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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO MARANHÃO CECEN- CENTRO DE EDCAÇÃO, CIÊNCIAS EXATAS E NATURAIS CURSO: LICENCIATURA CIÊNCIAS BIOLÓGICAS RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA GENÉTICA ANAJATUBA/MA 2022 CÉSAR MURILO DE OLIVEIRA FILHO DÉBORA MELONIO MORAIS LIMA JOÃO BATISTA PEREIRA DUTRA UNIVERSIDADE ESTADUAL DO MARANHÃO – UEMA PROF. FERNANDA SILVA DA PAZ ANAJATUBA/MA 2022 SUMÁRIO 1. Identificação 2. Resumo 3. Introdução 4. Materiais e Métodos 5. Resultados e Discussões 6. Conclusões 7. Referências 1. IDENTIFICAÇÃO Relatório de aula prática Título: Extração de DNA de cebola Nome dos autores: César Murilo de Oliveira Filho, Débora Melonio Morais Lima, João Batista Pereira Dutra. 2. RESUMO Presente relato traz uma proposta pedagógica de uma aula prática, que foi elaborada como atividade prática na disciplina de Genética no curso de Ciências Biológicas do programa ensinar (UEMA). A prática apresentada é nomeada como “extração do DNA da cebola”, o seu objetivo consiste em possibilitar uma melhor compreensão do conteúdo sobre DNA na área da genética. Nesse contexto destacamos que as práticas pedagógicas são uma forma educativa de estimular a criticidade, a reflexão do aluno no processo de ensino-aprendizagem, esta atividade proporciona grandes aprendizagens para nós docentes. Como observado, as práticas pedagógicas constituem uma relevante ferramenta que permite aos alunos compreensão dos temas propostos. 3. INTRODUÇÃO A estrutura tridimensional da molécula de DNA - a dupla hélice - foi descoberta em 1953, por Francis Crick, James Watson e Maurice Wilkins. Eles construíram modelos de cartolina e arame para entender e descrever o DNA, e o resultado foi publicado em duas páginas da revista Nature, em 25 de abril de 1953, há pouco mais de 50 anos. O texto de 900 palavras era acompanhado de um esboço simples da famosa dupla hélice e atraiu pouca atenção da comunidade científica. O estudo só ganhou destaque em 1957, quando cientistas demonstraram que o DNA se auto-replica. Sem dúvida, como em outras descobertas, tributo deve ser feito a alguns predecessores como Gregor Mendel, cujas pesquisas sobre hereditariedade ficaram esquecidas por mais de 30 anos, até serem redescobertas em 1900. A descoberta de Crick, Watson e Wilkins abriu uma nova era para a ciência e, desde então, vem causando uma verdadeira revolução na investigação científica ligada às ciências da vida. O ácido de Desoxirribonucleico (DNA) é de suma importância para todos os seres vivos desde pequenos vírus até girafas pois nesta molécula estão todas as características que serão expressas no indivíduo e em seus descendentes. O DNA não é uma molécula visível a olho nu por está razão realizaremos a prática com a Allium cepa (cebola). Este trabalho abordará as etapas vivenciais na extração do DNA de uma cebola, apresentará os dados bem como os resultados obtidos. A prática foi organizada pela disciplina de genética a fim de uma compreensão das técnicas realizadas em laboratório, para extração do DNA. 4. MATERIAS E MÉTODOS Material Uma cebola grande; Faca de cozinha; Dois recipientes de 70ml 1 recipiente de 500ml Banho-maria(+-60°C); Água filtrada; Sal de cozinha (NaCl); Detergente incolor; Álcool etílico 70% (gelado); 1 Crivo; Gelo; Papel filtro de café Pilão (para maceração). Metodologia Primeiro foi picada a cebola em pedaços bem pequenos e foi macerada no pilão. Em seguida colocamos no recipiente 1 colher de sopa de sal, 4 de detergente e completamos o volume para 75ml com água; mexendo bem até a total dissolução; colocamos a cebola picada juntamente com a solução de detergente e sal no recipiente e filtramos a solução para um segundo recipiente e levamos ao banho-maria por 20 minutos. Essa foi a parte mais demorada do processo. Depois de retirarmos a mistura do banho-maria colocamos ela em um vasilhame com o gelo picado e colocamos na geladeira durante 5 minutos. Em seguida adicionamos ao filtrado cerca de 30mL de álcool gelado, deixando descansar por 10 minutos. De início já foi possível observar a formação dos fios de DNA, e com o passar do tempo foi ficando mais visível a formação dos “fios de DNA de cebola”. Ao final foi grande a alegria e satisfação por termos conseguido concluir esse experimento com êxito. 5. RESULTADOS E DISCUSSÃO Com a extração do DNA da cebola foi possível notar que ocorrem sobretudo três etapas que consistem em: Primeira Etapa Quebra físico-química das paredes da membrana celulares a fim de se obter a liberação de material genético, através da trituração, onde está realiza a quebra da parede celular e a ruptura da membrana. Segunda Etapa Desmembração dos cromossomos em suas unidades fulcrais: DNA e proteínas. Terceira Etapa Apartamento do DNA dos demais elementos celulares. Funções dos materiais utilizados: Através do detergente é dissolvido a bicamada lipídica que constitui a membrana plasmática, tendo ainda a função de desagregar os núcleos e cromossomos, liberando o DNA e proteínas (a desnaturação das proteínas é ocasionada pelo laurel sulfato de sódio, que irá dissociar as proteínas do DNA cromossômico), que irão se dispensar na solução. A disposição de sal colabora para neutralização da carga negativa do DNA através dos íons positivos de Na+, permitindo ao DNA precipitar na solução aquosa. A água e o sal juntamente com detergente contribuem para a alteração de pH, devido às concentrações em meio externo, que acarretará na plasmólise (retração de volume de água) da célula. O banho-maria realizou o desarranjo dos fosfolipídios das membranas, além de promover a desnaturação parcial de algumas enzimas, a exemplo do tipo DNAse, que em suma vai evitar que o DNA seja fragmentado em pequenos pedaços. O álcool gelado irá promover uma mistura heterogênea em duas fases, devido à sua densidade ser menor do que a da água, ficando na posição superior juntamente ente com as proteínas. Devido o ambiente salino, o DNA começa a se aglutinar, surgindo uma massa filamentosa de cor esbranquiçada entre a solução de álcool e a de detergente, sal e água. 6. CONCLUSÃO Com realização do experimento foi possível verificar que as informações genéticas encontram-se bem protegidas sendo necessárias várias etapas para chegar até elas. E apesar de o DNA ser a maior molécula da célula, a sua estrutura não se pode observar a olho nu devido ao seu tamanho microscópico. Tal como não podemos observar a maior parte das células a olho nu mas podemos observar um organismo constituído por milhões de células, também não podemos observar uma molécula de DNA mas podemos observar, como verificamos na experiência, milhões de células DNA aglomeradas. 7. REFERÊNCIAS GRIFFITHS, Anthony J. F. et al. Introdução à genética. 11. ed. ed., reimp.. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2016 / 2017. Campbell, M.R. & Farrell, S.O. Bioquímica ‐ Vol 2 ‐ Biologia Molecular. 1ª. edição. Editora Cengage Learning, 2007. Alberts, B.; Bray, D.; Hopkin, K.; Johnson, A.; Lewis, J.; Raff, M.; Roberts, K.; Walter, P. Fundamentos da Biologia Celular. 3ª Edição brasileira. Artmed, 2011.
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