Aula Prática 12 - Análise Bacteriológica da Água

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07/07/2022
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Análise Bacteriológica da Água
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Análise Bacteriológica da Água
Introdução: 
4
Análise Bacteriológica da Água
Introdução: Qualidade da água - Parâmetros 
Físico-Químicos
Químicos
Microbiológicos
Oxigênio dissolvido, pH, cor, dureza, etc.
Orgânicos
Inorgânicos
Benzeno, pesticidas, tolueno, etc.
Fósforo, chumbo, nitrito, etc.
Aula de hoje
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Análise Bacteriológica da Água
Introdução -Microbiota normal da água 
Bactérias comumente encontradas nos ambientes aquáticos:
Pseudomonas
Alcaligenes
Proteus
Bacillus
Caulobacter
Cianobactérias
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Análise Bacteriológica da Água
Introdução: Doenças veiculadas pela água
Doenças Agente etiológico
Bactérias
Shigelose Shigella spp.
Salmonelose Salmonella spp.
Gastroenterite Campylobacter spp.
Cólera Vibrio cholerae
Vírus
Hepatite infecciosa Vírus da hepatite A
Poliomielite Poliovírus
Diarreia Vírus Norwalk
Protozoários 
Disenteria Entamoeba histolytica
Giardíase Giardia lamblia 8
Análise Bacteriológica da Água
Por que não avaliar diretamente patogênicos? 
Veiculação é esporádica
Sobrevivência por períodos curtos
Não são detectados pelos métodos convencionais quando a 
contaminação é pequena
Métodos de análise trabalhosos, demorados e onerosos
Solução: análise de microrganismos indicadores
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Análise Bacteriológica da Água
Características de um bom microrganismo indicador: 
Estar presente na água quando microrganismos patogênicos estiverem presentes
Sua presença deve estar correlacionada com o nível de poluição da água
Estar presente na água poluída e ausente na água potável
Deve sobreviver melhor e por mais tempo que os microrganismos patogênicos
Continua >>>
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Análise Bacteriológica da Água
Estar presente em número maior que os microrganismos patogênicos
Deve possuir propriedades uniformes e estáveis
Ser facilmente detectado por técnicas convencionais
Características de um bom microrganismo indicador: 
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Análise Bacteriológica da Água
Indicador de qualidade microbiológica da água: 
Coliformes Totais 
Fermentam a lactose com produção de gás em 24 a 48 h/35 ºC
Bacilos Gram negativos, anaeróbios facultativos, não formadores de esporos
Gêneros: Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter
Capazes de multiplicar na presença de sais biliares ou agentes tensoativos
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Análise Bacteriológica da Água
Indicador de qualidade microbiológica da água: 
Coliformes Termotolerantes 
Fermentam a lactose com produção de gás em 24h/44,5 ºC
Indicam a contaminação recente da água com material fecal e 
potencial presença de microrganismos patogênicos
Principal representante: Escherichia coli (Origem fecal)
Coliformes que vivem exclusivamente no TGI de animais homeotérmicos
Indicadores de contaminação fecal
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Análise Bacteriológica da Água
Indicador de qualidade microbiológica da água: 
Em águas salinas pode-se utilizar a bactéria Enterococcus faecalis
como indicador de contaminação (maior resistência à salinidade).
Indicador de contaminação fecal
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Análise Bacteriológica da Água
Legislação normativa: 
Anexo XX 
Do controle e da vigilância da qualidade da água para consumo 
humano e seu padrão de potabilidade.
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Art. 3º Toda água destinada ao consumo humano, distribuída
coletivamente por meio de sistema ou solução alternativa coletiva
de abastecimento de água, deve ser objeto de controle e vigilância
da qualidade da água.
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Análise Bacteriológica da Água
Art. 5°Para os fins deste anexo, são adotadas as seguintes definições:
I - água para consumo humano: água potável destinada à ingestão, preparação e
produção de alimentos e à higiene pessoal, independentemente da sua origem;
II - água potável: água que atenda ao padrão de potabilidade estabelecido nesta
Portaria e que não ofereça riscos à saúde;
III - padrão de potabilidade: conjunto de valores permitidos como parâmetro da
qualidade da água para consumo humano, conforme definido nesta Portaria;
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Legislação normativa: 
17
Análise Bacteriológica da Água
Art. 27. A água potável deve estar em conformidade com padrão
microbiológico, conforme disposto no Anexo 1 do Anexo XX e demais
disposições deste Anexo.
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Legislação normativa: 
18
Análise Bacteriológica da Água
(1) VMP = Valor máximo permitido; (2) Indicador de contaminação fecal; (3) Indicador de eficiência do tratamento e (4) Indicador de integridade do sistema de distribuição (Reservatórios e rede)
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Legislação normativa: 
\
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Análise Bacteriológica da Água
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Art. 28. A determinação de bactérias heterotróficas deve ser realizada como um
dos parâmetros para avaliar a integridade do sistema de distribuição (reservatório
e rede).
§ 3º Alterações bruscas ou acima do usual na contagem de bactérias
heterotróficas devem ser investigadas para identificação de irregularidade e
providências devem ser adotadas para o restabelecimento da integridade do
sistema de distribuição (reservatório e rede), recomendando-se que não se
ultrapasse o limite de 500 UFC/mL.
Legislação normativa: 
Bactérias Heterotróficas Totais
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Análise Bacteriológica da Água
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Art. 22. As metodologias analíticas para determinação dos parâmetros previstos
neste Anexo devem atender às normas nacionais ou internacionais mais
recentes, tais como:
I - Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA,
AWWA e WEF);
II - United States Environmental Protection Agency (USEPA);
III - Normas publicadas pela International Standartization Organization (ISO); e
IV - Metodologias propostas pela Organização Mundial à Saúde (OMS).
Legislação normativa: 
Técnica da membrana filtrante
22
Análise Bacteriológica da Água
Art. 37. § 1º Para minimizar os riscos de contaminação da água para
consumo humano com cianotoxinas, deve ser realizado o
monitoramento de cianobactérias, [...] no ponto de captação do
manancial superficial [...].
§4º Quando a densidade de cianobactérias exceder 20.000 células/mL,
deve-se realizar análise de cianotoxinas na água do manancial, no
ponto de captação, com frequência semanal.
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Legislação normativa: 
Monitoramento de cianobactérias + cianotoxinas
24
Análise Bacteriológica da Água
Na aula de hoje: 
Fonte (Figura): https://svgsilh.com/image/2085195.html
Teste presuntivo (NMP – Número Mais Provável)
Contagem de bactérias heterotróficas totais
Detecção de coliformes termotolerantes – E. coli
pela Técnica da membrana filtrante
Análise bacteriológica da água
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Detecção de Coliformes Totais
Detecção de Escherichia coli
Detecção de Coliformes Termotolerantes
Testes 
Confirmativos
Amostra de água 
Teste Presuntivo
Presença de Gás
ou
Análise 
Conclusiva
Ausência de Gás
Água 
potável=
1º PASSO
2º PASSO
(*)
(*) – Depende do objetivo da análise 27
Caldo Lactose-Verde Brilhante-Bile
(24 a 48 h/35 ºC): Produção de gás: 
presença de coliformes
Detecção de Coliformes Totais
Ágar EMB(48 h/44,5 ºC): 
Colônias escuras com brilho 
verde metálico
Detecção de Escherichia coli
Caldo EC MUG (24 h/44,5 ºC):
Presença de FluorescênciaDetecção de Coliformes Termotolerantes
Caldo EC (24 h/44,5 ºC):
Produção de gás:
Presença de coliformes termotolerantes
Testes Confirmativos
Amostra de água 
Teste Presuntivo
Caldo Lactose/LST (24 a 48 h/35 ºC)
Ausência de Gás(+) Gás
28
Análise Bacteriológica da Água
1
1 mL da amostra
9 mL de meio 
Concentração = 1X
0,1 mL da amostra
9,9 mL de meio
Concentração= 1X
10 mL da amostra
10 mL de meio 
Concentração = 2X
Técnica de inóculo em tubos múltiplos (NMP): 
Tubo de Durham
Amostra de água Na técnica do 
NMP é possível 
usar séries de 3, 
5, 7 e 10 tubos
29
Análise Bacteriológica da Água
Qual meio de cultivo é utilizado?
Por que 3 tubos tem o meio 2 x 
concentrado?
Tubo de Durham? Para que serve?
1
1 mL da amostra
9 mL de meio
Concentração 1X
0,1 mL da amostra
9,9 mL de meio
Concentração 1X
10 mL da amostra
10 mL de meio
Concentração 2X
Tubo de Durham
Teste presuntivo para coliformes: 
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30
Análise Bacteriológica da Água
1
1 mL da amostra
9 mL de caldo LST
Concentração 1X
0,1 mL da amostra
9,9 mL de meio
Concentração 1X
10 mL da amostra
10 mL de caldo LST
Concentração 2X
Tubos contendo caldo LST - Lauril
Sulfato Triptona - que contém lactose
RESULTADO POSITIVO
Produção de gás
Tubo de Durham
Formação de bolhas de 
gás no tubo de Durham
Teste presuntivo para coliformes: 
32
Análise Bacteriológica da Água
1
Procedimento Experimental: Coleta de amostras
AMOSTRA 1 
Água Tratada
1
AMOSTRA 2 
Água não tratada2
https://drive.google.com/file/d/1rTaYPJgeu1YeuOEuvLs
kngEw0dPeufiH/view?usp=sharing
Vídeo – Coleta de amostras de água
33
Análise Bacteriológica da Água
1
1 mL da amostra
9 mL de caldo LST
Concentração 1X
0,1 mL da amostra
9,9 mL de caldo LST
Concentração 1X
10 mL da amostra
10 mL de caldo LST
Concentração 2X
Procedimento Experimental: Teste Presuntivo 
AMOSTRA 1 
Água Tratada
Tubo de Durham
1
AMOSTRA 2 
Água não tratada2
34
Análise Bacteriológica da Água
1 mL da amostra
9 mL de caldo LST
Concentração 1X
0,1 mL da amostra
9,9 mL de caldo LST
Concentração 1X
10 mL da amostra
10 mL de caldo LST
Concentração 2X
Procedimento Experimental: Teste Presuntivo 
Tubo de Durham
Vídeo – Técnica dos tubos múltiplos
https://drive.google.com/file/d/10HbbSgv0eSXWmvRaP
oCzMb_hYZ_lYt1H/view?usp=sharing
https://drive.google.com/file/d/1rTaYPJgeu1YeuOEuvLskngEw0dPeufiH/view?usp=sharing
https://drive.google.com/file/d/10HbbSgv0eSXWmvRaPoCzMb_hYZ_lYt1H/view?usp=sharing
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Análise Bacteriológica da Água
Na aula de hoje: 
Teste presuntivo (NMP – Número Mais Provável)
Contagem de bactérias heterotróficas totais
Pesquisa de coliformes termotolerantes – E. coli (Técnica 
da membrana filtrante)
Fonte (Figura): https://svgsilh.com/image/2085195.html
36
Análise Bacteriológica da Água
Procedimento: Contagem de bactérias heterotróficas
100 µL 200 µL
TÉCNICA POUR PLATE
MEIO PCA (Plate Count Agar)1
37
Análise Bacteriológica da Água
Procedimento : Contagem de bactérias heterotróficas
Vídeo – Contagem de bactérias heterotróficas
https://drive.google.com/file/d/1U_Wkx2TIcKbmbaelNN2dMJ6niTwWguU-/view?usp=sharing
38
Análise Bacteriológica da Água
Procedimento Experimental: Técnica da Membrana Filtrante
Montagem e 
esterilização do 
aparato de 
filtração
Filtração de 100 mL
de água com 
auxílio da bomba a 
vácuo
Transferência 
asséptica da 
membrana para 
placa contendo 
meio ágar EMB
Incubação da 
placa a 37°C/24 h
Contagem de colônias 
típicas de E. coli
https://drive.google.com/file/d/1U_Wkx2TIcKbmbaelNN2dMJ6niTwWguU-/view?usp=sharing
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Análise Bacteriológica da Água
Procedimento Experimental: Técnica da Membrana Filtrante
MEIO EMB
Membrana filtrante 
Poro = 0,45 µm
Colônia típica de Escherichia coli 
(pequena escura com brilho verde 
metálico)
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Análise Bacteriológica da Água
Procedimento Experimental: Técnica da Membrana Filtrante
MEIO EMB – Eosina Azul de Metileno
Colônia típica de Escherichia coli (pequena 
escura com brilho verde metálico)
41
Análise Bacteriológica da Água
Procedimento Experimental: Técnica da Membrana Filtrante
Vídeo – Técnica da membrana filtrante
https://drive.google.com/file/d/1Yb4d0nicANu89ZFRAH2BGTj2rsY-7H4m/view?usp=sharing
Resultados Esperados
https://drive.google.com/file/d/1Yb4d0nicANu89ZFRAH2BGTj2rsY-7H4m/view?usp=sharing
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Análise Bacteriológica da Água
Resultado hipotético: 
10 mL da amostra
2
1,0 mL da amostra
2
0,1 mL da amostra
0
Qual o valor do NMP?
Teste presuntivo (NMP – Número Mais Provável)Caldo LST
45
Número de tubos apresentando
resultado positivo 
Número mais
provável
Limite de
confiança 95% 
3 tubos 
de 10 mL
3 tubos 
de 1mL
3 tubos 
de 0,1 mL
(NMP)
por 100 mL
Limite
inferior
Limite 
superior
0 0 0 < 3
0 0 1 3 < 0,5 9
0 1 0 3 < 0,5 13
1 0 0 4 < 0,5 20
1 0 1 7 1 21
1 1 0 7 1 23
1 1 1 11 3 36
1 2 0 11 3 36
2 0 0 9 1 36
2 0 1 14 3 37
2 1 0 15 3 44
2 1 1 20 7 89
2 2 0 21 4 47
2 2 1 28 10 150
3 0 0 23 4 120
3 0 1 39 7 130
3 0 2 64 15 380
3 1 0 43 7 210
3 1 1 75 14 230
3 1 2 120 30 380
3 2 0 93 15 380
3 2 1 150 30 440
3 2 2 210 35 470
3 3 0 240 36 1300
3 3 1 460 71 2400
3 3 2 1100 150 4800
Tabela de determinação
do Número Mais Provável
(NMP) por 100 mL da
amostra nos limites de
confiança de 95%,
quando são utilizados 3
tubos para cada volume
de 10, 1,0 e 0,1 mL.
46
Análise Bacteriológica da Água
Resultado hipotético: 
10 mL da amostra
2
1,0 mL da amostra
2
0,1 mL da amostra
0
Resultado = 21 NMP de 
coliformes presumíveis 
/100 mL de água
Teste presuntivo (NMP – Número Mais Provável)Caldo LST Como interpretar os resultados?
Seguir a análise (testes confirmativos):
Dependendo da amostra:
1) Determinar NMP de coliformes totais ou 
2) Determinar NMP de coliformes termotolerantes 
ou de Escherichia coli 
A amostra de água não é potável?
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Análise Bacteriológica da Água
(1) VMP = Valor máximo permitido; (2) Indicador de contaminação fecal; (3) Indicador de eficiência do tratamento e (4) Indicador de integridade do sistema de distribuição (Reservatórios 
e rede)
Portaria de Consolidação Nº 5, de 28 de setembro de 2017 – Ministério da Saúde.
Sequência da análise de água: 
49
Análise Bacteriológica da Água
Qual meio de cultivo 
deve ser utilizado?
Qual o procedimento?
Teste confirmativo – Coliformes Totais: 
10 mL da amostra
2
1,0 mL da amostra
2
0,1 mL da amostra
0
50
Análise Bacteriológica da Água
+ + - + +- ---
10 mL
Água na saída da ETA
1,0 mL 0,1 mL
1 1
0
Qual o valor do NMP?
Teste presuntivo
Teste confirmativo – Coliformes Totais: 
Caldo Lactose-Verde 
Brilhante-Bile
Inóculo somente 
dos tubos positivos 
em Caldo VBGL
51
Número de tubos apresentando
resultado positivo 
Número mais
provável
Limite de
confiança 95% 
3 tubos 
de 10 mL
3 tubos 
de 1mL
3 tubos 
de 0,1 mL
(NMP)
por 100 mL
Limite
inferior
Limite 
superior
0 0 0 < 3
0 0 1 3 < 0,5 9
0 1 0 3 < 0,5 13
1 0 0 4 < 0,5 20
1 0 1 7 1 21
1 1 0 7 1 23
1 1 1 11 3 36
1 2 0 11 3 36
2 0 0 9 1 36
2 0 1 14 3 37
2 1 0 15 3 44
2 1 1 20 7 89
2 2 0 21 4 47
2 2 1 28 10 150
3 0 0 23 4 120
3 0 1 39 7 130
3 0 2 64 15 380
3 1 0 43 7 210
3 1 1 75 14 230
3 1 2 120 30 380
3 2 0 93 15 380
3 2 1 150 30 440
3 2 2 210 35 470
3 3 0 240 36 1300
3 3 1 460 71 2400
3 3 2 1100 150 4800
Tabela de determinação
do Número Mais Provável
(NMP) por 100 mL da
amostra nos limites de
confiança de 95%,
quando são utilizados 3
tubos para cada volume
de 10, 1,0 e 0,1 mL.
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Análise Bacteriológica da Água
Resultado hipotético: 
10 mL da amostra
1
Resultado = 7 NMP de coliformes 
totais /100 mL de água
Teste confirmativo (NMP – Número Mais Provável)Caldo VGLB
1
1,0 mL da amostra 0,1 mL da amostra
0
CONCLUSÃO: 
ÁGUA NÃO PODE SER 
DISTRIBUÍDA E RETORNA 
PARA TRATAMENTO NA ETA
53
Análise Bacteriológica da Água
Termotolerantes e Escherichia coli: 
Caldo EC MUG + Tubo de Durham
Estufa a 44,5 oC – 24 h
+ + - + +- ---
10 mL 1,0 mL 0,1 mL
Teste presuntivo
Água na rede ou no ponto de consumo
Inóculo somente 
dos tubos positivos 
em Caldo EC ou 
Caldo EC MUG
Qual o valor do NMP?
54
Análise Bacteriológica da Água
Caldo EC-MUG sob luz UV (A)
Detecção de Escherichia coli
Caldo EC MUG (24 h/44,5 ºC):
Presença de Fluorescência
Detecção de Coliformes Termotolerantes
Caldo EC ou caldo EC MUG (24 h/44,5 ºC):
Produçãode gás
Termotolerantes e Escherichia coli: 
Caldo EC-MUG sob) luz natural (B)
55
Análise Bacteriológica da Água
Testes confirmativos: 
+ + - + +- ---
10 mL 1,0 mL 0,1 mL
1
0
0
Qual o valor do NMP?
Como interpretar? 
+-
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Número de tubos apresentando
resultado positivo 
Número mais
provável
Limite de
confiança 95% 
3 tubos 
de 10 mL
3 tubos 
de 1mL
3 tubos 
de 0,1 mL
(NMP)
por 100 mL
Limite
inferior
Limite 
superior
0 0 0 < 3
0 0 1 3 < 0,5 9
0 1 0 3 < 0,5 13
1 0 0 4 < 0,5 20
1 0 1 7 1 21
1 1 0 7 1 23
1 1 1 11 3 36
1 2 0 11 3 36
2 0 0 9 1 36
2 0 1 14 3 37
2 1 0 15 3 44
2 1 1 20 7 89
2 2 0 21 4 47
2 2 1 28 10 150
3 0 0 23 4 120
3 0 1 39 7 130
3 0 2 64 15 380
3 1 0 43 7 210
3 1 1 75 14 230
3 1 2 120 30 380
3 2 0 93 15 380
3 2 1 150 30 440
3 2 2 210 35 470
3 3 0 240 36 1300
3 3 1 460 71 2400
3 3 2 1100 150 4800
Tabela de determinação
do Número Mais Provável
(NMP) por 100 mL da
amostra nos limites de
confiança de 95%,
quando são utilizados 3
tubos para cada volume
de 10, 1,0 e 0,1 mL.
57
Análise Bacteriológica da Água
Coliformes termotolerantes: 
+ + - + +- ---
10 mL 1,0 mL 0,1 mL
1
0
0
+-
Resultado = 4 NMP de coliformes 
termotolerantes/100 mL de água
- -
CONCLUSÃO: 
ÁGUA IMPRÓRPIA PARA O CONSUMO HUMANO 
58
Análise Bacteriológica da Água
Escherichia coli: 
+ + - + +- ---
10 mL 1,0 mL 0,1 mL
1
0
0
+-
Resultado = 4 NMP de 
Escherichia coli/100 mL de água
CONCLUSÃO: 
ÁGUA IMPRÓRPIA PARA O CONSUMO HUMANO 
Como interpretar os resultados?
Caso na amostra não haja nenhum tubo positivo 
para gás no teste presuntivo?
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Número de tubos apresentando
resultado positivo 
Número mais
provável
Limite de
confiança 95% 
3 tubos 
de 10 mL
3 tubos 
de 1mL
3 tubos 
de 0,1 mL
(NMP)
por 100 mL
Limite
inferior
Limite 
superior
0 0 0 < 3
0 0 1 3 < 0,5 9
0 1 0 3 < 0,5 13
1 0 0 4 < 0,5 20
1 0 1 7 1 21
1 1 0 7 1 23
1 1 1 11 3 36
1 2 0 11 3 36
2 0 0 9 1 36
2 0 1 14 3 37
2 1 0 15 3 44
2 1 1 20 7 89
2 2 0 21 4 47
2 2 1 28 10 150
3 0 0 23 4 120
3 0 1 39 7 130
3 0 2 64 15 380
3 1 0 43 7 210
3 1 1 75 14 230
3 1 2 120 30 380
3 2 0 93 15 380
3 2 1 150 30 440
3 2 2 210 35 470
3 3 0 240 36 1300
3 3 1 460 71 2400
3 3 2 1100 150 4800
Tabela de determinação
do Número Mais Provável
(NMP) por 100 mL da
amostra nos limites de
confiança de 95%,
quando são utilizados 3
tubos para cada volume
de 10, 1,0 e 0,1 mL.
61
Análise Bacteriológica da Água
Interpretações possíveis: 
10 mL da amostra
0
1,0 mL da amostra
0
0,1 mL da amostra
0
Resultado: 
NMP de coliformes 
presumíveis/100 mL = < 3
ANÁLISE CONCLUSIVA –
ÁGUA POTÁVEL
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Análise Bacteriológica da Água
Tecnologia do Substrato Definido 
Fonte (Figuras ): https://www.youtube.com/watch?v=-0RDHidBHYo e https://pixabay.com/pt/vectors/v%C3%ADdeo-chamada-bate-papo-de-v%C3%ADdeo-5175965/
Sistemas alternativos de análise: 
Vídeo Extra – Substrato cromogênico e fluorogênico
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Análise Bacteriológica da Água
Para pesquisar: 
Site COPASA: 
https://www2.copasa.com.br/servicos/qualidadeagua/pesqtel.asp
https://www2.copasa.com.br/servicos/qualidadeagua/pesqtel.asp
07/07/2022
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Obrigado(a)! Resultados Experimentais
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Análise Bacteriológica da Água
Resultado experimental: 
10 mL da amostra
?
1,0 mL da amostra
?
0,1 mL da amostra
?
Qual o valor do NMP?
Teste presuntivo (NMP – Número Mais Provável)Caldo LST
Qual o número de tubos 
positivos nas séries?
Qual a interpretação?
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Número de tubos apresentando
resultado positivo 
Número mais
provável
Limite de
confiança 95% 
3 tubos 
de 10 mL
3 tubos 
de 1mL
3 tubos 
de 0,1 mL
(NMP)
por 100 mL
Limite
inferior
Limite 
superior
0 0 0 < 3
0 0 1 3 < 0,5 9
0 1 0 3 < 0,5 13
1 0 0 4 < 0,5 20
1 0 1 7 1 21
1 1 0 7 1 23
1 1 1 11 3 36
1 2 0 11 3 36
2 0 0 9 1 36
2 0 1 14 3 37
2 1 0 15 3 44
2 1 1 20 7 89
2 2 0 21 4 47
2 2 1 28 10 150
3 0 0 23 4 120
3 0 1 39 7 130
3 0 2 64 15 380
3 1 0 43 7 210
3 1 1 75 14 230
3 1 2 120 30 380
3 2 0 93 15 380
3 2 1 150 30 440
3 2 2 210 35 470
3 3 0 240 36 1300
3 3 1 460 71 2400
3 3 2 1100 150 4800
Tabela de determinação
do Número Mais Provável
(NMP) por 100 mL da
amostra nos limites de
confiança de 95%,
quando são utilizados 3
tubos para cada volume
de 10, 1,0 e 0,1 mL.
07/07/2022
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Análise Bacteriológica da Água
Contagem de bactérias heterotróficas totais:
Qual o volume da alíquota plaqueada da amostra?
Qual o Nº de colônias obtido?
Qual é a contagem ( UFC/mL) de bactérias 
heterotróficas?
Qual a interpretação?
Plate Count Agar
Sistema de distribuição
UFC/mL = Nº de colônias
volume da alíquota
Até o limite de 500 UFC/mL
Integridade da rede de distribuição preservada
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Análise Bacteriológica da Água
Colônia escura com brilho verde metálico
Qual a interpretação?
Técnica da membrana filtrante: 
Cálculo de UFC/mL
Presença de Escherichia coli – Água 
não potável (imprópria para o 
consumo humano)
Ágar Eosina Azul de 
Metileno (EMB)
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Análise Bacteriológica da Água
Ágar m-TEC modificado 
Púrpura ou Púrpura-avermelhada
Qual a interpretação?
Técnica da membrana filtrante: 
Cálculo de UFC/mL
Presença de Escherichia coli – Água 
não potável (imprópria para o 
consumo humano)