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BACTERIOLOGIA Bacterias não fermentadoras da glicose: MEIO DE O-F Finalidade: Meio mais apropriado para carcaterização e identificação dos não fermentadores. Mecanismo: A baixa concentração de peptona minimiza a formação de aminas alcalinas provenientes da oxidação da peptona, as quais tendem a elevar o pH do meio podendo neutralizar os ácidos fracos que produzidos pelas bacterias gram negativas não fermentadoras. A concentração relativamente alta de carboidrato estimula o organismo á produção do ácido. Resultados: · Produção de ácido (cor amarela) nos dois tubos: FERMENTATIVO. · Produção de ácido (cor amarela) no tubo em aerobiose: OXIDATIVO. · Sem produção de ácido (não muda a cor do meio): INERTE. REDUÇÃO DO NITRATO Finalidade: O teste é revelado através da adição de 3 gotas do reativo de Griss A com 3 gotas do reativo de Griss B no caldo nitrato. Mecanismo e resultados: O desenvolvimento de uma coloração vermelha dentro de 1 a 2 minutos indica a presença de nitrito e, portanto, um teste positivo. Não ocorrendo a coloração vermelha: · O nitrato não foi reduzido, ou · O nitrato foi reduzido a nitrito e este, reduzido a gás nitrogênio livre. Nestes casos, adiciona-se uma pitada de zinco em pó. Se o nitrato ainda estiver presente, este será reduzido pelo zinco e uma coloração vermelha aparecerá dentro de 5 a 10 minutos, indicando que não houve a redução de nitrato a nitrito, portanto teste negativo. Se ocorrer a redução de nitrato a nitrito e este a nitrogênio livre, a cor não se altera, portanto, teste positivo conforme observado na Figura. HIDRÓLISE DA GELATINA Finalidade: se a bactéria produz a enzima gelatinase a gelatina se hidrolizará e não se solidificará após ser colocada na geladeira. Resultados: · Positivo: meio líquido após 15 min na geladeira. · Negativo: meio solido após 15 min na geladeira. ÚREIA Finalidade: determinar a habilidade de um determinado MO em “degradar” enzimáticamente a uréia com formação de duas moléculas de amonia. Mecanismo: A hidrolise da úreia é catalizada por uma enzima espeficica “urease”, rendendo duas moleculas de amonia ( NH3). Em solução a hidrolise da ureia fornese como produto final o carbonao de amonia. Resultado: · Positivo, quando a bactéria que possui a enzima urease consegue degradar a ureia, dando origem à amônia e bicarbonato, sendo essa reação percebida por meio da alteração da cor do meio, que passa de amarela para rosa/ vermelho. · Negativo quando não há mudança na cor do meio, indicando que a bactéria não possui a enzima.
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