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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO Eritrócitos e eritrograma Morfologicamente os eritrócitos, na maioria dos mamíferos são bicôncavos e anucleados. Em camelídeos são elípticos, apresentando uma menor deformabilidade, são mais resistentes à lise osmótica e possuem maior afinidade com o oxigênio. Já nas aves, répteis, peixes e anfíbios os eritrócitos são elípticos e nucleados. → Constituição dos eritrócitos O citoplasma dos eritrócitos é composto principalmente de água (60 a 70%), solutos (35% sendo 95% de hemoglobina) e por eletrólitos, enzimas, proteínas, antioxidantes e outros (5%). Já a membrana plasmática é formada por lipídios (44%), como fosfolipídeos e colesterol, proteínas (48%), sendo elas integrais e estruturais, e carboidratos (8%), como glicolipídeos e glicoproteínas. As proteínas, presentes na membrana, garantem a deformabilidade, possibilitando assim que o eritrócito normal, de 7 a 8 micrômetros, consiga circular pelos capilares (de até 3 micrômetros de diâmetro). → Função dos eritrócitos Os eritrócitos são responsáveis pelo transporte pelo transporte de O2 para os tecidos (devido ao ferro presente na hemoglobina), transporte de CO2 para os pulmões e tamponamento de ions H+. O transporte depende diretamente da hemoglobina, sem gasto de hemoglobina, e indiretamente da membrana (devido à deformabilidade), sistema glicolítico e sistema antioxidante. → Hemoglobina A hemoglobina, formada por um grupo Heme (ferro) e um Globina (proteínas), está presente em 95% do citosol do eritrócito. A forma funcional (reduzida) do ferro é o ferroso (Fe++) é o responsável por fazer ligações reversíveis com o oxigênio. Já a forma oxidada é o ferro férrico (Fe+++). → Metabolismo eritrocitário O eritrócito produz energia através da glicólise anaeróbica. O ATP é necessário para manter a forma, deformabilidade, a fosforilação dos lipídeos e proteínas da membrana, manter a hemoglobina na forma ativa, transporte ativo de íons, DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO → Reticulócitos São eritrócitos jovens que ainda apresentam ribossomos e mitocôndrias, o que significa um aumento da resposta medular. No cão e gato hígido apresenta 0 a 1% de reticulócitos circulantes e nos equinos e ruminantes 0%, sendo que nos equinos não é normal encontrar. → Eritrograma Processamento e Interpretação O Eritrograma compreende: ● Número de eritrócitos ● Hemoglobina ● Hematócrito – Volume Globular (VG) ● Índices hematimétricos ○ VCM (Volume Corpuscular Médio) ○ CHCM (Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média) ○ RDW ou DDE (Distribuição do Diâmetro dos Eritrócitos) ● Avaliação morfológica → Contagem de eritrócitos A contagem manual é feita com auxílio do Hemocitômetro e microscópio. Para isso é necessário a preparação de solução isotônica (1:200). Já a contagem automática é feita a partir de uma máquina de hemograma, tendo uma maior precisão dos resultados, além de ser mais rápido. → Concentração de hemoglobina Método bioquímico ● O método mais usado para determinar a concentração de hemoglobina é o cianometahemoglobina, onde a margem de erro está próxima dos 5%. Para que esta técnica seja realizada, é necessário um fotocolorímetro ou espectrofotômetro. Aparelhos automáticos medem diretamente a densidade ótica da oxi-hemoglobina, sendo bastante utilizados. Outro método existente é o da hematina ácida, bastante simples e barato, porém a margem de erro está dentro dos 12%. Para a sua realização utiliza-se o hemoglobinômetro de Sahli. A hemoglobina corresponde, em média a 1/3 do hematócrito ● Deve-se evitar hemólise e lipemia → Volume Globular (VG) ou Hematocrito O hematócrito é a percentagem de eritrócitos no sangue. Os métodos de centrifugação dão um volume de células sedimentadas, que corresponde a uma mensuração mais exata. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO É um dos exames mais úteis no estudo da série vermelha e com ele podemos obter inúmeras informações como: a coloração do plasma, a capa leucocitária e microfilárias. O plasma obtido por este método pode ser empregado em outros exames, como concentração de proteínas plasmáticas totais e concentração de fibrinogênio plasmático, utilizando-se a precipitação pelo calor e refratometria. O Volume Globular também pode ser obtido através de → Anemia e Policitemia São determinadas a partir do valor do hematócrito (VG), eritrócitos (RBC) ou hemoglobina (HB). Se os exames estiverem abaixo dos valores de referências o animal está com anemia, caso os valores estão acima o animal desenvolveu uma policitemia. → Índices Hematimétricos ● Volume Corpuscular Médio (VCM) Indica o tamanho médio dos eritrócitos, pode ser determinado pela conta a seguir: A classificação é feita a partir dos valores de referências e são classificadas como: ● normocítica (VCM normal) → a medula não está respondendo ● macrocítica (VCM acima do normal) → medula ta respondendo ● microcítica (VCM abaixo do normal) → os eritrócitos sofrem mais mitose devido a falta de ferro (anemia ferropriva) ● Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média (CHCM) É o teor de hemoglobina dentro dos eritrócitos, pode ser determinado pela conta a seguir: A classificação é feita a partir dos valores de referência e são classificados como: Normocrômica (CHCM normal), Hipocrômica (CHCM abaixo do normal) Hipercrômica (não apresenta hipercromia verdadeira). ● RDW ou DDE Red Cell Distribution Width ou Distribuição do Diâmetro dos Eritrócitos. É a medida eletrônica do grau de anisocitose ou heterogeneidade do volume eritrocitário (hemácias com tamanhos diferentes) É a diferença de tamanho, indicando a presença de macrócitos e/ou micrócitos, avaliado também a partir de valores de referência para cada espécie ● anisocitose → diferença de tamanho ● maior → macrócito ● menor → microcitose →Avaliações adicionais do eritrograma Avaliações do plasma →Pode estar com coloração e aspectos alterados além do normal, como hemolisadas, lipemicas ou ictérico. →Contagem de Proteína Plasmática Total – DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO PPT e Fibrinogênio, com auxílio de um refratômetro. Proteína Plasmática Total – PPT apresenta o grau de hidratação e metabolismo protéico, podendo estar diminuído de acordo com a desnutrição, proteinúria, enteropatia com perda proteica, perda de linfa, perda crônica ou grave de sangue, redução da síntese hepática. E aumentado em casos de hemoconcentração ou processo inflamatório /Infeccioso (globulinas). O Fibrinogênio pode estar aumentado em casos de processos inflamatórios. É utilizado um capilar centrifugado que fica em banho-maria por três minutos, após é centrifugado novamente e feito a leitura no refratômetro. Deve ter a contagem de proteínas totais para descontar do fibrinogênio. ● Contagem de reticulócitos Utilizado apenas em animais anêmicos, buscando avaliar a resposta medular a anemia. Somente feito para cães, gatos e ruminantespois os equinos não apresentam reticulócitos circulantes. É utilizado o corante supravital, que pode ser Novo Azul de Metileno, Azul de Cresil Brilhante. É contado a porcentagem de reticulócitos na lâmina sendo → % de reticulócitos em 1000 ou 500 hemácias (pela forma n. de reticulócitos/L =% de reticulócitos X n. de eritrócitos). ● Correção da contagem de reticulócitos → Avaliação morfológica dos eritrócitos Feito a partir do esfregaço sanguíneo. Serve para conferir a contagem de eritrócitos, morfologia das hemácias, resposta medular e presença de hemoparasitas. ● Macrócitos: eritrócitos maiores que o normal ● Micrócitos: eritrócitos menores que o normal ● Hipocromia: eritrócito pouco corado, nota-se a presença de um grande alô. ● Policromasia ou policromatofilia: eritrócitos jovens liberados prematuramente, apresentando coloração azulada e de maior tamanho se comparado a células maduras. ● Hipercromia (esferócitos): aparentam ter coloração mais intensa devido à ausência da concavidade DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO Podem ocorrer juntas: ● Microcitose e Hipocromia (clássico de anemia ferropriva, podendo ocorrer aumento de plaquetas) ● Macrocitose e policromasia DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO
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