AULA 14 COLORAÇÕES E IDENTIFICAÇÃO

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AULA 14 – COLORAÇÕES E IDENTIFICAÇÃO DE
PARASITOS
Prof: Isabela Lima
Esfregaço:
O procedimento mais importante para exame e diagnóstico das infecções parasitárias a preparação de esfregaços fecais. Os esfregaços podem ser preparados com fezes frescas ou fezes preservadas. 
Os esfregaços corados oferecem inúmeras e importantes vantagens: 
permitem um minucioso estudo da morfologia dos organismos corados com a objetiva de imersão; 
raros ou pequenos organismos omitidos no exame direto a fresco podem ser identificados com facilidade; 
os esfregaços corados podem ser arquivados para estudos futuros como material de referência.
 d) os esfregaços positivos, quando necessário, podem ser submetidos a especialistas para uma identificação específica dos organismos.
Para coloração de parasitos, podem ser utilizados os seguintes métodos:
- Hematoxolina férrica, para protozoários;
Ziehl- Neelsen modificado para oocistos;
- Carmin clorídrico, para vermes adultos de helmintos.
A maioria dos métodos de coloração deriva da hematoxilina. A coloração permanente, mais satisfatória e a mais comum, empregada para o estudo dos protozoários intestinais, é o método da hematoxilina férrica.
Entretanto a hematoxilina possui, várias variações
Coloração para Protozoários:
As hematoxilinas são corantes nucleares, oferecendo vantagens por corar principalmente os núcleos e evidenciar as estruturas internas muito delicadas. 
COLORAÇÃO PELA HEMATOXILINA FÉRRICA-ÁCIDO CLORÍDRICO
Uma outra variação da Hematoxilina é a coloração com Hematoxilina e Eosina (H&E) é provavelmente a técnica mais utilizada na coloração dos tecidos, devido à sua simplicidade e à sua capacidade de permitir visualizar uma grande quantidade diferente de estruturas tecidulares. A hematoxilina cora de azul os núcleos, apresentando grande detalhe intranuclear. A eosina cora o citoplasma das células e a maioria das fibras do tecido conjuntivo de forma e intensidade diferentes, variando do rosa ao laranja ou vermelho.
Tecido corado 
https://www.youtube.com/watch?v=Jv_sYhj05b4&t=84s
https://www.youtube.com/watch?v=F7dW7VJEm2I
Alguns parasitologistas preferem outras colorações do que a da hematoxilina, porque elas exigem menores tempos. Entretanto, outros escolhem a hematoxilina, apesar da maior permanência da preparação e do tempo requerido na coloração dos esfregaços. Os métodos permanentes de coloração, não derivados da hematoxilina, revelam o máximo de detalhes e permitem uma identificação mais segura do que qualquer outro procedimento. A coloração da hematoxilina férrica é um processo excelente, mas bastante difícil, o qual deve ser realizado por um técnico experiente para a obtenção de bons resultados
Para os trabalhos de rotina foram descritos métodos rápidos não derivados da hematoxilina, como o tricrômico.
A coloração do tricrômico é recomendada para os trabalhos de rotina. Este é um procedimento de coloração bastante simples e os resultados obtidos são uniformes, mesmo com material fecal fresco, preservado com o fixador APV, ou com o líquido de Schaudinn. O método do tricrômico demonstra detalhes aceitáveis do citoplasma e do núcleo.
Coloração da Amostra 1. Usar luvas durante todas as etapas da coloração. 2. Fixador de Schaudinn, cinco minutos a 50°C, ou uma hora à temperatura ambiente. 3. Solução de álcool etílico a 70% iodado, um minuto. 4. Álcool etílico a 70% (1), um minuto. 5. Corante tricrômico, 2-8 minutos.
6. Solução álcool-ácido, 5-10 segundos. 7. Álcool etílico a 95% (1), lavar rapidamente. 8. Álcool etílico a 95% (2), lavar rapidamente. 9. Álcool etílico absoluto ou carbol-xileno, um minuto. 10. Xilol, 1-3 minutos. 11. Montagem com resina sintética (Cytoseal 60)
Ziehl- Neelsen modificado para oocistos:
Fixação a frio:
Carmin clorídrico:
Bálsamo do Canadá: também chamado terebentina do Canadá ou bálsamo de abeto, é uma terebentina produzida da resina da árvore abeto balsâmico (Abies balsamea) da América do Norte boreal. A resina, dissolvida em óleos essenciais, é um líquido viscoso, pegajoso, incolor ou amarelado que se transforma em uma massa amarelada transparente com a evaporação dos óleos essenciais.
https://www.youtube.com/watch?v=6yj13RuExFM
Outros métodos:
O TF-Test® é o teste mais sensível do mercado, sendo o único a oferecer a coleta tríplice com apenas uma leitura, favorecendo o correto diagnóstico de helmintos e protozoários intestinais.
O principal mérito da técnica utilizada no TF-Test® em relação aos testes convencionais é o de apresentar Alta Sensibilidade diagnóstica, mesmo em pacientes afetados por cargas infecciosas de baixa intensidade.
VANTAGENS
• O líquido conservante que NÃO AGRIDE as formas parasitárias;
• Dupla filtragem por centrífugo-sedimentação;
• Preserva a amostra até 30 dias, sem necessidade de refrigeração;
• Elimina o mau cheiro.
Copro Kit:
COPROKIT - KATO KATZ, utilizado para o disgnóstico parasitológico de fezes que permite a identificação quantitativa e qualitativa dos ovos de helmintos - Ascaris, Schitosoma, Ancilostomídeos, Trichuris, Tanea e Fasciola.
A técnica coprokit kato katz consiste num esfregaço de um 1 grama de fezes sob uma lâmina e a lamínula que deve estar embebida numa solução que contém glicerina, água destilada e verde de malaquita, onde a glicerina ajuda na clarificação das estruturas, a água destilada faz a hidratação e o verde de malaquita colore e marcas os achados.