Relatório Biologia Celular 5 - Dna da banana

Prévia do material em texto

INSTITUTO LATINO-AMERICANO DE ARTE, CIÊNCIAS DA VIDA E DA NATUREZA (ILACVN)
BIOTECNOLOGIA
BIOLOGIA CELULAR EXPERIMENTAL 
RELATÓRIO DE PRÁTICA 9 
“Extração de DNA de morangos e bananas”
FELIPE AUGUSTO SIQUEIRA GOMES
Foz do Iguaçu
2021
SUMÁRIO
1. INTRODUÇÃO.......................................................................................................... 3
2. OBJETIVOS............................................................................................................... 3
3. MATERIAIS E PROCEDIMENTOS....................................................................... 3
3.1 MATERIAIS.............................................................................................................. 3
3.2 PROCEDIMENTOS................................................................................................... 4
4. RESULTADOS........................................................................................................... 4
5. DISCUSSÕES E QUESTÕES................................................................................... 5
5.1 DISCUSSÕES............................................................................................................ 5
5.2 QUESTÕES................................................................................................................ 5
6. CONCLUSÕES........................................................................................................... 5
7. ANEXOS...................................................................................................................... 6
8. REFERÊNCIAS.......................................................................................................... 9
1. INTRODUÇÃO
A informação genética responsável por formar todos os seres vivos fica armazenada na forma de DNA e RNA no interior de suas células e no processo de divisão celular, toda essa informação será continuamente passada de células-mães para células-filhas, constituindo assim quase todos os organismos vivos. Essas duas moléculas são polímeros em cadeia, formados por nucleotídeos em sequência que formam os genes, e através deles essa informação pode ser transcrita e traduzida na forma de proteínas, que são responsáveis por sintetizar inúmeros processos químicos das células.
A extração de DNA possui papel fundamental nos estudos da Biologia Celular. Através desse processo é possível realizar a técnica de PCR, por exemplo, que amplifica uma região específica do DNA, sendo possível a identificação do organismo dono de tal DNA. Num processo mais simples, o material genético a ser extraído passa primeiro pela Lise, onde devem ser rompidas as membranas das células e a Purificação, onde o DNA é separado dos outros componentes da célula. Em cada técnica de extração, esses processos podem variar principalmente de acordo com a amostra ser processada.
2. OBJETIVOS
· Discussão de conceitos relacionados à estrutura das células e as propriedades das moléculas de DNA.
· Discutir as etapas do processo de extração de DNA.
3. MATERIAIS E PROCEDIMENTOS
3.1 MATERIAIS
· Meia Banana;
· Sacos Plásticos;
· 1 Béquer de 500mL;
· 2 Béqueres de 200mL;
· 1 Proveta de 150mL;
· 2 Tubos de ensaio grandes;
· 1 Bastão de vidro;
· 1 Peneira/Coador/Papel filtro;
· 1 Colher de sopa;
· 1 Colher de chá;
· Sal de Cozinha (NaCL);
· Detergente comum;
· Álcool comercial gelado (98%);
· 300mL de Água quente (65%).
3.2 PROCEDIMENTOS
A. Preparo da solução de extração: 
Em um béquer com 150mL de água quente (65°C) foi colocada uma colher (sopa) de detergente e uma colher (chá) de sal de cozinha. A solução extração foi misturado levemente com o bastão de vídeo, afim de não se formar espuma. 
B. Extração do DNA:
A banana foi colocada no saco plástico e macerada até formar uma pasta homogênea, e transferida para um béquer limpo, nessa pasta foram adicionadas 50mL da solução extração. A mistura foi mexida suavemente com o bastão de vidro para ficar homogênea e para evitar a espuma. A mistura ficou descansando por 20-30 minutos em banho maria (65 C).
Em seguida a mistura foi filtrada com a peneira e transferida (3-4mL) para o tubo de ensaio. No tubo, o álcool absoluto gelado foi delicadamente despejado pela parede do tubo ou pelo bastão (dobro do volume da solução extraída da banana), a nova solução não foi misturada.
Após 3 minutos o DNA se precipitou e formou-se entre a solução de extração e o álcool.
4. RESULTADOS
5. DISCUSSÕES E QUESTÕES
5.1 DISCUSSÕES
Durante a prática, obteve-se a compreensão do papel de cada etapa e substância usadas. A membrana da célula foi degradada através da maceração da fruta e da solução extração. O detergente adicionado na solução extração foi responsável de romper a bicamada lipídica, já o sal, que em ambiente aquoso libera íons, neutralizou a carga negativa do DNA. E por fim o álcool possibilitou a precipitação do DNA, já que a molécula não possui solubilidade nesse solvente e com o álcool gelado, o DNA possui ainda menos. O que resulta em uma massa enovelada e esbranquiçada.
5.2 QUESTÕES
1. Por que é necessário macerar a banana?
Para que as membranas das células sejam degradadas, e para aumentar a superfície de contato para a solução extração.
2. Qual a função do detergente na extração?
O detergente degrada a bicamada fosfolipídica onde sua parte polar interage com a água e a parte apolar com a gordura, formando estrutura em volta da gordura.
3. Qual a função do sal de cozinha (NaCl) na extração?
O sal neutraliza o DNA, diminuindo sua solubilidade.
4. Qual a função do álcool na extração?
Permite a concentração e a precipitação das moléculas de DNA, possibilitando sua visualização.
6. CONCLUSÃO
	A prática contribuiu para o aluno através da aprendizagem de uma nova técnica de extração de DNA, que posteriormente contribuirá para a formação de diversos outros ensaios laboratoriais. Compreender como as substâncias e processos utilizados contribuem para a metabolização de processos químicos no interior da célula abrange a capacitação e a experiência laboratorial e clínica do discente de Biotecnologia. Além de obter resultados positivos em mais uma prática, os usos das vidrarias do laboratório também somam à experiência do discente para futuras práticas. 
7. ANEXOS
 
ANEXO 01. Solução Extração.
ANEXO 02. Banana Macerada.
ANEXO 03. Mistura da Solução Extração à Banana.
ANEXO 04. Banho Maria da mistura.
ANEXO 05. Adição do Álcool à Mistura.
ANEXO 06. DNA precipitado.
8. REFERÊNCIAS
AMADO, F. Proteína C reativa (PCR): o que você precisa saber para sua prática clínica. © PEBMED, 2021. Disponível em: https://pebmed.com.br/proteina-c-reativa-pcr-o-que-voce-precisa-saber-para-sua-pratica-clinica/. Acesso em: 13 fevereiro 2022.
MAGALHÃES, L. DNA. © TodaMatéria, 2022. Disponível em: https://www.todamateria.com.br/dna/. Acesso em: 13 fevereiro 2022.