes de sensibilidade a antimicrobianos. Entre esses ensaios, está o método de 
disco-difusão em ágar, o qual é baseado na presença ou ausência de um halo de 
inibição em torno do disco. Em relação ao método de disco-difusão em Ágar, assinale 
a alternativa incorreta. 
A ( ) Entre os muitos meios disponíveis, o ágar Müeller-Hintoné é o melhor para 
testes rotineiros de sensibilidade contra bactérias porque permite crescimento 
satisfatório dos patógenos não fastidiosos. 
B (X) Os testes de sensibilidade são extremamente necessários quando a infecção 
se deve a um microrganismo sensível a uma droga muito eficaz. 
C ( ) Os testes de sensibilidade a antimicrobianos são recomendados quando 
o micro- organismo causador da infecção é capaz de demonstrar resistência aos 
agentes antimicrobianos comumente usados. 
D ( ) O número de agentes testados deve ser limitado para aumentar a 
sensibilidade e a relevância do teste. 
 
12) Qual o meio de cultura utilizado para a realização do Antibiograma pelo método da 
difusão do disco (Kirby-Bauer) para bactérias? 
A ( ) Mac Conkey. 
B ( ) Dnase. 
C ( ) Cled. 
D (x) Müeller-Hinton. 
 
13) As provas de sensibilidade a antimicrobianos são importantes pelo aumento 
permanente da resistência de bactérias aos diferentes antimicrobianos. Com relação 
ao método da fita, assinale a alternativa CORRETA. 
A ( ) São colocadas duas fitas com o mesmo antibiótico em cada placa de 9 cm de 
diâmetro. 
 B ( ) Em geral, é necessário testar 10 antibióticos (30 placas). 
C (x) As bactérias são semeadas em forma similar à empregada no método 
do disco. 
D ( ) As placas são incubadas dentro de jarra com gerador a 45°C de 
temperatura.