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22:19 :eí· 4 f- VOLTAR Questão 1 Através da técnica de eletroforese, ocorre a separação de moléculas em populações de tamanhos semelhantes, as quais são visualizadas como bandas no gel através de marcadores específicos. Sobre os marcadores para técnica de eletroforese em gel, assinale a alternativa CORRETA: O marcador ideal é o brometo de etídio, um corante fluorescente, que se liga ao DNA ou RNA e possibilita a sua visualização através de luz ultravioleta (UV). 0 ••··· •••• 22:19 :0· ~ ~ VOLTAR Questão 2 A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA: A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real. • 0 ••·· •••• 22:19 :0· ~ ~ VOLTAR Questão 3 O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. Um exemplo dessas plataformas é a MinlON. Sobre a plataforma MinlON, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: 1- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinlON, as amostras a serem sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA a passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são detectadas. PORQUE li- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é formada rapidamente. Assinale a alternativa CORRETA: As asserções I e li são proposições verdadeiras, mas a 11 não é uma justificativa da 1. •• 0 ••· •••• 22:19 :eí· 4 f- VOLTAR Questão 4 O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR. Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir: 1- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA complementar (cDNA). 11- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando como molde uma fita simples de RNA. Ili- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de cDNA. Assinale a alternativa CORRETA: ·•• 0 •• •••• 22:19 :0· ~ ~ VOLTAR Questão 5 Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir: 1- Sequenciamento de Sanger. 11- Next Generation Sequencing. 111- Sequenciamento de terceira geração. ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia {ddNTP). { ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real. { ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o processamento das amostras. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 1 - 111 - 11. ··•• 0 • •••• 22:19 :0· ,f ~íT'• •• ":"u l...=...J f- VOLTAR Questão 6 O processo de replicação do DNA é relativamente simples, envolvendo diversas enzimas para que a síntese de uma nova fita de DNA seja realizada. Com base nas enzimas envolvidas no processo de replicação in vivo, analise as sentenças a seguir: 1- A enzima DNA polimerase realiza a adição de novos nucleotídeos à nova fita do DNA que está sendo sintetizada, podendo atuar de modo independente do sentido da fita (3'-5' ou 5'-3'), já que não necessitam de iniciadores. li- As primases são enzimas responsáveis por adicionar primers (iniciadores) à fita de DNA que está sendo sintetizada, pois a DNA polimerase necessita de uma extremidade 3' disponível para a inserção do novo nucleotídeo. Ili-As enzimas, DNA girase e helicase, são as responsáveis por abrir a dupla fita de DNA, e cortar as pontes de hidrogênio entre os nucleotídeos, permitindo, assim, a separação da fita e síntese de uma nova fita. Assinale a alternativa CORRETA: As sentenças 11 e 111 estão corretas. ···•• 0 •••• 22:20 €i " .::::::,.'Tl, •• "':"' j t ~ ~ VOLTAR Questão 7 O gráfico a seguir ilustra uma curva de amplificação da PCR em tempo real. De acordo com a interpretação do gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. ( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. ( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: C:k .lt'IMlrX: 20 l l QWl1 daOtdt .mcm-~ .im>2r• t. > .)ll'\01:n e> imv.ir.:C Cb Jtr~hold 22:20 €'1· '4 ~ VOLTAR ,,. ·u e •G, Rilclo..~cwnd ~ ~ o ::, C:k Al"lmlrx: Questão 7 l tr"'hold lO l l Quan Oadedt .mrxv~ .1ffl~U I. > ~~:n B > Jmcy.tr~ C Cb 22:20 :eí· 4 1 ~'2'• • • lt '---=--J f- VOLTAR Questão 8 A técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) se refere à replicação in vitro de um fragmento de DNA. Sobre o PCR, assinale a alternativa CORRETA: O processo de replicação in vitro, depende do uso de primers (oligonucleotídeos sintéticos), com sequências de 18 a 22 nucleotídeos, que seja complementar ao gene de interesse . •••••• 8 (1) 99 22:20 :eí· 4 ~íT'• •• ":"u '--=--' f- VOLTAR Questão 9 O RNA é uma molécula muito semelhante ao DNA, originado a partir do processo de transcrição, em que carrega informações contidas no DNA para fora do núcleo. Essas informações, darão origem à síntese de proteínas, através do processo de tradução. Sobre o RNA, assinale a alternativa CORRETA: O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pela pentase denominada como ribose; os nucleotídeos adenina, uracila, citosina e guanina e fosfato . •••••• aa ãJ a 22:20 :0 4 f- VOLTAR Questão 10 As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, permitindo a manipulação do DNA. ( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a partir de colõnias dessas bactérias. ( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: •••••• aaa cGJ
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