Diagnóstico e isolamento fúngico

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FungosFungos
Diagnóstico, isolamento e
morfologia 
Amanda de Castro 
Realizar coleta de material
das bordas das lesões, pois
possuem hifas mais jovens
Realizar transporte do material
em até 24h, em caso de
tempos mais longos, conservar
em salina sob refrigeração.
Enviar amostras em duplicata e sempre
considerar infecções mistas com
bactérias!
Swab estéril → secreções e lesões com
exsudato 
Seringas descartáveis → lesões nodulares,
abcessos e coleta de líquidos corporais 
Carpetes estéreis e/ou lâminas de bisturi
→ lesões secas e descamativas
Punch → alterações nodulares e
ulcerativas
Coleta
Ágar Mycosel
Pode ser feito por Ágar Sabouraud ou Ágar Mycosel (Sabouraud + Ciclohemixida)
Cultivo para isolamento
Ágar Sabouraud
+ Clorofenicol (inibe o crescimento bacteriano)
Favorece o crescimento de fungos
filamentosos
Fragmento de ágar batata-
dextrose/fubá inoculado nas quatro
laterais com a colônia do fungo
Lamínula levemente pressionada
Algodão molhado com salina para
fornecer umidade
Incubação à temperatura ambiente
por 7 dias
Microcultivo de Riddel
Microcultivo de
Riddel - Observação
Depositar duas gotas
de lactofenol com
azul de metileno em
uma lâmina
Depositar a lamínula
do microcultivo
Observar ao
microscópio
Aspergillus
spp.
Fungo
anemófilo/oportunista
Conidióforo terminado em
vesícula, de onde saem
as fiálides
Conídios unicelulares e
globosos
Foto ICB UFMG 
Penicillium
spp.
Fungo
anemófilo/oportunista
Produtor da penicilina
Conidióforos com fiálides
terminais e cadeias de
conídios
Foto ICB UFMG 
Rhizopus
spp.
Fungo
anemófilo/oportunista
Micélio não septado
Presença dos rizoides
Esporângios grandes e
terminais
Foto ICB UFMG 
Podem ser reconhecidas pela
coloração de GRAM, sendo muito
maiores que as células bacterianas
Formam colônias cremosas
Zimograma → fermentação de
carboidratos
Auxanograma → utilização de fontes
de carbono e nitrogênio
Identificação de
leveduras
Cryptococcus
neoformans
Levedura
Causa quadros de
meningite, principalmente
em aves
Importância zoonótica
Identificação pelo teste
do nanquim (céu
estrelado)
Foto ICB UFMG 
Candida
albicans
Levedura
Infecta principalmente
pintinhos de 1 dia de vida
Identificação por
coloração de GRAM e
testes bioquímicos
Fungos queratinofílicos
Exame de pelos arrancados, raspados
profundos da pele das bordas das
lesões, raspados de unhas afetadas e
materiais de biópsia
Fungos dermatófitos
Microsporum
canis
Importante causador de
calvície em cães e gatos
Importância zoonótica
Identificado
principalmente por
lâmpada de Wood
Foto ICB UFMG 
Trichophyton
mentagrophytes
Acomete cabeça e
extremidades de cães,
gatos, coelhos e ratos
Exame direto de cadeia
de ectotrix
Foto ICB UFMG 
Temperatura orgânica (37ºC) →
colônias leveduriformes
Temperatura ambiente (25ºC) →
colônias filamentosas
Realizar cultivo/incubação em ambas
as temperaturas 
Fungos dimórficos
Sporothrix
schenckii
Doença granulomatosa
subcutânea que acomete
principalmente gatos
Importância zoonótica
Conídios em formato de
margaridas na forma
filamentosa
Histoplasma
capsulatum
Doença primariamente
pulmonar
Diagnóstico por fezes, swab
de garganta, sangue, urina e
fluido peritoneal
Crescimento miceliano em 20
dias
Diferenciação do saprófito
Sepedonium spp. → cultivo
em ágar sangue ou BHI a 37ºC
Foto ICB UFMG 
Exame micológico direto (EMD)
→ Uso de KOH (ceratolítico)
→ Posicionamento do material entre lâmina e lamínula
→ Material mucopurulento: GRAM e outras colorações
→ Líquor e material respiratório: tinta nanquim
→ Detecta apenas a presença do fungo
Exames!
Depende da presença de antígenos específicos das
espécies fúngicas
Depende da disponibilidade de sequências
caracterizadas e específicas de cada espécie fúngica
Imunodifusão, ELISA e Western blotting
Técnicas moleculares
PCR + eletroforese em agarose
Técnicas imunológicas