Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: ILZA CARLA MACÊDO MATRÍCULA: 01496370 CURSO: BIOMEDICINA POLO: UNINASSAU - CARPINA PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): GRASIELLY PROFESSOR(A) DA DISCIPLINA RENATA CRISTINA VALENÇA FRAGA PROFESSOR(A) TUTOR(A): GISELLE WOOLLEY CARDOSO DA SILVA TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado na aula prática: A amilase é uma hidrolase que tem como função a degradação dos carboidratos. As enzimas são proteínas e tem a característica de desnaturação de acordo com o meio ao qual são submetidas. 2. Materiais utilizados: 2 Pipeta de vidro de 5ml; 1 Pêra de borracha; 1 Pisseta com água destilada; 6 Tubos de ensaio; 1 Estante para os tubos de ensaio; 1 Cronômetro; 2 Erlenmeyer; 1 Proveta; 1 Balão volumétrico de 100ml; 1 Banho-maria; 2 Béquer; Papel Toalha. Solução de amido à 1%; solução de HCl 1:2. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do amido? R.: O amido é um homo polissacarídeo; formado por amilose e amilopectina. Amilose tem cadeia linear com resíduos de glicose conectados por ligações α (1→4). Amilopectina é altamente ramificada com ligações α (1→4) na cadeia linear e ligações α (1→6) nas ramificações. B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química do amido. R.: Tubo AA1: Tonalidade esverdeada, sem degradação do amido. Tubo AA2 e AA3: Sem degradação do amido, tubos com coloração azul escuro. C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido? R.: Degradação das ligações glicosídicas que formam o amido, o aquecimento e resfriamento ajuda a quebra das ramificações da amilopectina. D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. R.: Hidrólise nas ligações α (1→4) da amilose resultando em maltose e glicose. E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido. R.: Tubo AE1, AE2 e AE3: Não houve degradação do amido. F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do amido. R.: Amido não hidrolisado adquire coloração azul/preta que diminui proporcionalmente a atividade enzimática. 4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. R.: A amilase catalisa a hidrólise do amido, é uma hidrolase que degrada carboidratos ingeridos na alimentação para serem mais facilmente digeridos pelo organismo, quebrando as ligações glicosídicas α (1→4) do amido. A hidrólise enzimática foi acompanhada pelo teste do lugol, o qual observou a coloração dos tubos que variou sua tonalidade devido a ação da enzima A degradação se dá pela presença de moléculas menores (maltose, glicose e oligossacarídeos). RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Carboidratos são chamados de açúcares, glicídeos, são encontrados em frutas, pães e etc. São classificados em monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos. Os monossacarídeos são carboidratos mais simples, constituídos por aldoses (possuem o grupo carbonila -C=O), na extremidade da molécula e cetoses (possuem o grupo carbonila -C=O), no interior da molécula. Os oligossacarídeos são carboidratos solúveis formados por mais de um monossacarídeo unidos por ligações glicosídicas, contém de 3 a 12 unidades de monoméricas. E os polissacarídeos que são vários monossacarídeos unidos por ligações glicosídicas em uma longa cadeia polimérica, ocorrem na união de mais de 12 unidades de monossacarídeos. 2. Materiais utilizados. 2 Pipeta de vidro de 5 ml; 1 Pêra de borracha; Descarte para pipetas; Papel Toalha; 1 Pisseta com água destilada; 1 Banho-Maria; 3 Tubos de ensaio; 1 Estante para tubos de ensaio; Reagente de Seliwanoff; Ácido Clorídrico Concentrado; Solução de Glicose à 1%; Solução de Frutose à 1% ou Mel de Abelha. 3. Responda as Perguntas: A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. R.: O teste permite diferenciar aldoses de cetoses que, sob ação de ácidos fortes, são transformadas em derivados de furfural e hidroximetilfurfural (HMF) que se condensam com o resorcinol, presente no reativo de Seliwanoff formando um produto de coloração vermelho. Baseia-se no princípio em que quando aquecidas as cetoses são desidratadas mais rápido e mais intensa pela maior facilidade de formação do derivado de furfural, que as aldoses. B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando com a presença ou não de aldoses e cetoses. R.: O Tubo 1 (Glicose), não apresentou reação, confirma que não é uma cetose, sem alteração na cor. O Tubo 2 (Frutose), apresentou alteração na sua tonalidade para a cor vermelha, demonstrando a presença da cetose. O Tubo 3 (Água), não ocorreu reação no experimento. C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. R.: Serve de controle negativo, como indicativo de não ocorrer reação por não ter presença nem da aldose ou da cetose no tubo. D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? R.: A função do HCl no teste de Seliwanoff é de desidratar os carboidratos, para que esse processo ocorre é necessário uso de energia no meio, que vem através da fervura em banho-Maria. Ao desidratar os carboidratos o ácido Clorídrico formará o furfural e apresenta a coloração vermelha. Sendo usado como reagente com a cetose e promover a reação de identificação das cetoses. 3. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff R.: A Reação de Seliwanoff é um teste usado principalmente na diferenciação de aldoses e cetoses. Baseado na reação de mistura entre o HCl e os carboidratos, que após a mistura causa a desidratação dos carboidratos devido a hidrólise das ligações glicosídicas. Essa reação leva a produção de furfural e seus derivados, quando reagem com o resorcinol resulta em um produto de cor vermelha. A reação ocorrerá nos carboidratos tanto aldoses como cetoses, a diferença será que a cetose desidratará primeiro, depois será a aldose que sofrerá o mesmo processo. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Proteínas são polímeros de aminoácidos cuja sequência é responsável por determinar sua estrutura tridimensional e suas propriedades específicas. Apresentam um grupo amino, um grupo carboxila e uma cadeia lateral ligados ao carbono alfa. Os aminoácidos utilizados na construção de proteínas são isômeros biologicamente ativos. A ligação entre aminoácidos ocorre com a junção do grupo carboxila de um aminoácido com o grupo amino do aminoácido adjacente, liberando uma molécula de água na reação. Essa junção recebe o nome de ligação peptídica. 2. Materiais utilizados. 1 Pipeta de vidro de 5ml; 1 Pipeta de vidro de 1ml; 1 Pêra de borracha; 1 Pisseta com água destilada; 2 Tubos de ensaio; 1 Estante para tubos de ensaio; Papel toalha; Descarte para pipetas; Solução de Ácido tricloroacético a 20%; Solução de ovoalbumina a 10%; Solução de Acetato de chumbo a 10%. 3. Responda as Perguntas: A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com ácido forte e metal pesado. R.: No experimento acontece uma precipitação onde há a formação de uma solução leitosa com precipitado branco. B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas comácidos fortes e metais pesados? R.: A precipitação por ácidos fortes é um procedimento realizado para verificar a influência de metais pesados e de ácidos fortes sobre a solubilidade da proteína, bem como a influência do pH sobre a carga líquida da molécula polipeptídica. C) O que ocorreu com a ovoalbumina para que ela formasse um precipitado insolúvel neste experimento? R.: Os cátions de metais pesados formam precipitados insolúveis de proteínas (proteinato). Em pH alcalino algumas proteínas combinam com esses cátions formando os proteinatos insolúveis. Uma das maneiras de promover a precipitação é atingir o ponto isoelétrico ou também a ação de ácidos, bases, sais e solventes orgânicos. E claro, a temperatura como um agente que pode diminuir a solubilidade da proteína. Abaixo do ponto isoelétrico a precipitação ocorre com ácidos fortes. Acima do ponto isoelétrico, a carga líquida na proteína é negativa, interagindo como os cátions do sal. Quando a proteína está abaixo do seu ponto isoelétrico a carga líquida da molécula é positiva. Facilitando a interação entre molécula e ânions do ácido. Em ambos os casos o precipitado pode ser ressolubilizado através de alteração do pH. 3. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados. A precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados é feita para verificar a influência de ácidos fortes e metais pesados sobre a solubilidade da proteína e a influência do pH sobre a carga líquida da molécula polipeptídica. A precipitação acontece ao atingir o ponto isoelétrico (pI), e a interação entre ânions e cátions da proteína com metais e ácidos. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. As proteínas são chamadas de compostos orgânicos, constituídos de aminoácidos que formam cadeias entre si com junções (ligações peptídicas). Um aminoácido é formado por um carbono, um ácido carboxílico, uma amina e um radical (varia de aminoácido para aminoácido), dependendo de sua quantidade uma proteína apresenta mais de 70 aminoácidos. As proteínas estão presentes em todos os seres vivos. Diferenciam-se pelo número de aminoácidos e pela sequência que se dispõem nas cadeias polipeptídicas. As proteínas são desnaturadas por ação da temperatura, pH, agitação e radiação, danificando ou alterando sua estrutura. 2. Materiais utilizados. 2 Pipeta de vidro de 5ml; 1 Pipeta de vidro de 1ml; 1 Pêra de borracha; 1 Pisseta com água destilada; 2 Tubos de ensaio; 1 Estante para tubos de ensaio; Solução concentrada de Sulfato de amônio (NH4)2 SO4; Solução de ovoalbumina à 10%; Descarte para pipetas; Papel toalha. 3. Responda as Perguntas: A) O que é “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? R.: O “Salting in” é o fenômeno quando adicionado sais neutros que aumenta a força iônica do sistema. Os íons carregados da dissociação dos sais interagem com as moléculas da proteína, diminuindo a interação entre as moléculas da própria proteína, por seguinte, há um aumento na solubilidade da proteína em meio aquoso. A Camada de solvatação permite que as partículas sejam dispersadas (se espalhem) uniformemente na água. As moléculas da água formam essa camada ao redor dos sais. O “Salting out” é o fenômeno onde as moléculas da água, interagem com os íons, desfazendo a interação com a proteína, e interagindo entre si, resultando na diminuição da solubilidade em meio aquoso. B) Explique o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções salinas. R.: Este procedimento é realizado para verificar a influência da concentração de sais na solubilidade de sais neutros sobre a solubilidade da proteína. Dependendo do ambiente que se coloca uma proteína ela pode interagir de forma iônica com alguns compostos podendo mudar a concentração iônica de acordo com a adição de sais. C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. R.: A precipitação de proteínas por adição de sais demonstra a formação de uma solução leitosa com precipitado branco apenas no tubo A com ausência da água, por acontecer a interação das moléculas e a influência da concentração do sulfato de amônio sobre a solubilidade da proteína. 4. Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções salinas concentradas). R.: A precipitação de proteínas por adição de sais neutros, ocorre por efeito da força iônica. O procedimento verifica o efeito da concentração de sais na solubilidade da proteína. A adição desses sais promove o aumento da força iônica, fazendo a proteína diminuir sua interação, aumentando sua solubilidade. Ao elevar a força iônica as moléculas da água tendem a fazer a solvatação (moléculas espalhadas uniformemente ao redor dos sais) desfazendo suas interações com a estrutura proteíca. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Os carboidratos são conhecidos por açúcares, presentes em vários exemplos alimentares. Classificados em monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos. Apresentam o grupamento carbonila (-C=O), nas extremidades da molécula, sendo aldose ou no interior da molécula, sendo cetoses. 2. Materiais utilizados. R.: 3 Pipetas de vidro de 5ml; 1 Pêra de borracha; 3 tubos de ensaio; 1 Estante para tubos de ensaio; Papel toalha; 1 Pisseta com água destilada; 1 Banho-Maria; Reagente de Benedict; Solução de Glicose à 1%; Solução de Sacarose à 1%; Descarte para pipetas. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do Reativo de Benedict? R.: É uma solução de sulfato de cobre, carbonato de sódio e citrato de sódio em água. Usado para detectar a presença de carboidratos, conhecidos como açúcares redutores. B) O que são açúcares redutores? R.: São monossacarídeos que possuem o grupo carboxílico e cetônicos livres, que oxidam na presença de agentes oxidantes em soluções alcalinas. Apresentam a hidroxila (-OH) no carbono 1 e reagem com os íons metálicos dos reagentes. C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com o Reativo de Benedict. R.: É usado para detectar a presença dos carboidratos (açúcares redutores) Essas substâncias podem ser submetidas a reações químicas em que doam elétrons para outros compostos, resultando na produção de novas substâncias, que reagem com o reagente de Benedict para produzir composto insolúvel de cor vermelho tijolo. D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de açúcares redutores. R.: No presente experimento observa-se que apenas o tubo 1 Glicose ocorre a precipitação da solução, destacando a cor esverdeada indicando apenas um pouco de açúcar redutor, para a redução do cobre, possibilitando um resultado positivo. E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou quantitativo? R.: A análise desses açúcares é uma atividade rotineira em laboratórios de indústrias alimentícias. Como também pode ser usado para detectar a presença de glicose na urina, que pode ser um sinal de diabetes. Sendo um teste qualitativo, ou seja, serve apenas para detectar a presença dos açúcares redutores na solução. 4. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. R.: Os monossacarídeos podem ser oxidados por agentes oxidantes como o íon cúprico Cu 2+. O Reagente de Benedict é uma solução de sulfato de cobre, carbonato de sódio e citrato de sódio em água, detecta a presença dos açúcares redutores. Apresentando a cor vermelha tijolo em concentrações de maisde 2% de monossacarídeos na solução. O açúcar redutor reage que reagem com o sulfato de cobre do reagente reduzindo o ao óxido de cobre, composto insolúvel de cor avermelhada que forma o precipitado. O carbonato de sódio torna a solução alcalina para que alguns carboidratos possam reagir. A solução é azul por causa do sulfato de cobre. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 01 DATA: 17 / 03 / 2022 VERSÃO:01 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019-determinacao-da- atividade-da-amilase-salivar.pdf acesso em: 14 mar. 2022. http://www.eventosufrpe.com.br/jepex2009/cd/resumos/r0462-2.pdf acesso em: 14 mar. 2022. http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/teste-de-seliwanoff acesso em: 15 mar. 2022. http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/seliwanoff.htm acesso em: 15 mar. 2022 https://www.engquimicasantossp.com.br/2020/01/reagente-seliwanoff-teste- distinguir.html acesso em: 15 mar. 2022. http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%AD nas_EBAH.pdf acesso em 15 mar. 2022. https://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/precipitacao_protein as.htm acesso em: 16 mar. 2022. http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%AD nas_EBAH.pdf acesso em: 16 mar. 2022. https://wp.ufpel.edu.br/aquitembioquimica/files/2018/06/ResumosobreFun%C3%A7%C 3%B5es-das-Prote%C3%ADnas.pdf acesso em: 16 mar. 2022. https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/reagente-de- benedict#:~:text=Os%20a%C3%A7%C3%BAcares%20redutores%20reagem%20com,a vermelhada%20que%20forma%20um%20precipitado acesso em: 16 mar. 2022. https://www.scielo.br/j/cta/a/fsfZj35NNBsVXkTfHJWrRQG/ acesso em: 16 mar. 2022. http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019-determinacao-da-atividade-da-amilase-salivar.pdf http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019-determinacao-da-atividade-da-amilase-salivar.pdf http://www.eventosufrpe.com.br/jepex2009/cd/resumos/r0462-2.pdf http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/teste-de-seliwanoff http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/seliwanoff.htm https://www.engquimicasantossp.com.br/2020/01/reagente-seliwanoff-teste-distinguir.html https://www.engquimicasantossp.com.br/2020/01/reagente-seliwanoff-teste-distinguir.html http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%ADnas_EBAH.pdf http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%ADnas_EBAH.pdf https://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/precipitacao_proteinas.htm https://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/precipitacao_proteinas.htm http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%ADnas_EBAH.pdf http://www.academico.uema.br/DOWNLOAD/RoteirosProdutosNaturais_prote%C3%ADnas_EBAH.pdf https://wp.ufpel.edu.br/aquitembioquimica/files/2018/06/ResumosobreFun%C3%A7%C3%B5es-das-Prote%C3%ADnas.pdf https://wp.ufpel.edu.br/aquitembioquimica/files/2018/06/ResumosobreFun%C3%A7%C3%B5es-das-Prote%C3%ADnas.pdf https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/reagente-de-benedict#:~:text=Os%20a%C3%A7%C3%BAcares%20redutores%20reagem%20com,avermelhada%20que%20forma%20um%20precipitado https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/reagente-de-benedict#:~:text=Os%20a%C3%A7%C3%BAcares%20redutores%20reagem%20com,avermelhada%20que%20forma%20um%20precipitado https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/reagente-de-benedict#:~:text=Os%20a%C3%A7%C3%BAcares%20redutores%20reagem%20com,avermelhada%20que%20forma%20um%20precipitado https://www.scielo.br/j/cta/a/fsfZj35NNBsVXkTfHJWrRQG/
Compartilhar