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UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHÃO CCSST/ENFERMAGEM DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA Profº Dr. Marcelino Santos Discentes: Allana Milena Sousa de Morais , André Manoel Barros Almeida, Maria Luiza Silva Carvalho, Maria Victoria Alves Ribeiro Sousa e Pablo Felipe Thomaz Oliveira. ESTUDO DIRIGIDO ASSUNTOS: Staphylococcus e Streptococcus 1. Descreva as características morfotintoriais e macroscópicas (colônias) do gênero Staphylococcus: R: O gênero Staphylococcus são cocos gram-positivos de ampla resistência, com ph mínimo de 4.2, máximo de 9.3, temperatura mínima 6 e máxima 48°, com ótimo de 37°. São anaeróbios facultativos, não fastidiosos, não móveis e quando cultivados em meio sólido tendem a se agrupar em cachos, que podem ser evidenciados por microscopia pela coloração Gram. 2. Quais são as principais enzimas e toxinas produzidas pelo gênero Staphylococcus? R: O gênero Staphylococcus aureus produz uma grande quantidade de enzimas extracelulares, muitas denominadas invasinas, produzem também proteases, nucleases, exonucleases, lipases, catalase, hialuronidases e a mais conhecida, coagulase. Em relação às toxinas, as principais produzidas são: as citotoxinas, as enterotoxinas, toxinas alfa, beta, delta, gama, as Leucocidinas, as exfoliatinas e as TSST-1. 3. Excepcionalmente, em virtude de mutações, um Staphylococcus e um Streptococcus podem ser confundidos (características macro e microscópicas). Qual seria a prova utilizada para dirimir a dúvida e qual seu fundamento? R: As colônias de Staphylococcus são geralmente maiores, convexas, de coloração variando do branco-porcelana ao amarelado podendo apresentar hemólise ou não. As colônias de Streptococcus tendem a ser menores e com halos de hemólise total ou parcial. No entanto, a diferenciação entre Staphylococcus e Streptococcus, se dá, seguramente, pela prova de catalase. Espera-se, normalmente, que a prova para estafilococos seja positiva, enquanto, para estreptococos seja negativa. 4. Cite algumas infecções produzidas pelo Staphylococcus epidermidis e pelo Staphylococcus saprophyticus: R: Staphylococcus epidermidis : Causa infecção relacionadas a ambiente hospitalar ,como o uso de cateter e outros dispositivos médicos de longa permanência , como por exemplo feridas cirúrgicas e endocardite; Staphylococcus saprophyticus: causa infecções no sistema urinário, principalmente em mulheres jovens e sexualmente ativas. Apesar de ser menos frequente nos homens , a infecção pode resultar em epidermite,uretrite e prostatite. 5. Cite a prova (ou enzima) mais frequentemente utilizada para distinguir o Staphylococcus aureus do S. epidermidis e do S. saprophyticus. Em que se fundamenta a referida prova? R: Identifica-se que, o teste de catalase é comumente utilizado para distinguir os Staphylococcus, ou seja, a existência da enzima catalase permite separar os Staphylococcus de outros grams. A catalase converte o peróxido de hidrogênio em oxigênio e água; a liberação do oxigênio se observa pela formação de bolhas, ainda sim é importante frisar que a identificação da espécie de staphylococcus e baseada em uma variedade de características, como prova podem ser reconhecidas através da pigmentação da colônia, estafilo-coagulase etc. 6. Qual a prova para distinguir Staphylococcus epidermidis do S. saprophyticus? Qual o fundamento e como é realizada a leitura da referida prova? R: O teste que é feito para realizar a diferenciação dessas cepas é a resistência à novobiocina. Esse teste é feito por meio de um antibiograma em uma placa de ágar Mueller-Hinton, com 5% de sangue de carneiro. O halo ≤16mm (resistente) identifica S. saprophyticus e o halo >16mm(sensível) indica a S. aureus. Esse método baseia-se no teste de difusão em disco de antibiótico, de Bauer e Kirby. 7. A que se atribui a alta resistência do Staphylococcus aureus às penicilinas? R: O S. aureus possui resistência a praticamente todos os antibióticos existentes, o que compromete a eficácia da utilização de antibióticos contra infecções estafilocócicas. Essa ampla resistência de cepas se dá, sobretudo, por mutações que alteram o sítio de ação do antibiótico e pela aquisição de genes de resistências de bactérias da mesma espécie ou de outras espécies, que inativa ou destrói o antibiótico. No caso da resistência à penicilina, o seu uso terapêutico e a ampla disseminação causou a produção das enzimas (β- lactamases) pelas bactérias secretadas ao meio externo, capazes de inativar os antibióticos por meio da hidrólise deste antibiótico. 8. Por que é recomendado a realização de Antibiograma quando se isola determinada espécie de bactérias, à exemplo Staphylococcus aureus ou Streptococcus pyogenes? R: O antibiograma é um exame que indica o nível de sensibilidade das bactérias aos antibióticos. Em muitas situações, sob o ponto de vista clínico, os resultados do antibiograma são considerados mais importantes do que a própria identificação do microorganismo envolvido no processo infeccioso. Em parte, isso pode ser explicado pelo aumento mundial de micro-organismos multirresistentes, frente à ação indiscriminada do uso de antimicrobianos da população, o que limita a opção terapêutica. A rotina dos métodos para realização do antibiograma é padronizada para microrganismos patogênicos, comuns, aeróbios e facultativos, como Staphylococcus aureus e Streptococcus pyogenes. 9. Quais as medidas profiláticas adotadas para a prevenção de estafilococcias? R: As medidas eficazes são as de higienização das mãos: -ao chegar em casa - depois de ir ao banheiro -antes das refeições -após manusear dinheiro -antes de preparar os alimentos -após assoar o nariz -depois da limpeza da casa -depois do contato com materiais biológico, como sangue e líquidos corporais -antes e após qualquer procedimento invasivo 10. Quais são os meios comumente utilizados para a cultura do gênero Staphylococcus? E quais são as características de crescimento nesses meios? R: O principal meio de cultura é o Agar Sal Manitol. O Staphylococcus aureus, em seu meio de crescimento possui um formato arredondado e é encontrado agrupado, semelhante a um cacho de uva. Esse gênero não apenas cresce nesse meio, como também, converte a cor do meio originalmente rosa em amarelo, por conta da sua capacidade de fermentar o manitol. 11. Qual é a espécie de estafilococo que é geralmente associado com: (a) endocardite nos toxicômanos, (b) endocardite em pacientes com válvulas prostéticas no coração, (c) osteomielite, (d) infecção urinária baixa, (e) carbúnculo. R: (a) Endocardite nos toxicômanos: Staphylococcus aureus (b) Endocardite em pacientes com válvulas prostéticas no coração: Staphylococcus aureus; (c) Osteomielite: Staphylococcus aureus e Staphylococcus lugdunensis; (d) Infecção urinária baixa: Staphylococcus saprophyticus; (e) Carbúnculo: Staphylococcus aureus 12. Quais são as características morfotintoriais e fisiológicas do gênero Streptococcus? R: O gênero Streptococcus quanto as suas características morfotintoriais são cocos gram-positivos, de catalase-negativos. Em relação à fisiologia eles são anaeróbios facultativos e alguns podem crescer melhor em atmosfera enriquecida com CO2 (5%) ou em anaerobiose. Esse gênero forma um grupo heterogêneo de cocos que se dividem em um só plano e se agrupam em cadeias de tamanho variável. Possuem um metabolismo fermentativo e tem o ácido lático como produto final predominante da fermentação da glicose, com necessidade de meios enriquecidos, geralmente pelo sangue, para o crescimento. 13. Qual é a importância da hemólise na classificação dos estreptococos? R: Para que ocorra uma classificação efetiva dos tipos de estreptococos, leva-se em consideração o tipo de morte celular provocado por essas bactérias, tendo em vista, o grau de infecção resultante dessa ação para o organismo. Inicialmente, se a hemólise for total esse organismo é beta, o tipo mais relevante, pois causa determinadas doenças graves que necessitam de atenção médica. Por outro lado, se a hemólise for parcial é um alfa, e caso seja nulaé do tipo gama ou não hemolítico. 14. Como são classificadas as espécies de Streptococcus com base na hemólise originada em meio Ágar-sangue? R: Os Streptococcus são classificados como: - beta-hemólise quando ocorre a lise total das hemácias ; -alfa -hemólise quando ocorre a lise parcial; -gama quando não ocorre a hemólise . 15. Cite e caracterize o agente dá: (a) febre reumática e (b) glomerulonefrite aguda: R: O agente causador da febre reumática e da glomerulonefrite aguda é o Streptococcus pyogenes, que é uma espécie de bactéria Gram-positiva com morfologia de coco, pertencente ao gênero Streptococcus, beta-hemolítico do grupo A de Lancefield. Formam cadeias relativamente longas quando cultivadas em meio líquido e possuem um crescimento bom em ágar sangue ou em meios líquidos contendo glicose. . 16. As diversas espécies de Streptococcus também podem ser classificadas de acordo com o constituinte da parede celular bacteriana, de acordo com a classificação de Lancefield. Como são diferenciados os diferentes grupos inseridos nesta classificação? R: A classificação de Lancefield é feita em grupos sorológicos, baseada nas características antigênicas de um polissacarídeo, de composição variável, chamado de carboidrato C, que está na parede celular. A partir disso, os estreptococos foram divididos em 20 grupos sorológicos por letras maiúsculas do alfabeto (A, B, C, D, F, G, H, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U e V). Os do grupo A, são divididos em tipos sorológicos, relacionados à presença de proteínas imunologicamente distintas na superfície da célula. Destaca-se que essa classificação é bastante utilizada para a identificação de estreptococos β-hemolíticos. 17. Qual a importância da utilização da Estreptoquinase no tratamento das tromboses venosas? R: A Estreptoquinase, também chamada de fibrinolisina, por possuir a capacidade de dissolver coágulos, pela transformação dos plasminogênio em plasmina, desempenha um papel importante no tratamento de tromboses venosas, uma vez que essa grave doença induz a formação de coágulos (trombos) no interior das veias. Assim, a estreptoquinase auxilia no processo de dissolução desses coágulos para evitar o agravamento dessa doença, como a embolia pulmonar, por exemplo. 18. Por que na realização do exame de ASLO devemos realizar a análise quantitativa? Qual a importância da referida análise? R: O exame Aslo possui o objetivo de identificar se o paciente foi infectado pela bactéria Streptococcus Pyogenes. A importância dessa análise quantitativa se dá pela contagem de anticorpos produzidos pelo organismo frente a ação da toxina estreptolisina O liberada por esse microrganismo. 19. A febre reumática desencadeada por Streptococcus pyogenes é responsável por alterações inflamatórias que afetam coração, vasos sanguíneos, articulações, etc. Para um paciente internado em UTI e que ainda não tem diagnóstico definido de febre reumática, qual exame microbiológico será necessário para elucidação diagnóstica? R: o ASLO, que é o exame da antiestreptolisina O, que tem como objetivo identificar uma toxina liberada pelo S. pyogenes produzidos pelo organismo contra essa bactéria. Além desse exame, é possível fazer uma cultura microbiológica do material proveniente na garganta onde é o local em que a bactéria normalmente está presente . 20. O mecanismo da coloração de gram relaciona-se com a composição e a espessura da parede celular bacteriana. Neste aspecto, diferencie as bactérias gram positivas das gram negativas. R: As bactérias Gram-positivas barram o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, em evidência na cor roxa. Já as bactérias Gram-negativas, dispõem de uma parede de peptidoglicano mais fina que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e possuem a cor vermelha no processo de coloração final.
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