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Bacteriologia Bactérias São organismos procariontes e unicelulares, isto é, formadas por uma única célula e sem núcleo delimitado por carioteca. Nomenclatura Segue o modelo binominal de Lineu: primeiro o gênero e depois a espécie – exemplo: Escherichia Coli Tamanho A unidade de medida das bactérias é o mm - micrômetro; Faixa de tamanho: de 0,1 – 0,2 mm até 7,0 mm. Como é a classificação das bactérias, quanto: Ao metabolismo Podem ser Autótrofas e Heterótrofas. O que isso significa? Significa que algumas bactérias são capazes de produzir matéria orgânica (alimento) por meio de fotossíntese e quimiossíntese - autótrofas. Enquanto outras não são capazes de produzir matéria orgânica, são apenas decompositora de matéria orgânica - heterótrofas. A morfologia (3 principais formas) Cocos Células esféricas. De quais formas eles podem estar arranjados? (3 principais) Estafilococos - grupos irregulares que lembram cachos de uva Estreptococos - em cadeias Diplococos - pares Bastonetes Células cilíndricas Espiralados Espirilos - corpo rígido e se movimentam por meio de flagelos; Espiroquetas - são flexíveis e se movimentam por contrações do citoplasma, dando voltas em torno do seu próprio eixo. Existem mais 2 formas em transição, quais são? Cocobacilo: bacilos muito curtos; Vibrião: unidades celulares que se assemelham a uma vírgula; A forma é importante para a idenditificação clínica? Pneumonia - diplococo Furúnculos e abcessos – estafilococo Tétano, difteria e tuberculose - Bacilo A coloração As bactérias possuem estrutura, espessura e composição química da sua parede diferentes. Essas características permitiram classificar-las em dois grupos que reagem de forma diferente quando submetidos a técnica de Coloração de Gram. Quais são eles? Gram-Negativas tem uma camada de peptidoglicano muito mais grossa na sua parede, de forma mais externa. Gram-Positivas possuem uma camada externa complexa, consistindo em polissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídios. Coloração de Gram Passo a passo Cristal violeta: é mais absorvido pelas gram positivas - maior porção de peptideoglicano. Lugol: fixa o cristal violeta. Álcool acetona: remove o cristal violeta das gram negativas - camada externa de lipopolissacarídeos. Fucsina ou safranina: cora aquelas que estão descoradas - gram negativas. Visualização microscópica Método de Ziehl-Neelsen - Coloração de BAAR Coloração de bacilos que são álcool-ácido resistêntes. Exemplo: Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae. Passo a passo Vizualização microscópica A resposta ao O2 O oxigênio atua como aceptor de hidrogênio nas etapas finais de produção de energia; A utilização do oxigênio gera duas moléculas tóxicas: peróxidos de hidrogênio (H2O2) e o radical livre superóxido (O2). Assim, as bactérias precisam de duas enzimas para utilizar o oxigênio: catalase e superóxido dismutase, caso elas não tenham elas não sobrevivem na presença de O2; O que são bactérias aeróbias obrigatórias? Bactérias que crescem na presença de O2, por possuírem as enzimas citadas. Seu sistema de geração de energia depende de ATP. Ex: M. tuberculosis. O que são bactérias anaeróbias obrigatórias e facultativas? Facultativas Bactérias que utilizam O2, caso este se encontre Obrigatórias Bactérias que não possuem são anaeróbicas e morrem na presença de O2. presente, para gerar energia por meio da respiração; Contudo, são capazes de utilizar a via da fermentação para sintetizar ATP na ausência de O2 suficiente. Ex: E. Coli. Ex: Clostridium tetani. Fermentação • Fermentação: A fermentação, por exemplo a da glicose, resulta na produção de ATP e ácido pirúvico ou lático. Isso promove a diminuição do pH fato que serve para identificação laboratorial (alteração na cor de corantes indicadores). Quais são as estruturas da célula bacteriana? Parede celular extrutura localizada externamente a membrana citoplasmática formada por peptidoglicano. Segue abaixo algumas estruturas que forma a parede celular: Peptidoglicano (aminoácidos + açúcares): rede complexa e entrelaçada que envolve a célula, promove sustentação e permite a manutenção da forma da bactéria, impede a lise celular. Porinas Poros para a passagem de substâncias essenciais; LPS Lipopolissacarídeo - são endotoxina, toxinas que não são secretadas, elas estão integradas a parede celular de bactérias gram- negativas. Podem causar sintomas graves. Ácido teicoico Fibras de glicerol e fosfato características de bactérias gram- positivas; Facilitam a fixação da bactéria no organismo e tem efeitos endotóxicos. Parede celular de Mycobactérias Os ácidos micólicos tornam as micobactérias álcool-ácido resistentes. Membrana Plasmática Bicamada fosfolipídica similar aos eucariotos. Funções Transporte ativo de substâncias; Geração de energia pela fosforilação oxidativa; Síntese de percussores da parede celular; Secreção de enzimas e toxinas. Citoplasma É porção fluida da célula que contém substâncias e partículas dissolvidas, quais são elas? (3 principais) Ribossomos Local de síntese proteica; São menos que os das células eucarióticas (70S) - Essas diferenças entre as proteínas e RNA do nosso organismo são a base para a ação seletiva de antibióticos que inibe a síntese proteica bacteriana apenas. Material genético A célula bacteriana possui uma região onde fica o material genético - nucleóide; Possuem uma única molécula de DNA circular sem envoltório nuclear; Não possuem ítrons. Íntrons são sequências de DNA não codificantes Plasmídeo São moléculas de DNA extracromossômicos (mas que pode ter interação com o cromossomo), se replicam de forma independente; Aumentam a resistência a antibióticos, devido a possibilidade de sintetizar enzimas variadas; Outras 2 estruturas menos comentadas: Grânulos: armazenam nutrientes servindo como reserva de energia e possuem a capacidade de se corar. Transposons: segmentos de DNA que se deslocam - genes saltadores. Existem ainda estruturas externas à parede celular, quais são? Cápsula/ Glicocálice Camada gelatinosa de revestimento semelhante a um filme, composta por polissacarídeo, que aumenta a aderência das bactérias aos tecidos humanos. Diminuem a capacidade de fagócitos englobarem (fator de virulência)– Ex: as cargas negativas no polissacarídeo repelem as cargas negativas do neutrófilo; Flagelo É composto por várias unidades da proteína flagelina; A flagelina permite a identificação laboratorial de uma bactéria (uso de anticorpos contra proteínas flagelares). Possibilita o deslocamento da bactéria; Quimiotaxia - movimento em direção a substâncias ou nutrientes; Fototaxia - movimento em direção a luz. Pilus/ fímbrias Filamentos semelhantes a pelos que se projetam na superfície celular formados por subunidades da proteína pilina; Facilita a ligação de bactérias a receptores; Pilus sexual - possibilita a ligação entre uma bactéria doadora e receptora na conjugação; Sobre os esporos O que são e como são formados? São estruturas formadas no interior da célula, a partir da membrana plasmática, a fim de diminuir o metabolismo e proteger a o material genético celular em resposta a condições adversas (falta de nutrientes e água). Eles permanecem dentro da célula bacteriana até a exposição a nutrientes e água, quando ocorre o processo de germinação - esporulação. Qual sua importância clínica? Devido a composição de seus revestimentos (queratina e ácido dipicolínico) os esporos possuem uma extraordinária resitência ao meio - calor, agentes químicos e pH. Dessa forma, são mais difíceis de serem eliminados. Como ocorre a replicação/reprodução das bactérias? As bactérias se reproduzem de forma assexuada por meio de fissão binária. A parede celular cresce no sentido de promover uma repartição da célula formando duas metades, dentro da célula acontece a duplicação do cromossomo a célula mãe divide-sedando origem a duas células filhas que passam a ter um cromossomo cada. O que chamamos de crescimento exponencial. O clico de crescimento bacteriano é dividido em algumas fases, o que ocorre em cada uma delas? Fase lag (a) intensa atividade metabólica sem replicação. Fase log (b) fase de rápida e muita replicação Fase estacionária (c) diminuição de nutrientes, o que diminui também a replicação de novas células (número de bactérias constante) Fase de morte (d) declínio do número de bactérias Genética O que são mutações? modificação na sequencia de bases de DNA que gera um fenótipo alterado. Resultam de três tipos de alterações moleculares: Substituição de base: ocorre no momento da replicação, seja por erro da DNA-polimerase ou ação de um agente mutagênico na conformação do molde. Alterações na fase da leitura: quando pares de bases são alterados e isso gera problemas na leitura do ribossomo podendo gerar proteínas inativas. Transposons: sequências integradas ao DNA que podem modificar os genes. Também podem ser causadas por compostos químicos, radiação ou vírus. Quem promove a transferência de DNA dentro das células bacterianas? Os transposons (genes saltadores). Quais os 2 processos de trasnferência de DNA entre as células bacaterianas? Conjugação: transferência de DNA de uma célula doadora para uma célula receptora. Para que a conjugação ocorra, a bactéria doadora deve possuir um plasmídeo de “fertilidade” (plasmídeo F) que codifica as proteínas mediadoras desse processo, das quais as mais importantes estão relacionadas com a formação do pilus sexual. Os plasmídeos que carreiam genes de resistência a antibióticos são geralmente transferidos por conjugação. Transdução: processo pelo qual o DNA, plasmidial ou cromossômico, é transferido de uma bactéria a outra por intermédio de um vírus (bacteriófago). Durante o crescimento do vírus no interior da célula, uma porção do DNA bacteriano é incorporada na partícula viral, sendo transferido para a célula receptora durante a infecção. O que significa microbiota? É o termo utilizado para descrever as várias bactérias e fungos que são residentes permanentes em um organismo saudável, desempenhando funções importantes; Patogênese Quais são as principais formas de transmissão? Contato direto e indireto entre pessoas Por meio de vetores: mosquitos e carrapatos Entre animais e pessoas: zoonoses Principais portas de entrada do corpo humano: Trato respiratório, o trato gastrintestinal, a pele e o trato genital. Quais mecanismos de invasão e aderência das bactérias às células hospedeiras? Produção de enzimas com potencial degradante - exemplo: hialuronidase que degrada o ácido hialuronico presente no tecido subcutânio. Presença de cápsula - estrutura antifagocitária (retarna a ação dos fagócitos) Elas utilizam estruturas, pili e glicocálice que medeiam a interação com receptores específicos da célula humana. Sistema imune do hospedeiro Bactérias Extracelulares Imunidade Inata Principais mecanismos: ativação do complemento; opsonização e fagocitose; inflamação. O sistema complemento é ativado devido a própria composição das bactérias - os peptídeoglicanos nas gram+ e os LPS nas gram-, ou a expressão de manose, induzem o sistema complemento a opsonizar a bactéria para serem fagocitadas (neutrófilos e macrófagos). Além disso, as células denddríticas e os fagócitos mencionados secretam citocinas que recrutam leucócitos e induzem a inflamação; Imunidade Adaptativa Os anticorpos produzidos pelas células B são dirigidos aos antígenos da parede celular e as toxinas. Para “atacar” esses antígenos os anticorpos, principalmente IgG, IgM e IgA, usam alguns mecanismos: neutralização, opsonização e fagocitose; Além disso, os antígenos das bactérias extracelulares também ativam as células TCD4+ auxiliares que produzem citocinas para induzir a inflamação local, aumentar as atividades fagocíticas e a produção de anticorpos; Bactérias Intracelulares Diferente das extracelulares elas possuem uma capacidade grande de sobreviver dentro de fagócitos e o mecanismo de defesa acaba causando lesão tecidual; Imunidade Inata Mediada por fagócitos e células NK; Os fagócitos ingerem a célula bacteriana e tentam destruir, não conseguem e com ajuda das células dendríticas, estimulam a produção de citocinas (IL 12 e IL 15). Essas citocinas, assim como a própria estrutura bacteriana ativam as células NK que vão produzir IFN-y que ajudam a ativar os macrógafos para que eles consigam matar a bactéria fagocitada. Imunidade Adaptativa Ocorre por meio de 2 mecanismos: Células TCD4+ que promovem a morte das bactérias fagocitadas, mas não da célula infectada; Células T citotóxicas CD8+ (CLTs) que destroem diretamente a célula infectada - e por isso gera lesão tecidual; Qual a diferença da inflamação piogênica e granulomatosa? As bactérias normalmente geram um dos dois tipos de inflamação Na inflamação piogênica, a defesa do hospedeiro contra bactérias piogênicas (produtoras de pus), como o Streptococcus pyogenes, consiste em neutrófilos (assim como anticorpos e o complemento). Na inflamação granulomatosa, a defesa do hospedeiro contra bactérias intracelulares indutoras de granulomas, como o Mycobacterium tuberculosis. Quando há respostas persistentes de células T a determinados microrganismos que estimulam a liberação de citocinas responsáveis pela ativação crônica do macrófago; Cultura bacteriana, antibiograma e antibióticos O que é uma cultura bacteriana? Consiste no cultivo de agentes infecciosos em meio próprio (substância líquida ou sólida) que permite a nutrição, o crescimento e a multiplicação de microrganismos. O que é um antibiograma e como ele é feito? É o exame realizado a partir da técnica de cultura bacteriana com finalidade de identificar, de acordo com o meio que é colocado, as bactérias causadoras de um determinado problema, de modo que se possa saber quais medicamentos podem ser eficazes para combatê-las. O exame permite identificar qual o melhor medicamento para tratar as infecções causadas pelas bactérias em um paciente. Quanto maior a amplitude de ação do antibiótico, maior a efetividade do medicamento sobre a colônia de bactéria; Passo a passo Coleta - transporte - semeadura (meio sólido ou líquido, placa ou caldo com o meio adequado) - incubação - identificação - antibiograma (colocar os antibióticos no meio de cultura e verificar seus efeitos). Quais mecanismos de ação dos antibióticos? O que é toxicidade seletiva? É a inibição seletiva do crescimento do microrganismo sem danos ao hospedeiro. Esse mecanismo é baseado nas diferenças entre as estruturas bacterianas e humanas como por exemplo o tamanho dos ribossomos. O que é um antibiótico de amplo e pequeno espectro e qual usamos antes e depois de um antibiograma? Antibióticos de amplo espectro são ativos contra vários tipos de microrganismos, eles são usados: ~~~~. Já os antibióticos de pequeno espectro são ativos contra um ou poucos tipos~, eles são usados ~~~~ Qual a diferençã entre um fármaco bactericida e bacteriostático? Um fármaco bactericida mata as bactérias, ao passo que um fármaco bacteriostático inibe seu crescimento, mas não causa sua morte. Principais doenças Tuberculose FONTE: Levinson W. Microbiologia Médica e Imunologia. (13th edição). LANGE