CITOPATOLOGIA E CITOLOGIA CLINICA Roteiros

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Roteiros 
Citopatologia e Citologia Clínica
Manual de Estágio
REGRAS BÁSICAS DE SEGURANÇA NO LABORATÓRIO
1. Durante a aula prática, mantenha sempre atenção ao roteiro, tendo-o sempre próx-
imo a você. Pode ser efetuada marcação com caneta sob cada item realizado do experi-
mento, de forma a não se perder durante a execução.
2. Leia sempre o roteiro antes de iniciar a prática e mesmo antes das explicações do 
professor.
3. Observe a localização do material e equipamentos de emergência (chuveiro, lava 
olhos etc.). 
4. Não abra qualquer recipiente antes de reconhecer seu conteúdo pelo rótulo. 
5. Não pipete líquidos diretamente com a boca; use pipetas adequadas. 
6. Não tente identificar um produto químico pelo odor e nem pelo sabor. 
7. Não deixe de utilizar os equipamentos de proteção. 
8. Não adicione água aos ácidos, mas sim os ácidos à água. 
9. Não trabalhe de sandálias, chinelos ou sapatos abertos e de salto no laboratório. 
10. Sempre identifique o conteúdo presente nos frascos ou tubos utilizados no experi-
mento com caneta para vidros. Isto facilita seu descarte adequado por parte dos re-
sponsáveis pelo laboratório. 
11. Mantenha os solventes em recipientes adequados e devidamente tampados, bem 
como materiais inflamáveis longe de fontes de calor (bico de bunsen). 
12. Utilize a capela sempre que manipular reagentes ou solventes que liberem vapores. 
13. Conheça as propriedades tóxicas das substâncias químicas antes de empregá-las 
pela primeira vez no laboratório. Caso tenha dúvidas, consulte o professor ou o técnico 
a respeito.
14. Se tiver cabelos longos, leve-os presos ao realizar qualquer experiência no labo-
ratório, não se alimente e nem ingira líquidos nos laboratórios.
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Coloração de 
Papanicolaou
AULA 1
ROTEIRO 1
OBJETIVO: Apresentar ao aluno o protocolo para coloração e amostras citológicas pelo 
método de Papanicolaou.
PROCEDIMENTO
1. Colher amostras citológicas da cavidade oral, raspando a mucosa com uma haste de 
madeira.
2. Transferir as células para lâmina de vidro identificada (esfregaço).
3. Fixar as amostras em Etanol 95% por 15 minutos.
4. Hidratar as lâminas em água destilada por 15 minutos.
5. Lavar em água destilada.
6. Hematoxilina de Harris por 6 minutos.
7. Lavagem em água destilada.
8. Desidratar em Etanol Absoluto (três mudanças).
9. Orange G por 90 segundos.
10. Lavar em três mudanças de Etanol 95%.
11. EA 36 por 90 segundos.
12. Lavagem em três mudanças de Etanol Absoluto.
13. Clarificação em Xilol por 10 minutos (em capela).
14. Montar as lâminas com Bálsamo do Canadá e lamínula (em capela).
Manual de Estágio
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas de vidro para microscopia com ponta fosca 10
Lamínulas 24 x 50 mm 10
Espátulas de madeira 10
Cubas de vidro 15
Cronômetro 1
Bastão de vidro 1
Etanol 95% qsp 4 cubas
Etanol Absoluto qsp 6 cubas
Hematoxilina de Harris (kit Papanicolaou – Qeel) qsp 1 cuba
Orange G (kit Papanicolaou – Qeel) qsp 1 cuba
EA 36 (kit Papanicolaou – Qeel) qsp 1 cuba
Xilol qsp 1 cuba
Bálsamo do Canadá 10 mL
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Colpocitologia Normal 
AULA 1
ROTEIRO 2
OBJETIVO: Apresentar ao aluno a morfologia normal das células do epitélio pavimentoso 
estratificado, do epitélio colunar simples e do epitélio metaplásico.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado 1 por grupo 
Lâminas normais do epitélio colunar simples 1 por grupo
Lâminas do epitélio metaplásico 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar, ao microscópio óptico, amostras de colpocitologia já colhidas e coradas pelo 
método de Papanicolaou.
Identificar as células de cada uma das camadas do epitélio pavimentoso estratificado 
(escamoso), que reveste a cavidade vaginal e região ectocervical do colo uterino: basais, 
parabasais, intermediárias e superficiais. Observar as diferenças de morfologia entre as 
células das diferentes camadas do epitélio escamoso: tamanho e forma do citoplasma, 
relação núcleo/citoplasma, características tintoriais do citoplasma etc.
Observar a morfologia das células do epitélio cilíndrico simples (glandular), que reveste 
a região endocervical do colo uterino (canal endocervical). Observar o arranjo típico dos 
grupamentos celulares das células desse epitélio: favo de mel e paliçada.
Manual de Estágio
Observar a morfologia das células do epitélio metaplásico (epitélio de transição, 
frequentemente presente em mulheres durante a idade fértil), promovendo uma comparação 
entre células metaplásicas e células parabasais do epitélio escamoso.
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
Individualmente ou em grupos, identificar os epitélios representados em uma dada 
amostra de colpocitologia, preenchendo laudo conforme modelo a seguir:
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Citologia Hormonal
AULA 1
ROTEIRO 3
OBJETIVO: Apresentar ao aluno as alterações morfológicas das células do epitélio 
pavimentoso estratificado vaginal frente às oscilações hormonais do ciclo menstrual.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado vaginal 1 por grupo 
Lâminas de citologia vaginal (7º dia do ciclo menstrual) 1 por grupo
Lâminas de citologia vaginal (14º dia do ciclo menstrual) 1 por grupo
Lâminas de citologia vaginal (21º dia do ciclo menstrual) 1 por grupo
Lâminas de citologia vaginal (28º dia do ciclo menstrual) 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de citologia vaginal colhidas em diferentes 
momentos do ciclo menstrual (7º dia, 14º dia, 21º dia e 28º dia). 
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de amostras de mulheres gestantes, 
lactantes e menopausadas coradas pelo método de Papanicolaou, promovendo 
discussão acerca dos índices de maturação, cariopicnose, eosinofilia, dobramento 
citoplasmático e agrupamento celular.
Identificar elementos da microbiota vaginal normal: Lactobacillus sp, cocos e outros 
bacilos, discutindo o processo de citólise bacteriana observado em amostras de mulheres 
com alta concentração plasmática de progesterona.
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Alterações benignas
AULA 2
ROTEIRO 1
OBJETIVO: Apresentar ao aluno as alterações morfológicas das células do epitélio 
pavimentoso estratificado frente a processos benignos (inflamação, radiação, reparo 
tecidual).
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado 1 por grupo 
Lâminas de inflamação 1 por grupo
Lâminas de cicatrização (reparo) 1 por grupo
Lâminas de epitélio escamoso 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar, ao microscópio óptico, amostras de colpocitologia que contenham células 
escamosas morfologicamente alteradas por processo inflamatório: vacuolização, 
metacromasia, pseudoeosinofilia, disqueratose, halo perinuclear, hipercromasia, 
hipocromasia, cariomegalia, cariopicnose, anisonucleose, irregularidades de membrana 
nuclear, cariorrex, cariólise.
Serviço Social
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
Individualmente ou em grupos, determinar se há presença de alterações benignas em 
uma dada amostra de colpocitologia, preenchendo laudo conforme modelo:
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Infecções genitais
AULA 2
ROTEIRO 2
OBJETIVO: Apresentar ao aluno as possíveis infecções genitais vaginais por 
microrganismos não carcinogênicos identificáveis em exames de colpocitologia através 
da morfologia dos microrganismos ou de seu efeito citopático nas células do epitélio 
pavimentoso estratificado.MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas de esfregaço vaginal com Cândida albicans 1 por grupo 
Lâminas de esfregaço vaginal com Trichomonas vaginalis 1 por grupo
Lâminas de esfregaço vaginal com Chlamydia sp 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de colpocitologia, promovendo a identificação 
morfológica de microrganismos patogênicos que podem estar presentes em amostras de 
colpocitologia: Candida sp, Trichomonas vaginalis Chlamydia sp. 
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de bacilos supracitoplasmáticos 
(sugestivos de Gardnerella/Mobiluncus), Actinomyces sp e vírus do grupo Herpes. 
Serviço Social
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
Individualmente ou em grupos, identificar os microrganismos presentes em uma dada 
amostra de colpocitologia, preenchendo laudo conforme modelo:
 
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Lesões HPV-induzidas
AULA 2
ROTEIRO 3
OBJETIVO: Apresentar ao aluno as atipias presentes em células do epitélio pavimentoso 
estratificado (escamoso) infectadas pelo Papilomavírus Humano (HPV).
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado (escamoso) 1 por grupo 
Lâminas de epitélio pavimentoso estratificado (escamoso) com efeito 
de infecção por HPV/Lâminas de HPV
1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar, ao microscópio óptico, amostras de colpocitologia visando a identificação 
de alterações morfológicas sugestivas da presença do HPV: cariomegalia, hipercromasia 
nuclear, cromatina granulosa, irregularidades de membrana nuclear, bi ou multinucleação, 
coilocitose.
Serviço Social
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de lesão intraepitelial de baixo grau e 
lesão intraepitelial de alto grau. 
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Carcinoma Epidermoide
AULA 3
ROTEIRO 1
OBJETIVO: Apresentar ao aluno as atipias presentes em células do epitélio pavimentoso 
estratificado (escamoso) infectadas pelo Papilomavírus Humano (HPV) com características 
malignas.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado (escamoso) 1 por grupo 
Lâminas de epitélio pavimentoso estratificado (escamoso) com efeito 
de infecção por HPV (CARACTERÍSTICAS DE MALIGNIDADE)
1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de colpocitologia visando a identificação de 
alterações morfológicas em células escamosas que sugerem malignidade: cariomegalia, 
hipercromasia nuclear, cromatina granulosa, irregularidades de membrana nuclear, 
presença de macronucléolo, bi ou multinucleação, clarificação cromatínica, morfotipo 
migratório, diátese tumoral.
Serviço Social
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
Individualmente ou em grupos, determinar a presença de atipias em células escamosas 
em uma dada amostra de colpocitologia, preenchendo laudo conforme modelo: 
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Nomenclatura Brasileira 
para laudos citopatológicos cervicais
AULA 3
ROTEIRO 2
OBJETIVO: Apresentar ao aluno o laudo padrão elaborado pelo Ministério da Saúde, 
baseado na Nomenclatura Brasileira para laudos citopatológicos cervicais.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio pavimentoso estratificado 
(escamoso)
1 por grupo 
Lâminas de colpocitologia normais 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de colpocitologia visando a identificação de 
alterações morfológicas sugestivas da presença do HPV.
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
Individualmente ou em grupos, determinar a presença de atipias em uma dada amostra 
de colpocitologia, preenchendo laudo padrão do Ministério da Saúde.
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de lâminas de esfregaço cervico-
vaginal normais e com diferentes graus de atipias/alterações para que o aluno possa 
preencher laudos diversos. 
Serviço Social
Imprimir e xerocar várias cópias dos laudos para distribuição aos discentes. 
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Citologia da Mama
AULA 3
ROTEIRO 3
OBJETIVO: Apresentar ao aluno a morfologia normal das células do epitélio da mama e 
as possíveis atipias que indicam processo neoplásico.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio de mama 1 por grupo 
Lâminas de neoplasia de mama 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de citologia da mama colhidas por punção 
aspirativa, visando identificar células epiteliais/luminais, células mioepiteliais e células 
apócrinas.
Procurar por alterações morfológicas que sugerem malignidade: tamanho e forma do 
núcleo, anisonucleose, hipercromasia, presença de nucléolo proeminente. 
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de neoplasia de mama, diversas, em 
diferentes graus e características.
Serviço Social
Os alunos, em grupos, devem determinar a presença de atipias em células epiteliais em 
uma dada amostra de punção aspirativa da mama, preenchendo laudo conforme modelo 
a seguir:
 � Negativo para células malignas (células normais/alterações benignas).
 � Atípico (características comuns entre entidades benignas e malignas).
 � Suspeito (células atípicas que não permitem diagnóstico).
 � Positivo para células malignas (características inequívocas de malignidade).
 � Inadequado ou insatisfatório.
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Citologia Pulmonar
AULA 4
ROTEIRO 1
OBJETIVO: Apresentar ao aluno a morfologia normal das células do epitélio respiratório 
e as possíveis atipias que indicam processo neoplásico.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de epitélio respiratório 1 por grupo 
Lâminas de neoplasia de pulmão 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar ao microscópio óptico amostras de citologia pulmonar, visando identificar 
células ciliadas, células caliciformes e macrófagos alveolares.
Procurar por alterações morfológicas que sugerem malignidade: tamanho e forma do 
núcleo, anisonucleose, hipercromasia, presença de nucléolo proeminente. 
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de neoplasia de pulmão, diversas em 
diferentes graus e características. 
Serviço Social
Os alunos devem determinar, individualmente ou em grupos, a presença de atipias 
em células epiteliais em uma dada amostra de citologia pulmonar, preenchendo laudo 
conforme modelo:
 � Negativo para células malignas (células normais/alterações benignas).
 � Suspeito (alterações morfológicas não conclusivas de malignidade).
 � Positivo para células malignas (alterações com critério de malignidade).
 � Inadequado ou insatisfatório.
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Citopatologia/Citologia 
Oncótica
Título da Aula: Citologia Oncótica da 
Urina
AULA 4
ROTEIRO 2
OBJETIVO: Apresentar ao aluno a morfologia normal das células do trato urinário e as 
possíveis atipias que indicam processo neoplásico.
MATERIAIS QUANTIDADE
Lâminas normais de bexiga 1 por grupo 
Lâminas de neoplasia de bexiga 1 por grupo
Microscópios ópticos binoculares 1 por grupo
PROCEDIMENTO
Observar, ao microscópio óptico, lâminas normais do epitélio de bexiga e comparar com 
lâminas de neoplasia de bexiga, observando as alterações típicas do processo. 
ATIVIDADE PRÁTICA (exercício)
SUGESTÃO AO DOCENTE: PROJETAR IMAGENS de atipias em citologia urinária e os 
alunos, em grupos, preencher laudo conforme modelo:
 � Negativo para células malignas (células normais/alterações benignas).
 � Suspeito (alteraçõesmorfológicas não conclusivas de malignidade).
 � Positivo para células malignas (alterações com critério de malignidade).
 � Inadequado ou insatisfatório.