Instrumentação Biomédica - Juliana Gonçales - 2Webconferência.pdf

Prévia do material em texto

WEBAULA 02
Profa. Dra. Juliana Prado Gonçales
Solução
Cálculos
Cálculos
Cálculos
Diluição seriada
Diluição seriada
Sangue
Fezes
Soro
Sêmen
LCR
Tecidos
Urina 
Plasma
Amostras
Variação 
cronobiológica
Atividades físicas
Sexo
Dieta
Jejum
Uso de fármacos e 
drogas
Posição 
Idade
Interferentes
Citrato tamponado
Utilizado em provas de 
coagulação
Fonte: Bd.com
Ativador de Coágulo sem 
e com gel
Utilizado para determinação 
em soro – bioquímica e 
sorologia
Fonte: Bd.com
Fonte: Bd.com
Tubos de coleta
Heparina
Uso de plasma para a 
determinações bioquímicas 
Fonte: Bd.com
EDTA
Hematologia – Análise 
morfológica
Fonte: Bd.com
Fonte: Bd.com
Fluoreto de Sódio + EDTA
Dosagem de glicose, lactato 
e hemoglobina glicada no 
plasma
Tubos de coleta
Tubos de coleta
Hemólise
Torniquete
Lipemia
Heparina 
Coágulo
Interferentes - coleta
Pré-analítico
Analítico
Pós-analítico
Fases das análises clínicas 
Punção capilar
Punção venosa
Punção arterial
Coleta de sangue
Solicitação/requisição do 
exame
Preparação e identificação 
do paciente
Orientação
Sequência correta dos 
tubos de coleta
Identificação dos tubos
Acondicionamento e 
transporte
Pré-analítica
Falha na 
calibração
Manutenção de 
equipamentos
Água reagente fora das 
especificações
Variação de 
energia elétrica 
Interferentes
Insumos mal 
acondicionados
Temperatura 
ambiente
Erros na diluição 
da amostra
Analítica
Falhas na 
impressão 
Laudos 
incompletos
Unidades 
erradas
Resultados 
ilegíveis
Interpretação equivocada 
dos resultados
Erros no valores 
de referência
Transcrição 
inadequada
Pós-analítica
Métodos qualitativos
Métodos quantitativos
Métodos in house
Validação dos métodos
Validação dos métodos
Parâmetros
Especificidade Sensibilidade
Exatidão
Robustez
Precisão
Limite de detecção 
Validação dos métodos
❑ É a capacidade de um procedimento analítico gerar um sinal para a
mudança de quantidade e ângulo de inclinação na curva de calibração;
❑ Limite detecção → é a menor concentração que um teste pode detectar;
❑ sensibilidade e limite de detecção;
❑ Exatidão → resultado próximo do valor verdadeiro
Sensibilidade
Validação dos métodos
❑ Resistência a variações:
o Condições ambientais;
o Fator humano;
o Variações de lote e reagente;
o Materiais utilizados.
Robustez
Validação dos métodos
❑ Avaliação próxima dos resultados;
❑ Repetibilidade → concordância entre as dosagens em um curto espaço
de tempo;
❑ Reprodutibilidade → concordância entre os resultados dosados em
locais diferente;
❑ São dosadas três amostras de um mesmo analito com uma
concentração baixa conhecida, uma média e uma alta → dosagem em
triplicata;
Precisão
Validação dos métodos
Validação dos métodos
Validação dos métodos
Validação dos métodos
Validação dos métodos
❑ Erro aleatório:
➢ Não pode ser identificado e não pode ser corrigido;
➢ Pode ocorrer durante a manipulação da amostra;
➢ É calculado pelo coeficiente de variação;
➢ % do coef. variação → reprodutibilidade;
Erros
Validação dos métodos
❑ Erro sistemático:
➢ Ocorre de maneira regular e constante;
➢ Promove perda de exatidão;
➢ Sistemático + aleatório = Erro total;
Erros
Validação dos métodos
Quimioluminescência
Imunoturbidimetria Nefelometria 
Turbidimetria
Citometria de fluxo
Metodologias
Nefelometria
✓Diminuição da intensidade devido a difracção da luz
✓ Luz difundida é medida
✓Mede precipitado
Metodologias
Turbidimetria
✓ Técnica baseada na espectrofotometria;
✓ Mede a turbidez da amostra – redução de luz;
✓ Turbidez → concentração; 
✓ Luz não dispersada (a luz que passa).
Metodologias
Nefelometria Turbidimetria
Metodologias
Nefelometria Turbidimetria
Metodologias
Quimioluminescência
Metodologias
Quimioluminescência
✓ Enzimático → luminescente → 10x mais sensível 
✓ Capta a luz emitida por excitação basal
✓Derivados de luminol;
✓ Ésteres de acridina;
✓ Substrato promove hidrolise, promovendo a emissão de luz;
Metodologias
Citometria de fluxo
Metodologias
Citometria de fluxo
✓ Fenotipagem dos leucócitos
✓ Fenotipagem de células tumorais – oncohemato
✓ Status imunológico – HIV+
✓Metodologia cara
✓Mão de obra qualificada
Metodologias
Metodologias
Citometria de fluxo
Metodologias
Citometria de fluxo
Metodologias
Citometria de fluxo
Microbiologia
Metodologias
Microbiologia
Metodologias
OBRIGADA
“A persistência é o caminho para o êxito ”
Charles Chaplin