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FARMÁCIA 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
MÉTODOS INSTRUMENTAIS DE ANÁLISE 
 
 
 
 
ALUNO: 
CLERISTON ALEX SANTOS PEREIRA 
RA: 0403641 
POLO: MARQUÊS DE SÃO VICENTE 
 
 
 
 
 
SÃO PAULO - SP 
2022 
INTRODUÇÃO: 
 
Segundo a ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária), a 
validação de um método é um processo contínuo que inicia a partir do 
planejamento da estratégia analítica e contínua ao longo de todo o seu 
desenvolvimento e transferência. É necessário garantir, através de estudos 
experimentais, que o método atenda as exigências das aplicações analíticas, 
garantindo a confiabilidade dos resultados. Para que aconteça um resultado 
seguro, contam com alguns aspectos: Seletividade, Precisão e Exatidão. 
(PEREZ, 2010). Segundo o INMETRO (Instituto Nacional de Metrologia), a 
validação de um método analítico tem como fundamento o fornecimento de 
uma evidencia documentada, por meio de um processo onde são realizados 
estudos laboratoriais que comprovam que um determinado procedimento é o 
coincidente para a finalidade, o qual foi indicado. Para ser mais amplo, esse 
processo é a confirmação por testes e apresentação de evidências objetivas de 
que determinados requisitos são preenchidos para um dado intencional 
(ISSO/IEC 17025). 
Os métodos instrumentais de análise tornaram-se um dos principais 
meios de obtenção de informações em diversas áreas da ciência e tecnologia. 
Fatores como: velocidade e alta sensibilidade para aquisição de dados, baixos 
limites de detecção, automação de instrumentos etc. Ao comparados aos 
métodos clássicos de analise, esclarecem o interesse dos profissionais em 
varias áreas, no emprego das técnicas instrumentais. Sendo assim, os 
profissionais e estudantes devem ter em sua formação a compreensão dos 
princípios fundamentais de diferentes técnicas, conhecimento dos instrumentos 
e suas aplicações. (NEVES, 2020) 
O controle de qualidade dos medicamentos requer a identificação e a 
quantificação das substancias químicas presentes em formas farmacêuticas 
denominadas de: comprimido, cápsula, creme, pomada, gel, entre outras que 
contém o fármaco, com realização de análises químicas e físicas. Hoje em dia, 
grande parte das análises químicas realizadas em medicamentos e os insumos 
ligados à área farmacêutica se constituem de métodos analíticos, quantitativos 
e instrumentais como os espectrométricos, baseados na interação de aspectos 
químicos com a energia; e os cromatográficos e potenciométricos baseados em 
outras características físico-químicas, a exemplo o potencial químico e as 
interações promovidas pelas moléculas e íons onde esses equipamentos de 
elevada precisão e robustez, onde são capazes de identificar e quantificar os 
componentes de interesse na forma farmacêutica. As aulas nos proporcionam 
nos levam a uma melhor visão do que se trata a matéria, onde possamos 
compreender melhor a importância de um método instrumental de análise, 
onde pretende que os alunos adquiram conhecimento e competência sobre a 
análise instrumental. 
 
 
Normas de segurança no laboratório de farmácia: 
 
 Uso obrigatório de máscara para todos os alunos; 
 O aluno deverá estar vestindo calças compridas (Não é permitido calças 
com rasgos, furos, desfiadas, bem como modelos do tipo legging). Os 
sapatos devem ser fechados (calçados como: chinelos, rasteirinhas, 
sapatilhas, sapatos de salto e botas não são permitidos); 
 Retirar adornos: anéis, brincos, colares, pulseiras; 
 Caso possua cabelos longos lembre-se que os mesmos deverão estar 
sempre presos; 
 O aluno deverá sempre portar um avental (jaleco) branco de algodão, de 
mangas compridas, com comprimento próximo aos joelhos e com botões 
para fechamento na região anterior do corpo; 
 Levar o roteiro da aula impresso que está disponível no AVA. Estes 
roteiros são imprescindíveis para o acompanhamento das aulas. 
 
Fonte: AVA/orientações sobre aula prática. Unip22 
 
 
 
 
 
 
 
 
Aula 1 
Título - Análise em espectrofotômetro. 
 
Objetivo - Este experimento tem por objetivo efetuar a varredura de 
comprimento de onda na região visível no espectro eletromagnético para uma 
solução aquosa de alaranjado de metila utilizando o espectrofotômetro UV-VIS 
e determinar o comprimento de onda de máxima absorbância dessa 
substancia. 
 
No procedimento foi utilizado com uma cubeta com o BRANCO e uma 
com o metil-alaranjado como vemos no gráfico abaixo. 
 
Tabela 1 – Varredura de absorbância em diferentes comprimentos de onda 
para análise de solução de alaranjado de metila. 
 
λ (nm) A (nm) 
400 0,111 
410 0,128 
420 0,133 
430 0,159 
440 0,191 
450 0,202 
460 0,214 
470 0,213 
480 0,192 
490 0,166 
500 0,117 
510 0,091 
520 0,047 
530 0,029 
540 0,003 
550 0,008 
560 0,029 
 
Construir o gráfico que representa o espectro eletromagnético de absorção do 
alaranjado de metila, tendo a absorbância (A) como ordenada em comprimento 
de onda (λ) como abscissa. Identificar o comprimento de onda referente a 
máxima absorbância. 
 
 
Podemos observar que a maior radiação do pico de comprimento de onda ficou 
entre 460 nm. 
 
A = 0,214 
 
 
Aula 2 
Título – Construção da curva de calibração para análise de alaranjado de metila. 
 
Objetivo – Construir a curva de calibração para análise do alaranjado de metila 
por espectrofotometria. 
 
Procedimento – Utilizamos o alaranjado de metila (10 mg/L) em um bequer de 
50 ml e foi utilizado 4 balões de 50 ml. 
 
C
 
Fonte – foto tirada na aula de laboratório. 
 
C (mg/L) A 
1,0 0,099 
2,5 0,263 
5,0 0,509 
8,0 0,782 
10,0 0,997 
 
Resultados – espectrofotômetro – 460 nm 
 
 
Resultados – ao avaliarmos o gráfico, observamos que se aumenta a 
concentração aumenta a absorbância e pratica uma reta linear. O valor 
referente a 0,999 está quase perfeito. Segundo a RDC 166/2017 o método será 
considerado LINEAR quando apresentar r ≥ 0,990. 
 
A = 0,24 
Deste modo 0,24 = 0, 0983.C = 2,17 mg/L 
 
Aula - 3 
Título – Avaliação da seletividade do método espectrofotométrico de dosagem de 
alaranjado de metila. 
 
Objetivo – Realizar ensaios de seletividade, precisão e exatidão para 
validação parcial do método instrumental de quantificação do teor de 
alaranjado de metila em solução. 
 
Observação – a solução de referência do alaranjado de metila (5,0 mg/L) 
deverá ser preparada pelo técnico do laboratório dissolvendo a substancia em 
agua destilada. 
 
 Realizamos todo o procedimento de acordo com o roteiro. 
 
Tabela de resultados 
Tubo Absorbância (A) 
A 0,250 
B 0,530 
 
 
 AP - A 
 % Recup = ---------------- .100 
 P 
 
AP – Concentração para amostra com adição do padrão de referência. 
A – Concentração para a amostra sem adição do padrão de referência. 
P – Concentração do padrão de referência. 
No método de adição de padrão de padrão, os valores aceitos são entre 80% - 
120% de recuperação para que o método possa ser considerado seletivo. 
 
 
 
 0,284 – 0,250 0,034 
 % Recup = -------------------- = ---------- = 0,103.100 = 10,27% 
 P = 0,331 0,331 
 
 % Recup = 10,27% - 100 = 89,73% 
 
 
Através dos cálculos podemos afirmar que a avaliação da seletividade foi 
aprovada, pois a % de Recup – 89,73% está dentro do intervalo aceito. (80 a 
120%). 
 
 
 
Aula – 4 
Título – Avaliação de precisão e exatidão do método espectrofotométrico de dosagem 
de alaranjado de metila. 
 
Observação – solução de alaranjado de metila (4,0 mg/L) e a solução de 
referência de alaranjado de metila (10 mg/L) deverão ser preparados pelo 
técnico do laboratório dissolvendo a substancia em agua destilada. 
 
Objetivo – Realizar os ensaios de precisão exatidão para a validação parcial 
do métodoinstrumental. 
 
PARTE I – Ensaio de precisão e exatidão. 
 
1 - Cálculo do teor a 80% da concentração de solução de alaranjado de metila 
com concentração 4,0 mg/L. Para essa analise o aluno deve efetuar uma 
diluição da solução de referencia (10mg/L) de forma a se alcançar uma 
concentração igual a 3,2 mg/L. 
 
 
2 – Cálculo do teor a 120% da concentração da solução de alaranjado de 
metila com concentração 4,0 mg/L. A amostra preparada pelo aluno (5,0 mg/L) 
será necessário efetuar uma diluição de da solução de referencia (10 mg/L) de 
forma a alcançar uma concentração igual a 4,8 mg/L. 
 
 Fizemos todo o procedimento descrito no roteiro. 
 
 
3 – Cálculo do teor a 100% da concentração da solução de alaranjado de 
metila com concentração a 4,0 mg/L. 
 
 Fizemos todo o procedimento descrito no roteiro. 
Gráfico de avaliação das tabelas 1,2,3 de absorbância da solução de 
alaranjado de metila: 
 
 
Resultados – De acordo com o gráfico acima, o resultado está dentro da normalidade 
do coeficiente e desvio padrão. 
 
 
 
 
 
Aula – 5 
Título – Analise cromatográfica de ácido acetilsalicílico e paracetamol. 
 
Objetivo – Avaliar a separação de princípios ativos de ação analgésica pela 
técnica CCD. Serão analisadas as amostras de aspirina, paracetamol e 
coristina D. 
 Fizemos todo o procedimento descrito no roteiro. 
 
 
Imagem tirada no laboratório pelo nosso grupo. 
 
RESULTADOS. 
Molécula Rf 
Paracetamol 0,47917 
Ácido acetilsalicílico 0,6667 
 
Rf = 2,3 / (PT) 4,8 = 0,479 comprimido 
Rf = 3,2 / (AAS) 4,8 = 0,6667 comprimido 
Paracetamol padrão = 2,3/4,8 = 0,479 
Paracetamol amostra = 2,3/4,8 = 0,479 
AAS padrão = 3,2/4,8 = 0,6666 
AAS amostra = 3,2/4,8 = 0,6666 
 
 
Aula – 7 
Título – Análise por cromatografia em coluna de troca iônica Hemoglobina glicada em 
amostra de sangue. 
 
Objetivo – Avaliar a separação das frações de hemoglobina glicada e normal 
em coluna de troca iônica. Determinar a porcentagem de hemoglobina glicada 
em amostra de sangue. 
 
Realizamos todos os procedimentos 1,2,3 de acordo com o roteiro. 
 
Resultados. 
 
R1 = Teste 1 1,956 
 ------------ = ------------ = 0,853 
 Teste 2 2,293 
 
 
 
R2 = Padrão 1 0,868 
 -------------- = ---------- = 0,3871 
 Padrão 2 2,242 
 
 
 
HG = 0,853 
 ----------- . 10 = 22.03 
 0,3871 
 
 
 
 
 
Resultado altamente patológico, pois, o normal seria de 5,3 a 8,0%. 
 
 
 
 
Referências bibliográficas. 
 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografia_em_camada_delgada 
 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrofot%C3%B4metro 
 
http://www.ciencias.seed.pr.gov.br/modules/conteudo/conteudo.php?conteudo=
316 
 
https://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/872917/1/CIT03.pdf 
 
 
 
 
 
 
 
 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografia_em_camada_delgada
https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectrofot%C3%B4metro
http://www.ciencias.seed.pr.gov.br/modules/conteudo/conteudo.php?conteudo=316
http://www.ciencias.seed.pr.gov.br/modules/conteudo/conteudo.php?conteudo=316
https://www.infoteca.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/872917/1/CIT03.pdf