Dosagem de hemoglobina

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Dosagem de hemoglobina 
 
- A determinação da concentração de Hb pelos 
métodos manual e automatizado baseia-se no 
mesmo princípio. 
- As células são lisadas e todas as formas de Hb 
são convertidas em cianometahemoglobina, que 
é um componente estável e mensurável pela 
determinação da absorbância a 540nm. 
- Diferente da medida do Ht, que é calculado na 
maioria dos equipamentos, a [ ] de Hb é feita 
diretamente, tornando essa medida o parâmetro 
de escolha para o diagnóstico de anemia. 
 
Princípio: Determinação colorimétrica pelo 
método da cianometahemoglobina. 
 
 
MÉTODO MANUAL 
 
Princípio: utiliza-se uma solução de 
ferricianeto (líquido de Drabkin), que converte o 
ferro da hemoglobina (ferro ferroso) em ferro 
férrico, formando a metahemoglobina. Esta se 
combina com o cianeto de potássio para formar a 
cianometahemoglobina, que é medida em 
espectrofotômetro a 540nm. 
OBS: Utiliza-se sempre uma solução padrão 
para controle, cuja concentração de hemoglobina 
é conhecida. 
*Líquido de Drabkin: Solução de cianeto de 
potássio + ferrocianeto de potássio. 
 
PROCEDIMENTO: 
1. Colocar 20uL de amostra de sangue total em 
5 mL do líquido de Drabkin em tudo de 
ensaio. 
 
2. Homogeneizar 
3. Agitar, aguardar pelo menos 5 minutos e 
determinar a absorbância em 540nm. 
Zerando o aparelho com o próprio líquido de 
Drabkin (branco). 
 
CÁLCULO: 
 
 Hb = Fc X Absorbância da amostra 
 
Fc → fator de correção 
- Obtido através da leitura da 
absorbância do padrão de hemoglobina, 
feito em triplicata. 
- Concentração do padrão/média das 
absorbâncias do padrão. 
 
Unidade de medida: g/dL 
 
VALORES DE REFERÊNCIA 
 
HOMENS 13,0 a 18,0 g/dL 
MULHERES 12,0 a 16,0 g/dL