IMUNOLOGIA CLÍNICA l

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IMUNOLOGIA 
CLÍNICA
Profa. Viviane Rodrigues Esperandim Sampaio
IMUNOLOGIA CLÍNICA
- Estudo dos anticorpos do sangue e de suas reações
com antígenos
- Usado para fazer referência ao diagnóstico de
doenças infecciosas por meio da detecção, no soro, de
anticorpos específicos ao microrganismo.
IMUNOLOGIA 
IMUNIDADE
resistência do nosso organismo contra doenças 
infecciosas causadas por bactérias, vírus, fungos e 
parasitas
SISTEMA
IMUNE
Células e moléculas responsáveis pela imunidade
RESPOSTA 
IMUNE
Reação coordenadas destas células e moléculas contra a 
entradas de substâncias estranhas em nosso corpo
CÉLULAS SANGUÍNEAS
• HEMÁCIAS
• LEUCÓCITOS
- Neutrófilos
- Eosinófilos
- Monócitos
- Basófilos
- Linfócitos
• PLAQUETAS
IMUNIDADE
IMUNIDADE
IMUNIDADE ATIVA X PASSIVA
ANTICORPOS
- Glicoproteínas de conformação globular que participam
da resposta imune humoral; 
- Produzidas pelas células B ativados: plasmócitos;
- Ligadas a membrana - receptores de células B - BCR;
- Secretadas - plasma, secreções de mucosas, líquido
intersticial dos tecidos.
ANTICORPOS
•INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS:
•IgG e IgM negativos: indicam que o
paciente nunca teve contato com o agente
causador da doença, nem por meio de
vacina nem por outras contaminações.
•IgG e IgM positivos: indicam uma infecção
em estágios mais avançados.
•IgG negativo e IgM positivo: infecção em
estágio inicial.
•IgG positivo e IgM negativo: representa
uma infecção antiga, com duração de meses
ou até mesmo anos. Além disso, pode
indicar o sucesso da produção de anticorpos
ao receber uma vacina
Imunodiagnóstico
- Diagnóstico laboratorial por meio de
técnicas imunológicas
- Revelar a presença de anticorpos ou
de antígenos no organismo
DETECÇÃO DE ANTÍGENO
DETECÇÃO DE 
ANTICORPOS ESPECÍFICOS
DIAGNÓSTICO DA 
DOENÇA
Imunodiagnóstico
E
N
S
A
IO
Imunoprecipitação
Aglutinação
Neutralização
Fixação de 
complemento
Imunodiagnóstico
Imunoensaios
que
utilizam sinalizadores
da interação Ag Ac
com conjugados
ligantes
Imunofluorescência
Radioimunoensaio
Imunoenzimáticos
Quimioluminescentes
- Diagnóstico de 
doença congênita
- Seleção de doadores 
de sangue
Por que pesquisar anticorpos para
diagnóstico?
01 0302
- Elucidação de processos 
patológicos com sintomas
e sinais clínicos 
confundíveis
- Diferenciação da fase da 
doença
- Seleção de doadores 
e receptores de 
órgãos para
transplante
- Avaliação do 
prognóstico da 
doença
- Critério de cura
- Seleção de doadores 
de sangue
Por que pesquisar antígenos é importante?
01 02
- Definição da 
etiologia da doença
- Inquéritos 
epidemiológicos
AMOSTRAS UTILIZADAS PARA OS 
IMUNOENSAIOS
A determinação da concentração de 
anticorpo (título) para um antígeno 
específico, envolve:
Preparação de diluição seriada da
amostra contendo anticorpo;
Adição de volume igual da suspensão
de antígeno a cada diluição
AMOSTRAS UTILIZADAS PARA OS 
IMUNOENSAIOS
A
determinação da concentração de
anticorpo titulação da amostra
Diluição da amostra em lâmina Diluição da amostra em tubos
Metodologias 
dos 
Imunoensaios
1. Imunoprecipitação
- O objetivo é o isolamento de uma molécula
de uma solução por sua ligação a um
anticorpo, tornando o complexo antígeno-
anticorpo insolúvel.
- Baseia se na quantificação de precipitados
formados pela reação antígeno anticorpo
- A interação entre um anticorpo e um
antígeno solúvel forma uma rede, em solução
aquosa, que se desenvolve eventualmente em
um precipitado visível
—Imunoprecipitação
2. Aglutinação
- Caracteriza-se pela formação de agregados
visíveis como resultado da interação de
anticorpos específicos e partículas insolúveis
que contêm determinantes antigênicos em
sua superfície.
- Aglutinação direta
- Aglutinação indireta ou passiva
- Teste de Coombs
- Inibição da aglutinação
Aglutinação direta
- O antígeno faz parte naturalmente da célula, e
haverá aglutinação dessas células promovida
por anticorpos contra esses antígenos.
- Exemplos usuais desses testes a identificação 
de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea 
utilizando anticorpos específicos
2. Aglutinação
Aglutinação passiva ou indireta
- O teste de aglutinação indireta ou passiva emprega a
adsorção de anticorpos ou antígenos solúveis
proteicos ou polissacarídeos na superfície de
micropartículas inertes (suportes) que não interferem
na interação antígeno-anticorpo, como plásticos,
gelatina, carvão e hemácias formolizadas de aves e
carneiros.
Um suporte muito utilizado são micropartículas de
poliestireno (látex)
2. Aglutinação
Aglutinação passiva ou indireta
Principais testes laboratoriais que utilizam essa técnica:
- ASO – Antiestreptolisina O: A Estreptolisina “O” é uma toxina
liberada pelo S. pyogenes.
- Fator reumatoide: O fator reumatoide está presente em
numerosas patologias onde o sistema imunológico é altamente
estimulado.
- Proteína C Reativa: A proteína C reativa é uma glicoproteína
produzida pelos hepatócitos, usada como indicador de
processos inflamatórios agudos de origem bacteriana, ou ainda,
de destruição de tecido
2. Aglutinação
Teste de Coombs
Quando um soro que contenha anticorpos incompletos for
incubado, em um ótimo de temperatura, com hemácias que
contenham o antígeno correspondente, os anticorpos fixam-se à
superfície destas hemácias e bloqueiam o antígeno. As hemácias
assim bloqueadas (sensibilizadas) serão reveladas pelo soro de
Coombs (soro antiglobulina humana). Através do teste de
Coombs Indireto, pesquisa-se a presença de anticorpos
incompletos ou imunes presentes no soro.
2. Aglutinação
O teste de Coombs é uma técnica laboratorial para determinar se os
eritrócitos foram fixados in vivo (opsonizados) por imunoglobulinas,
complemento, ou ambos.
Os anticorpos ditos incompletos ‘imunes”, quando em contato com
hemácias que contenham o antígeno correspondente, fixam-se na
membrana das mesmas, bloqueando o antígeno; não têm, entretanto, a
capacidade de aglutinar estas hemácias.
O soro de Coombs (soro antiglobulina humana) é capaz de promover a
aglutinação dessas hemácias, ditas sensibilizadas.
Inibição da Aglutinação
2. Aglutinação
- Inibição da aglutinação é contrária à
aglutinação direta e se faz positiva
quando não há aglutinação.
3. Neutralização
- No teste de inibição da hemaglutinação (HI) a
capacidade de hemaglutinação de um antígeno é
bloqueada quando um antígeno reage com o
anticorpo específico.
-
4. Fixação do Complemento
As reações de fixação do complemento podem ser usadas para determinar a presença ou quantificar
antígenos ou anticorpos, quando um dos elementos é conhecido. A detecção da presença, reação
qualitativa, ocorre quando temos uma reação antígeno/anticorpo e subsequentemente
a fixação do complemento
Imunoensaios
utilizando 
Conjugados
Imunoensaios utilizando Conjugados
Identificar a
presença de antígenos ou de 
anticorpos, em testes
altamente sensíveis, empregando 
moléculas marcadas com
compostos químicos definidos e 
detectáveis e que podem
ser mensurados
As moléculas ligadas 
covalentemente aos compostos
ligantes são denominadas 
Conjugados que podem ser
definidos como duas substâncias 
ligadas covalentemente
e que mantêm as propriedades 
funcionais de ambasAs técnicas diferem se em relação a vários 
fatores como:
- ligante 
- sistema de revelação 
- molécula conjugada ao ligante 
- origem dessa molécula 
- meio onde ocorre o ensaio imunológico
Ligantes e sistemas de revelação:
- Radioisótopos (radiação) 
- Fluorocromos (fluorescência)
- Substâncias 
luminescentes 
(luminescência)
- Enzimas com substratos 
cromogênicos
(imunoenzimáticos)
Enzimas com substratos 
luminescentes
(quimioluminescência)
1. Imunofluorescência
- Técnica que permite a visualização de antígenos
nos tecidos ou em suspensões celulares
utilizando corantes fluorescentes, que absorvem
luz e a emitem num determinadocomprimento de
onda.
- Pesquisa de anticorpos
- Pesquisa de microrganismos
1. Imunofluorescência
Imunofluorescência Direta
Imunofluorescência Indireta
2. Imunoenzimáticos
Elisa ( Enzyme linked immunosorbent assay)
- Nesse método, uma enzima é covalentemente
ligada a um anticorpo específico que reconhece
um antígeno alvo.
- Caso ocorra esse reconhecimento, a enzima irá
reagir com um substrato incolor para produzir um
produto colorido. Se o antígeno estiver presente,
o complexo anticorpo-enzima irá ligar-se a ele e a
enzima catalisará a reação.
- Então, a presença de produto colorido indica a
presença de antígeno.
2. Imunoenzimáticos
OBRIGADA
viviane.sampaio@unifran.edu.br