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Centro Universitário de Lavras Faculdade de Farmácia Disciplina de Microbiologia Geral 2022/2 Profª. Adrielle Pieve de Castro Mª. Ciências Farmacêuticas – UFSJ adriellepieve@unilavras.edu.br Genética bacteriana Recapitulando... Segmentos de DNA que codificam produtos funcionais Estruturas contendo DNA que transportam fisicamente a informação Genes • Ácido desoxirribonucleico (DNA): código genético da célula, • Ácido ribonucleico (RNA): converte esse código em sequências definidas de aminoácidos em proteínas. Recapitulando... Recapitulando... Informações essenciais para manutenção celular Informações “extras” DNA dupla fita, circular Plasmídeos, integrons, transposons Recapitulando... DNA da E. coli tem cerca de 4.6 milhões de pares de bases e possui cerca de 1mm de comprimento – mil vezes maior do que o tamanho da célula!! O cromossomo ocupa 10% do volume celular – DNA superenovelado Enovelamento DNA • Molécula de DNA dupla fita circular (maioria) • Disperso no citoplasma (nucleiode) • 1 cromossomo (maioria) • Haploides – um único conjunto de genes (reprodução assexuada) • Todas as informações essenciais para a sobrevivência da célula • Praticamente todo o DNA tem função codificante ou regulatória (85% regiões codificadoras/ humanos= 2%; 1% genes codificadores de rRNA e tRNA; ~ 15% regiões regulatórias (promotor, operador). • Genes organizados na forma de operons (genes ligados) Cromossomo bacteriano Cromossomo bacteriano- operons Promotores são sequências de nucleotídeos que controlam a expressão (taxa de transcrição) de um conjunto de gene. Operadores são sequências de nucleotídeos que sinalizam para parar ou prosseguir a transcrição Operons= conjunto genes regulados por uma única região reguladora Informação genética DNA RNA proteína Dogma central da Biologia molecular Replicação DNA • Pareamento de bases entre a dupla fita • A replicação é realizada pela enzima DNA-polimerase DNA = dupla fita (cada cromossomo = duas fitas de DNA) Genes e fluxo da Informação genética Como a informação do DNA é utilizada para produzir as proteínas que controlam as atividades celulares? DNA RNA proteína Genes e fluxo da Informação genética • Quando os genes são expressos, a informação genética armazenada no DNA é transferida ao ácido ribonucleico (RNA). • Enquanto várias classes de RNA existem nas células, três tipos principais atuam na síntese de proteínas: ➢ RNA mensageiro (RNAm) é uma molécula de fita simples que carrega a informação genética do DNA ao ribossomo, a máquina de síntese proteica. ➢ RNAs transportadores (RNAts) convertem a informação genética nas sequências nucleotídicas do RNA em uma sequência definida de aminoácidos em proteínas. ➢ Os RNAs ribossomais (RNArs) são importantes componentes catalíticos e estruturais dos ribossomos. Fluxo da informação genética • Transcrição. A transferência da informação genética do DNA para o RNA é denominada transcrição. A transcrição é realizada por uma enzima denominada RNA-polimerase; • Tradução. A síntese de uma proteína, utilizando a informação genética contida no RNAm, é denominada tradução DNA RNA proteína Fluxo da informação genética Replicação e Transcrição Fluxo da informação genética- TRANSCRIÇÃO Transferência da informação genética Fluxo da informação genética- TRADUÇÃO Síntese de proteína • Decodificação da “linguagem” de ácido nucléico e conversão para a “linguagem” das proteínas • O RNAm está organizado na forma de códons: - Grupos de 3 nucleotídeos - A sequência de códons de uma molécula de mRNA determina a sequência de aminoácidos que estarão na proteína sintetizada • Cada códon codifica um aminoácido específico • O código genético é degenerado Fluxo da informação genética- TRADUÇÃO Síntese de proteína RNA mensageiro (RNAm) carrega a informação genética do DNA ao ribossomo RNAs transportadores (RNAts) convertem a informação genética nas sequências nucleotídicas do RNA em uma sequência definida de aminoácidos em proteínas. Fluxo da informação genética- TRADUÇÃO Síntese de proteína Fluxo da informação genética- TRADUÇÃO Síntese de proteína Fluxo da informação genética- TRADUÇÃO Síntese de proteína Fluxo da informação genética Eucariotos= cada gene é transcrito, originando um único RNAm Procariotos = uma única molécula de RNAm pode carrear a informação genética de vários genes DNA extracromossomal - Plasmídeos • Moléculas de DNA dupla fita extracromossomal • Replicam independentemente do cromossomo • Circulares • Menores que os cromossomos • Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas • Carregam informação genética não essencial a célula, mas podem conferir uma vantagem adaptativa. • Mais de 300 plasmídeos diferentes, de ocorrência natural, foram isolados de linhagens de Escherichia coli DNA extracromossomal - Plasmídeos • Carreiam genes que exercem profunda influência no fenótipo da célula • Plasmídeo de resistência (R) – ameaça a terapia antimicrobiana R100: codifica genes que conferem resistência a sulfonamidas, estreptomicina, espectinomicina, ácido fusídico, cloranfenicol e tetraciclina DNA extracromossomal - Plasmídeos • Carreiam genes que exercem profunda influência no fenótipo da célula • Plasmídeo de resistência (R) – ameaça a terapia antimicrobiana R100: codifica genes que conferem resistência a sulfonamidas, estreptomicina, espectinomicina, ácido fusídico, cloranfenicol e tetraciclina DNA móveis: elementos transponíveis • Segmentos distintos de DNA capazes de deslocarem-se de um sítio para outro (transposição) • Encontrados inseridos em uma molécula de DNA (plasmídeo, cromossomo ou genoma viral) • São replicados quando a molécula de DNA do hospedeiro é replicada • Plasticidade do genoma • Podem afetar a expressão de outros genes • Ex: sequências de inserção (IS), transposons e integrons DNA móveis: elementos transponíveis Transposons DNA móveis: elementos transponíveis Transposons DNA móveis: elementos transponíveis Transposons DNA móveis: elementos transponíveis Integrons • São sistemas que conseguem capturar e expressar elementos genéticos chamados cassetes gênicos. • Os cassetes geralmente estão associados com resistência a antimicrobianos. Estrutura: Gene codificador de integrasse (intI). Sítio de recombinação (attI). Promotor constitutive (Pc). Para o cassete gênico ser integrado tem que possuir attC. Variabilidade genética Variabilidade genética Genoma cerne versus pangenoma • O genoma cerne é aquele compartilhado por todas as amostras de uma determinada espécie, • Pangenoma: genoma cerne + sequências extras presentes em uma ou mais amostras, mas não em todas as amostras da mesma espécie (amostras particulares dentro de cada espécie) Variabilidade genética Genoma cerne versus pangenoma Variabilidade genética Variabilidade genética • Alteração herdável • Pode modificar o produto (proteína) codificado pelo gene. • As mutações podem ser: • Desvantajosas – célula perde uma característica fenotípica que ela necessita • Benéficas – célula ganha uma atividade nova ou intensificada que a beneficia • Neutras ou silenciosoas – código genético degenerado Mutação Genótipo x Fenótipo Recombinação genética • Espontânea – Ocorre naturalmente sem a adição de um agente mutagênico específico, geralmente decorrente de erros cometidos pela DNA polimerase • Induzida – Resultado da exposição do microrganismo a um agente mutagênico que é capaz de introduzir danos ou alterações no DNA. *físico – raios X, radiações UV *químico – óxido nitroso Tipos de mutação Recombinação genética Tipos de mutação Induzida: Recombinação genética Tipos de mutação Recombinação genética Transformação • Algumas bactérias são naturalmente transformáveis (competentes). • Célula competente – célula receptora em um estado fisiológico capaz de captar o DNA doador. • Competência – alterações na parede celular,tornando-a permeável a moléculas de DNA. • E. coli – não é naturalmente competente. Tratamento para induzir competência – engenharia genética Recombinação genética Transformação Descoberta da transformação em Streptococcus pneumoniae por Griffith Recombinação genética Conjugação • Transferência genética envolvendo contato célula- célula • Não envolve transferência recíproca de material genético, é unidirecional. • Depende de um fator de fertilidade (fator F). • Presente em células doadoras (F+) e ausente em células receptoras (F-). Recombinação genética Conjugação • Transferência genética envolvendo contato célula- célula • Não envolve transferência recíproca de material genético, é unidirecional. • Depende de um fator de fertilidade (fator F). • Presente em células doadoras (F+) e ausente em células receptoras (F-). Recombinação genética Conjugação • Transferência genética envolvendo contato célula- célula • Não envolve transferência recíproca de material genético, é unidirecional. • Depende de um fator de fertilidade (fator F). • Presente em células doadoras (F+) e ausente em células receptoras (F-). • Fator F: Plasmídeos conjugativos, genes para conjugação, pili sexual. Recombinação genética Conjugação Recombinação genética Transdução Processo de transferência de material genético através de bacteriófagos Recombinação genética Qual tipo de recombinação genética representa essa charge? Conjugação bacteriana
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