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Preparação de Tecidos para Microscopia

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Histotécnica
 Microscopia optica- principio
Luz da fonte é condensada, atravessa o espécime e chega na objetiva. Imagem do espécime é aumentada e projetada na ocular que amplia e projeta na retina.
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PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA MICROSCOPIA
Fixação desidratação e diafanização inclusão microtomia montagem e coloração proteçãoHistotécnica 
Fixação evitar a digestão dos tecidos por enzimas presentes nas próprias células ou em bactérias, endurecer os fragmentos, preservar em grande parte a estrutura e a composição molecular dos tecidos preservação da morfologia.
Fixação química – os tecidos são imersos em soluções de agente desnaturantes ou de agentes que estabilizam as moléculas formando pontes com moléculas vizinhas. É usado formol para fixação química.
Após a fixação, os fragmentos de tecidos e órgãos devem ser infiltrados com substancias que proporcionem uma consistência rígida.
Fixação física- congelamento
Primeira etapa: desidratação//Segunda: diafanização
Desidratação: Remove agua usando alcool 
Diafanização- segunda etapa. Remove o álcool usando xilol
Inclusão – Endurecimento da amostra. Parafina não se mistura com agua e álcool, xilol se mistura com parafina. Derrete a parafina coloca o corpo q tava no xilol na parafina e ai endurece. Tem parafina no material também
Microtomia - micrótomo utilizado p cortar parafina
Montagem e coloração 
Proteção – aumenta o tempo de vida útil do corte
_____________________________________________________
COLORAÇÕES EM HISTOLOGIA- PRINCÍPIO ACIDO-BASE
Hematoxilina
-corante básico
-cor azul/roxo mitocôndrias
-colore acido (núcleo)
-Basófilos -afinidade por corante básico
Eosina
-Corante acido
-cor rosa
-colore base (proteínas, mitocôndrias)
Acidófilos
DNA TEM CARATER ACIDO 
NUCLEO TEM CARATER ACIDO HEMATOXILINA COLORE O NUCLEO 
EM VOLTA DO NUCLEO TEM O CITOPLASMA DE OUTRA COR
PROTEINA GERALMENTE TEM CARATER BASICO, CONFERE COLORAÇÃO ROSA
NUCLEO ROXO E CITOPLASMA ROSA PERMITINDO DIFERENCIAR ESSES DOIS COMPARTIMENTOS
Tricrômio de masson 
-3 cores
Periódico de Schiff
Colore estruturas com alta proporção de macromoléculas de carboidrato (glicogênio, glicoproteína) 
Artefatos de técnica:
 Defeitos no material provocados por: ranhuras, dobras ou rugas, bolhas, coloração aberrante
 
Direção de cortes

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