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Espermograma Profa. MSc. Lígia Maria Micai Gomide • Os espermatozóides são as células reprodutivas masculinas que possuem a função de fornecer metade dos cromossomos para a constituição do zigoto através do processo da fecundação. • A morfologia dos espermatozóides é fundamentada em cabeça, colo (peça intermediária) e cauda, esta última ainda subdividida em peça principal, a qual refere-se à primeira porção da cauda logo após o colo, e em peça terminal referindo-se na porção posterior da cauda, cuja função é movimentação no momento em que é ejaculado para o interior do trato genital interno feminino. Introdução Introdução • A cabeça é constituída pelo acrossoma, além da própria membrana celular, cuja função está em guardar o núcleo (onde se encontra o material genético) e participar da fecundação através do processo de capacitação. • A capacitação é quando ocorre a reação acrossômica pela liberação de enzimas proteolíticas, entre elas a enzima hialuronidase, cuja função é digerir filamentos proteoglicanos com afinidade à membrana do óvulo para promover a penetração da cabeça do espermatozoide. Espermatozoide • A peça intermediária é a parte localizada entre a cabeça e a cauda da célula e contém organelas como as mitocôndrias e os centríolos para fornecer energia para a movimentação da cauda. Espermatozoide • O sêmen é composto por espermatozoides e pelos fluídos orgânicos secretados pelas glândulas sexuais como a glândula bulbouretral, a vesícula seminal e a próstata. Produção de sêmen Patologias do trato reprodutor masculino Patologias do trato reprodutor masculino • Varicocele • Prostatite • Câncer de próstata • Câncer de testículo Patologias do trato reprodutor masculino Varicocele • A varicocele é uma dilatação anormal das veias situadas nos testículos que impedem a passagem do sangue fazendo com que este se acumule e provoque um inchaço local. • O resultado é o acúmulo de substâncias nocivas e o aumento da temperatura no local, que acaba por diminuir a produção de espermatozoides. Patologias do trato reprodutor masculino Varicocele Patologias do trato reprodutor masculino Prostatite • A prostatite é a inflamação da próstata que normalmente é causada por uma infecção bacteriana podendo também ser decorrente de infecções fúngicas, virais e até mesmo por protozoários. Patologias do trato reprodutor masculino Prostatite • A prostatite pode levar a um quadro de azoospermia (ausência de espermatozoides no sêmen), uma vez que a imflamação irá impedir a passagem e liberação dos espermatozoides. Patologias do trato reprodutor masculino Câncer de próstata • Na maioria dos casos, o tumor apresenta um crescimento lento, levando cerca de 15 anos para atingir 1 cm³ e acometendo homens acima de 50 anos de idade. Patologias do trato reprodutor masculino Câncer de próstata • Da mesma forma que na prostatite, o câncer de próstata pode levar a uma obstrução da passagem de espermatozoides levando a uma diminuição dessas células no sêmen. Patologias do trato reprodutor masculino Câncer de testículo • Forma de câncer comum em homens entre 15 e 35 anos, e que possui tratamentos eficientes e altas chances de cura. • Contudo, como sempre que se trata de câncer, o diagnóstico deve ser feito rapidamente e o tratamento não deve ser postergado. • Por sua baixa incidência e boas chances de cura, o câncer testicular não é tão difundido e nem são feitas tantas campanhas de prevenção. Patologias do trato reprodutor masculino Câncer de testículo • No caso do câncer testicular ocorrerá uma diminuição da produção de espermatozoides, o que ocasionará alterações no sêmen. Espermograma • É um exame laboratorial que analisa a qualidade do sêmen do paciente, segundo critérios definidos pela Organização Mundial da Saúde, a partir de uma amostra coletada pelo homem por meio de masturbação. • Ele analisa desde o aspecto do ejaculado em si, até a quantidade e as condições dos espermatozoides na amostra, podendo assim verificar como está a fertilidade do homem, além de muitas vezes apontar para outros fatores da saúde reprodutiva masculina, como as condições da próstata, por exemplo. Espermograma • O objetivo do espermograma é descrever os processos de identificação qualitativos e quantitativos aplicados aos espermatozoides. Espermograma Coleta • O modo preferencial de coleta é a masturbação. • A coleta por coito interrompido não é indicada, pois pode haver perda da primeira fração do ejaculado ou contaminação da flora vaginal. • Em casos selecionados, pode-se autorizar a coleta pelo ato sexual utilizando preservativo atóxico Espermograma Sala de coleta • O local de coleta tem efeito direto sobre os parâmetros seminais, especialmente sobre o volume ejaculado. • Preferencialmente, a amostra seminal deve ser colhida em uma sala silenciosa, isolada, limpa, com banheiro anexo e próxima ao laboratório onde será realizada a análise. Espermograma Importante • Os parâmetros seminais são influenciados por temperaturas abaixo de 25 °C ou acima de 37 °C. • Quando isso ocorrer, os resultados obtidos podem não ser confiáveis. Espermograma Frasco coletor • O sêmen deve ser colhido utilizando-se um frasco estéril, descartável, composto de polipropileno, de boca larga (cerca de 7 cm de diâmetro) e com tampa de rosca. • O laboratório sempre deve fornecer o frasco coletor, cujo lote é previamente testado quanto à toxicidade do plástico sobre a motilidade espermática. Espermograma Parâmetros avaliados Parâmetros avaliados no espermograma • Viscosidade • Aspecto • Coloração • Volume • pH • Agregação e aglutinação • Motilidade • Concentração espermática • Morfologia espermática • Vitalidade espermática • Concentração de células redondas e leucócitos Espermograma Viscosidade • A viscosidade do sêmen deve ser avaliada após a liquefação, com o auxílio de uma pipeta sorológica de 5 ml. • A viscosidade é considerada normal quando a amostra, ao sair da pipeta por ação somente da força da gravidade, goteja ou forma um filamento com extensão inferior a 2 cm. • Quando o filamento formado for superior a 2 cm, a viscosidade é descrita como aumentada. Espermograma Viscosidade Espermograma Aspecto • O aspecto do sêmen é modificado à medida que os processos de coagulação e liquefação acontecem. • Imediatamente após a coleta, a amostra seminal tem aspecto heterogêneo, espesso e gelatinoso, tornando-se opalescente, homogêneo e mais fluído após a liquefação. Espermograma Coloração • As colorações branca ou acinzentada são consideradas normais. • Alteração na cor pode indicar doenças locais ou sistêmicas (infecção, hepatite) ou uso de medicamentos (antibióticos, antissépticos urinários ou vitaminas). Espermograma Coloração • A coloração avermelhada, em razão da presença de hemácias, é conhecida por hematospermia e pode resultar de um processo inflamatório, obstrução ou cistos nos dutos ejaculatórios, neoplasias, anormalidades vasculares, entre outros. Espermograma Volume • O volume seminal pode ser medido com auxílio de uma pipeta sorológica graduada de 5 ml, com intervalo de 0,1 ml, aspirando-se toda amostra colhida após a liquefação. • Valores normais são considerados ≥ 1,5 ml. Espermograma pH • O pH seminal é resultado da mistura das secreções das vesículas seminais (pH alcalino) e da próstata (pH ácido). • O valor normal do pH seminal é entre 7,2-8,0. • Normalmente faz-se medição com fitas reagentes. Espermograma Agregação e aglutinação • Para isso, 20 µL do sêmen liquefeito são colocados sobre uma lâmina de microscopia e recobertos com lamínula. • Existem dois tipos de aglutinação: ✓ Inespecífica (também conhecida como agregação, em que se observam espermatozoides imóveis aderidos a células ou debris celulares). ✓ Específica (espermatozoides aderidosuns aos outros); esta última é sugestiva da presença de anticorpos antiespermatozoides. Espermograma Agregação e aglutinação Específica Inespecífica Espermograma Motilidade • A motilidade é definida como o movimento espontâneo dos espermatozoides. • A determinação do percentual de espermatozoides móveis e sua progressão é realizada manualmente ou por meio da utilização de sistemas computadorizados. Espermograma Motilidade • Os espermatozoides podem ser classificados de acordo com três padrões de motilidade (OMS, 2010), a saber: ✓ Motilidade progressiva (se movem em uma direção) ✓ Motilidade não progressiva (movem a cauda mas não se movimentam) ✓ Imóveis (não movem a cauda) Espermograma Motilidade • Ainda, é possível observar quatro tipos de movimentos divididos em grupos: Tipos Significado Tipo A Espermatozoides com progressão linear rápida Tipo B Espermatozoides com progressão linear lenta Tipo C Espermatozoides com motilidade não progressiva Tipo D Imóveis Espermograma Motilidade • De acordo com os valores de referência da OMS (2010): Parâmetros Valor de referência Motilidade total (%) ≥ 40 (A+B+C) Motilidade progressiva (%) ≥ 32 (A+B) Espermograma Concentração espermática • A concentração espermática é definida como o número de espermatozoides em milhões por mililitro de sêmen (x106 por ml). • A contagem dos espermatozoides deve ser realizada por meio de uma câmara de Neubauer modificada. • Ela possui 0,100 mm de profundidade e um retículo central contendo 25 quadrados grandes, cada um com 16 quadrados menores. Espermograma Concentração espermática • Para se determinar a concentração espermática, conta-se o número de espermatozoides presentes nos 25 quadrados grandes (cinco fileiras) em duplicata, obtendo-se a média entre as duas contagens. • A contagem total (do ejaculado) é obtida multiplicando-se o valor da concentração de espermatozoides pelo volume da amostra seminal, e o resultado é expresso em milhões de espermatozoides por ejaculado. Espermograma Concentração espermática Espermograma Concentração espermática • Com base nos valores de referência preconizados pela OMS (2010): Parâmetro Valor de referência Concentração espermática (milhões/ml) ≥ 15 Contagem total (milhões) ≥ 39 Espermograma Morfologia espermática • A morfologia é definida pela forma e pelo aspecto dos espermatozoides. • Entre os vários sistemas de classificação morfológica, o recomendado pelo manual da OMS é o critério estrito de Tygerberg. • A análise da morfologia é realizada preparando-se um esfregaço com 5 μl de sêmen liquefeito. Espermograma Morfologia espermática • A lâmina de microscopia utilizada para a confecção do esfregaço deve ser previamente limpa com álcool 70%, e, após a fixação e coloração, no mínimo duzentos espermatozoides são contados e classificados como normais e anormais. Espermograma Morfologia espermática Espermograma Morfologia espermática • Com base nos valores de referência da OMS (2010): Parâmetro Valor de referência Morfologia (%) ≥ 4 Espermograma Vitalidade espermática • O teste rotineiramente empregado para a avaliação da vitalidade espermática utiliza o corante supravital eosina. • Espermatozoides vivos apresentam membrana plasmática íntegra e não permitem a passagem da eosina para o interior da célula (espermatozoide não corado). • O mesmo não ocorre com espermatozoides mortos, cujas membranas não estão intactas (espermatozoide corado de rosa). Espermograma Vitalidade espermática Vivos Mortos Espermograma Vitalidade espermática • Com base nos valores preconizados pela OMS (2010): Parâmetro Valor de referência Vitalidade (%) ≥ 58 Espermograma Concentração de células redondas e leucócitos • Normalmente, a amostra seminal possui outros elementos celulares além dos espermatozoides, como células epiteliais do trato geniturinário, células prostáticas superficiais ou colunares, células germinativas imaturas (como espermatócitos e espermátides), além de leucócitos. • A determinação da concentração desse grupo de células referidas como “redondas” é realizada empregando-se a mesma metodologia descrita para a determinação da concentração de espermatozoides. Espermograma Concentração de células redondas e leucócitos • Do ponto de vista clínico, o mais importante é diferenciar os leucócitos das outras células redondas, pois a ocorrência de um número elevado de leucócitos no sêmen pode indicar infecção genital, alta quantidade de anticorpos antiespermatozoides, função espermática deficiente e, em consequência, diminuição da fertilidade. • Entre as diversas técnicas existentes para a identificação dos leucócitos no sêmen, a mais simples é o teste de Endtz ou teste da peroxidase. Espermograma Concentração de células redondas e leucócitos • Esse teste permite identificar os neutrófilos polimorfonucleares, que são os de maior importância clínica. • Nesse teste, uma alíquota de sêmen liquefeito é incubada com um reagente contendo água oxigenada, que reage com a peroxidase presente nos grânulos dos neutrófilos. • Após a reação, os neutrófilos coram-se de marrom e são facilmente identificados à microscopia óptica. Espermograma Concentração de células redondas e leucócitos Célula peroxidase negativa Célula peroxidase positiva Espermograma Concentração de células redondas e leucócitos • Com base nos critérios da OMS (2010): Parâmetro Valor de referência Número de leucócitos (milhões/ml) < 1,0 Espermograma Dúvidas?
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