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Avalaliação 1 - Biologia Molecular Uniasselvi

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1 - Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da 
técnica. Em torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter 
milhares de cópias de DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o 
código a seguir: I- Desnaturação. II- Anelamento. III- Extensão. ( ) Estágio em que os 
primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar. ( ) Estágio inicial, em 
que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das fitas 
simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C. ( ) Estágio 
correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada 
como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C. Assinale a alternativa que 
apresenta a sequência CORRETA: 
A 
I - II - III. 
B 
II - I - III. 
C 
I - III - II. 
D 
III - II - I. 
 
2 - O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento 
de plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em 
pequenos equipamentos. Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a 
plataforma MinION, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: I- Para 
que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a 
serem sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o 
fragmento de DNA a passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são 
detectadas. PORQUE II- Sendo conhecidas as variações características de cada 
nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é formada rapidamente. Assinale a alternativa 
CORRETA: 
A 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
B 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. 
C 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
D 
As asserções I e II são proposições falsas. 
 
3 - A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice 
Wilkins e Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da 
replicação e transmissão da informação genética de uma célula à outra. Sobre o DNA, 
assinale a alternativa CORRETA: 
A 
O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina. 
B 
O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, 
citosina e guanina. 
C 
O DNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela pentose, denominada 
desoxirribose, os nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato. 
D 
O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si. 
 
4 - Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a 
construção de bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa 
CORRETA: 
A 
A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos 
de DNA, incluindo o não codificante. 
B 
As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas 
de restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA. 
C 
As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que 
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa. 
D 
Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo 
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido. 
 
5 - A hibridização in situ foi elaborada com o objetivo de isolar e identificar fragmentos, 
através do anelamento entre duas fitas simples de origens distintas, sejam elas DNA ou 
RNA. Sobre essa técnica, associe os itens, utilizando o código a seguir: I- Northen-
blotting. II- Southern-blotting. III- Hibridização in situ. ( ) Técnica que utiliza sondas de 
ácidos nucleicos, com marcação química, no local em que a molécula de interesse deve 
ser encontrada (RNA dentro da célula, DNA específico em cromossomos). ( ) Técnica 
que avalia padrões de sequências de nucleotídeos de genes do DNA e utiliza sondas de 
DNA molde, os quais são marcados com radiação ou quimicamente. ( ) Nesta técnica, o 
RNA mensageiro (mRNA) é utilizado a fim de buscar comparar situações distintas, 
como, por exemplo, utilizar amostras controle como padrão para expressão do gene de 
interesse e, assim, comparar com a amostra de interesse. Assinale a alternativa que 
apresenta a sequência CORRETA: 
A 
I - III - II. 
B 
I - II - III. 
C 
III - II - I. 
D 
II - I - III. 
 
6 - Através da técnica de eletroforese, ocorre a separação de moléculas em populações 
de tamanhos semelhantes, as quais são visualizadas como bandas no gel através de 
marcadores específicos. Sobre os marcadores para técnica de eletroforese em gel, 
assinale a alternativa CORRETA: 
A 
O marcador ideal é o brometo de etídio, um corante fluorescente, que se liga ao DNA ou 
RNA e possibilita a sua visualização através de luz ultravioleta (UV). 
B 
O corante mais utilizado para marcação de DNA é o azul de brometo. 
C 
O corante ideal para eletroforese de DNA e RNA é aquele que não se liga ao DNA ou 
ao RNA, ficando somente na solução tampão da técnica. 
D 
O marcador ideal para a técnica de eletroforese em gel será aquele capaz de separar as 
bandas de DNA em diferentes tons de cores. 
7 - A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da 
molécula a ser isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e 
poliacrilamida para a técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: I- A 
poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base 
nitrogenada de diferença. II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda 
presente no gel, representa um agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. III- 
No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se 
movimentar, enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de 
agarose. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a sentença II está correta. 
B 
As sentenças I, II e III estão corretas. 
C 
Somente a sentença I está correta. 
D 
Somente a sentença III está correta. 
 
8 - Com o passar do tempo, as técnicas de sequenciamento ficaram mais sofisticadas e 
automatizadas. Sobre o sequenciamento de segunda geração, analise as sentenças a 
seguir: I- O Next Generation Sequencing (NGS) não utiliza nucleotídeos terminadores 
de cadeira, permitindo a criação de plataformas mais eficientes e rápidas. II- Os 
métodos de segunda geração compreendem o uso de plataformas portáteis com 
processamento rápido e eficiente, em plataformas do tamanho de um pen drive. III- Os 
métodos de segunda geração compreendem o pirosequenciamento, o sequenciamento 
por síntese, sequenciamento por terminação de cadeia reversível, sequenciamento por 
hibridização e ligação, dentre outros. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As sentenças I e III estão corretas. 
B 
Somente a sentença II está correta. 
C 
Somente a sentença I está correta. 
D 
As sentenças I e II estão corretas. 
 
9 - A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar 
as sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de 
amplificar a molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA 
de forma portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos 
equipamentos, semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada. 
B 
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o 
DNA a ser sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a 
uma placa de vidro por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, 
que será submetida ao PCR. 
C 
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado emfragmentos de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada 
novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção 
ocorre em tempo real. 
D 
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas 
sólidas, nas quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, 
formando uma biblioteca de DNA. 
 
10 - ara construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas 
de restrição e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma 
biblioteca de DNA, ordene os itens a seguir: I- Fragmentos de DNA são inseridos em 
vetores idênticos e ligados através da DNA ligase. II- Clivado do DNA com uma 
enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de DNA. III- Inserção 
do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos. IV- 
Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
I - IV - III - II. 
B 
I - III - II - IV. 
C 
IV - II - I - III. 
D 
IV - II - III - I.

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