4-aula-controle-de-populacoes-microbianas

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CONTROLE DE POPULAÇÕES 
MICROBIANAS
Prof. Adjunto Ary Fernandes Junior
Departamento de Microbiologia e Imunologia 
Instituto de Biociências – UNESP
Tel. 14 3880.0412
ary@ibb.unesp.br
Dessecação e Salga
Egípcios: Embalsamento
Persas: Recipientes de prata e cobre 
para água
Ignaz Phillip Semmelweis (1818-1865)
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em 
operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir 
incidência de infecção)
Controle de Populações Microbianas: ????
Alguns princípios importantes
 Levar em conta o número e natureza dos 
microrganismos presentes no material.
 O efeito normalmente não é instantâneo
(tempo de exposição);
 O agente deve afetar diretamente o 
microrganismo;
Destruir, inibir ou 
remover
microrganismos
Microrganismos em números aceitáveis ou 
ausência
dos mesmos
Controle da
população
microbiana
Agentes físicos Agentes químicos
Escolha de um método ??
Material
Objetivos 
Algumas Definições
Esterilização: Destruição de toda e qualquer 
forma de vida (formas vegetativas, esporos, 
fungos, vírus, etc) de um material
Desinfecção: Destruição de microrganismos 
patogênicos presentes num material inanimado 
(Desinfetantes)
Anti-sepsia: Destruição de microrganismos 
patogênicos num tecido vivo (Antissépticos) 
(Caracteristicas ??)
Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a 
entrada de microrganismos num material (vivo 
ou não) ou reduzir o número dos já presentes 
(Profilaxia)
AGENTES FÍSICOS
Calor (Seco e Úmido)
-Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo 
(minutos) em que 90 % de uma população microbiana 
em uma determinada temperatura será morta 
-Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em 
que todos os microrganismos em uma suspensão líquida 
serão mortos por calor em 10 minutos
-Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de 
tempo em que todos os microrganismos serão mortos
Calor Seco: Oxidação do Protoplasma 
Flambagem (Bico de Bunsen)
Fornos (Forno Pasteur)
Incineração
Bico de Bunsen
“Vassoura de fogo”
Forno Pasteur
Incineração
Calor Úmido Desnaturação de Proteínas
Dissolve lipídeos
Maior poder de penetração  Mais eficiente 
Fervura: (100C/15 min.)
(Não destroe Esporos e alguns Vírus 
(Hepatite A). 
Autoclavação: Vapor 
d’água sob pressão 
(121C/15’) 
(Autoclave) Uso 
para esterilização de 
materiais
(Meios de cultura, 
instrumento 
cirúrgicos, vidrarias, 
etc). 
Pasteurização
Eliminar microrganismos 
patogênicos de substâncias 
que não suportam 
temperaturas elevadas.
Tipos
 Lenta (62,8C/30 min) 5C.
 Rápida (71,7C/15 seg.)  5C 
(Reduz contagem entre 97 e 99%)
 UHT – Ultra High Temperature
ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE
(1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-
Homogeneizador; (6)-Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; 
(8)-Vapor de aquecimento ; (9)-Leite Pasteurizado.
Tindalização = Esterilização fracionada 
(Uso para meios nutritivos) 
70 a 100C/30 min.  Incubação
100oC/30 min – 1º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 2º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 3º dia
Baixas Temperaturas (-70 a -196oC) ????
Preserva
Nitrogênio líquido 
-196o C
Freezer 
-70o C
Filtração
Apenas separa microrganismos de materiais 
fluídos (Remoção mecânica). 
Eficiência - Depende da malha do filtro 
( 1 m)
Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais 
(Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
Câmara de Fluxo Laminar (Filtração e Ultra Violeta)
RadiaçõesNão Ionizantes (Ultra-Violeta) 
Ionizantes (Beta, Gama, Raio X)
Baixo Poder de Penetração Usos ???
UV   = 210 a 328 nm (240 a 280 nm)
(Absorvida pelo DNA e proteínas)
Efeitos Indiretos  Formação de O3 no ar e 
H2O2 na água.
Efeitos Diretos Mutação, 
Formação de Dímeros de 
Timina e Inibição de Enzimas;
Aparelhagem dispendiosa 
(Uso para substâncias e materiais sensíveis 
ao calor)
Radiações Ionizantes (X,  e Gama) 
(Elevado poder de penetração Alimentos 
embalados)
Ioniza macromoléculas  Altera composição 
química da célula
Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em 
sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
Vibrações Sônicas:  200.000 Hz 
Mecanismo: Gases em solução na célula 
Microbolhas Choques com a parede 
Lise da célula bacteriana (Cavitação)
Microondas 
Pressão Osmótica
Dessecação
AGENTES QUÍMICOS
Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente 
as bactérias tornam-se resistentes.
Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da 
célula bacteriana. São os antibióticos e 
quimioterápicos.
Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes
Drogas Antimicrobianas
Síntese de 
lipídeos
Streptomyces platensis
Platensimicina
Azitromicina
Claritromicina
Estreptograminas 
(Quinopristina/
Dalfopristina)
Tigeciclina
Mecanismos de Ação
Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico),
Isopropílico (+ eficiente)
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes.
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos, 
Vírus) (Pouco ativo contra esporos)
Tempo de exposição: 10 a 15 min.
Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno)
Fenóis e Derivados
Desinfetante: (5%) (Duplofen)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR.
Tempo de exposição: Efeito é imediato.
Coeficiente fenólico
ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE 
DA MEMBRANA CELULAR
Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio)
Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações)
Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora)
Detergentes (Surfactantes)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: 10 a 30 min.
Produto com atividade 
antimicrobiana e de 
detergência. É formulado a 
partir do princípio ativo 
Cloreto de Alquil 
Dimetil Benzil Amônio, 
que lhe confere a ação 
antimicrobiana e o Nonil 
Fenol Etoxilado (Tensoativo 
não iônico), que lhe confere 
a ação de detergência.
INATIVAÇÃO DE ENZIMAS 
R-SH -2H
R-S-S-R
R-SH 
H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI), 
Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina), 
Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000)
Oxidam Grupamentos Sulfidrilas:
Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR 
(Pouco ativos sobre esporos)
Tempo de exposição: Efeito imediato
O princípio ativo do PVPI 
(polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo 
que com suas propriedades 
germicidas amplamente 
conhecidas, reduz a flora 
bacteriana em curto espaço de 
tempo
Substituem Grupamentos Sulfidrilas: 
Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata -
Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia 
gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata)
Cl
R-SH R-S
+ Hg Hg + 2 HCl
R-SH R-S
Cl
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ) 
Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
Óxido de Etileno Gás Tóxico e Explosivo. 
AGENTES ALQUILANTES
Substituem átomos de hidrogênio em radicais
(R-NH2, OH, R-SH, R-COOH)
Formaldeído Usado na forma gasosa (Fumegação)
Glutaraldeído Solução Aquosa (Glutarex) 
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos. 
Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas 
Prolongado sobre esporos
UM BOM DESINFETANTE.
Não provocar danos ao homem e animais 
durante aplicação,
Econômico.
Fácil aplicação,
Tolerado por materiais,
Estabilidade em sua composição química,
Perda mínima de potência por ação do ambiente,
Ação rápida e irreversível
Espectro de ação amplo,
Lavar as mãos 
ainda continua 
sendo uma das 
soluções para 
os problemas 
enfrentados 
pela 
Microbiologia 
Clínica