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Silvana Lopes Gomes ORDEM ENTEROBACTERALES/FAMÍLIA ENTEROBACTERIACEAE • Bacilos gram negativos, são aeróbios e anaeróbicos facultativos. Não produzem esporos, fermentadores de glicose com ou sem produção de gás. • Maioria reduz nitrato a nitrito. • Maioria é Oxidase neg e catalase +. • Podem ser móveis (flagelos) ou imóveis. • Crescem em meios seletivos (ágar Mac Conkey) e não seletivos enriquecidos (ágar sangue). • Bactérias da microbiota intestinal normal humana. • Responsável por infecções no T. urinário, respiratório... • FAMÍLIA ENTEROBACTERIACEAE: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Shiegella e Salmonella. • FAMÍLIA YERSINIACEAR: Serratia. • FAMÍLIA MORGANELLACEAE: Proteus, Morganella e Providencia. • Fermentação da lactose, detectada p/ mudança de cor do meio contendo lactose, por ex. meio mac conkey é usado para diferenciar cepas que fermentam lactose – colônias rosa (E.coli, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter) de cepas que não fermentam – colônias sem cor (Shigella, Salmonella, Proteus, yersínia). FATORES DE VIRULÊNCIA • ENDOTOXINA: BG – Aeróbicas. Inicia as manifestações sistêmicas das infecções. • CÁPSULA: Proteção da fagocitose. • VARIAÇÃO DA FASE ANTIGÊNICA: protege a bactéria da morte mediada por Ac. • SISTEMAS DE SECREÇÃO TIPO III: transferência de fatores de virulência → hospedeiro. • SEQUESTRO DE FATORES DE CRESCIMENTO: A bactéria ataca produzindo compostos quelantes de Fe (enterobactina). • RESISTÊNCIA OU EFEITO BACTERICIDA DO SORO • RESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS: Plasmídeos transferíveis. IDENTIFICAÇÃO PRESUNTIVA • Colonias mucóides → cepas encapsuladas de Klebsiella. • Móvel → ondas → Proteus • Colônias vermelhas no ágar MacConkey → formam ác (lactose +). • DIFERENCIAÇÃO DAS ENTEROBACTERIACEAE: presença ou ausência de diferentes enzimas • MORGANELLA MORGANII: Colonia B-hemolítica grande e cinza (ágar sangue). • SERRATIA MARCESCENS: Colonias vermelha-rosada em AS. ISOLAMENTO – ÁGAR MACCONKEY silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar silvana Destacar Silvana Lopes Gomes • Vermelho → indicador de pH → colônias que metabolizam lactose, produção de ácidos mistos. • E. coli produz ácidos fortes → colônias vermelhas- escuto (lactose +) • Ácidos fracos → colônias rosa-pálido. IDENTIFICAÇÃO • EXAME MACROSCÓPICO: análise do tamanho e aspecto morfológico e coloração → meios simples e seletivos. • EXAME MICROSCÓPICO: Coloração de Gram → tintura dos bacilos. IDENTIFICAÇÃO BIOQUIMICA • Identificação → meios presuntivos. • Testes em meios de culturas específicos → ação metabólica, através da alteração de cor, turbidez, pH. PROVA DA CATALASE Formação de bolhas de O2 → contanto do microrganismo com H2O2 → ação da enzima catalase. TESTE DA OXIDASE Detecção da enzima citocromo oxidase → bactérias não fermentadoras (oxidase +) das fermentadoras, por ex Enterobactérias (oxidase -). CALDO GLICOSE Fermentação do açúcar c/ produção de ácidos → mudança no pH (vermelho de fenol) ÁGAR AÇÚCAR TRIPLO FERRO (TRIPLE SUGAR IRON – TSI) Diferenciação de bacilos gram negativos → produção de sulfeto de hidrogênio. INDOL (REATIVO DE KOVACS) Detecção da ação da enzima Triptofanase → degradação do Triptofanase em indol. MEIO SIM (SULFETO, INDOL E MOTILIDADE) Motilidade: ➢ Bactérias móveis → turvam o meio. Silvana Lopes Gomes ➢ Bactérias imóveis → crescem apenas no local da semeadura. ÁGUAR DE CITRATO DE SIMMONS Bactéria utiliza citrato de sódio para produção de energia. PRODUÇÃO DE UREASE ÁGAR FENILALANINA ÁGAR LISINA DESACARBOXILASE (LIA) Meio cor púrpura → crescimento bact. E fermentação da glicose → produção de ác. → indicador de pH → meio amarelo. MEIOS SLEETIVOS PARA ENTEROBACTÉRIAS ÁGAR MAC CONKEY: SELETIVO E DIFERENCIAL: LACTOSE. • Inibem as gram + e algumas gram -. • Lactose + vermelhas → E. coli, Salmonella typhimurium • Lactose – incolores ou transparentes → Serratia mascescens, Proteus spp, Shigella ÁGAR SALMONELLA – SHIEGELLA (SS). • Altamente seletivo. • Inibe o crescimento da maioria dos coliformes • [ ] de sais biliares e citrato de sódio inibem as bactérias gram + e gram -, incluindo coliformes.
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