Validação de Métodos Analíticos

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VALIDAÇÃO
UMA REVISÃO BASEADA EM 
DOCUMENTOS E NORMAS
PAULA FERNANDES DE AGUIAR
PROF. DEPARTAMENTO DE QUÍMICA 
ANALÍTICA DO IQ/UFRJ
e-mail: paulafda@iq.ufrj.br
Tel: (021) 2562-7877 / 9122-3216
Tel: (011) 7711-2760 / 9435-0310
XIV ENCONTRO SOBRE METODOLOGIAS E GESTÃO DE 
LABORATÓRIOS DA EMBRAPA
OBJETIVOS
APRESENTAR O ENTENDIMENTO 
SOBRE A VALIDAÇÃO DE 
MÉTODOS DE ANÁLISE A PARTIR 
DE VÁRIOS DOCUMENTOS E 
NORMAS
TIPOS DE DOCUMENTOS E NORMAS
GERAIS
ESPECÍFICOS
PODEM, EM PRINCÍPIO, SER UTILIZADOS 
PARA QUALQUER MÉTODO OU TÉCNICA 
ANALÍTICA
SÃO UTILIZADOS PARA ATENDER A UMA 
DETERMINADA EXIGÊNCIA OU A UM 
ORGANISMO CERTIFICADOR, 
ACREDITADOR OU HABILITADOR
DOCUMENTOS/NORMAS GERAIS USADOS 
COMO BASE PARA A APRESENTAÇÃO
VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURES: 
TEXT AND METHODOLOGY - Q2(R1)
1. ICH: 2005
3. INMETRO: 2008
ORIENTAÇÃO SOBRE VALIDAÇÃO DE MÉTODOS 
ANALÍTICOS – DOQ-GCRE-008
4. VIM: 2008
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA
2. IUPAC: 2002
HARMONISED GUIDELINES FOR SINGLE-LABORATORY 
VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS
6. EURACHEM: 1998
THE FITNESS FOR PURPOSE OF ANALYTICAL METHODS. 
A LABORATORY GUIDE TO METHOD VALIDATION AND 
RELATED TOPICS
5. ISO/IEC 17025: 2005
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA
DOCUMENTOS/NORMAS GERAIS USADOS 
COMO BASE PARA A APRESENTAÇÃO
7. ANVISA: 2005
GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA ANALÍTICA. UMA 
ASSISTÊNCIA À HABILITAÇÃO. SÉRIES TEMÁTICAS 1 -
LABORATÓRIO 
1. RESOLUÇÃO 899 DA ANVISA (AGÊNCIA NACIONAL DE 
VIGILÂNCIA SANITÁRIA): 2003
2. GUIA PARA VALIDAÇÃO DO MAPA (MINISTÉRIO DA 
AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO): 2008 
GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS DE ANALÍTICOS E 
CONTROLE DE QUALIDADE INTERNA DAS ANÁLISES DE 
MONITORAMENTO DO PLANO NACIONAL DE RESÍDUOS 
E CONTAMINANTES – PNCRC ANIMAL
DOCUMENTOS/NORMAS ESPECÍFICOS 
USADOS COMO BASE PARA A 
APRESENTAÇÃO
GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS
4. U.S. PHARMACOPOEIA CONV. (USP) – VOL. 31: 2008
3. DIRETIVA 657 - 96/23/CE: 2002
DESEMPENHO DE MÉTODOS ANALÍTICOS E 
INTERPRETAÇÃO DE RESULTADOS
DOCUMENTOS/NORMAS ESPECÍFICOS 
USADOS COMO BASE PARA A 
APRESENTAÇÃO
CAPÍTULO 1225 - VALIDAÇÃO
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005
VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.1)
“VALIDAÇÃO É A CONFIRMAÇÃO POR
EXAME E FORNECIMENTO DE EVIDÊNCIA
OBJETIVA DE QUE OS REQUISITOS
ESPECÍFICOS PARA UM DETERMINADO USO
PRETENDIDO SÃO ATENDIDOS”
VALIDAÇÃO
VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.2)
NOTA 2
“CONVÉM QUE A TÉCNICA USADA PARA A 
DETERMINAÇÃO DO DESEMPENHO DE UM 
MÉTODO SEJA UMA DAS SEGUINTES OU UMA 
COMBINAÇÃO DESTAS:”
1. CALIBRAÇÃO COM USO DE PADRÕES DE REFERÊNCIA 
OU MATERIAL DE REFERÊNCIA
2. COMPARAÇÕES COM RESULTADOS OBTIDOS POR 
OUTROS MÉTODOS
3. COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS
4. AVALIAÇÃO SISTEMÁTICA DOS FATORES QUE 
INFLUENCIAM O RESULTADO
5. AVALIAÇÃO DA INCERTEZA DO RESULTADO COM BASE 
NO CONHECIMENTO CIENTÍFICO DOS PRINCÍPIOS 
TEÓRICOS DO MÉTODO E NA EXPERIÊNCIA PRÁTICA
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005
TABELA COMPARATIVA DOS CRITÉRIOS 
SOLICITADOS PELOS DOCUMENTOS E NORMAS
DOCUMENTOS E NORMAS
CRITÉRIOS DE DESEMPENHO
S/E LIN SENS F. TRAB LD LQ CC αααα CCββββ EXAT RECUP REPE P. INT REPRO ROB
ICH X X X X X X X X X X
USP X X X X X X X X X X X
ANVISA X X X X X X X ** X X
INMETRO X X X X X X X X X X
MAPA X X X X X X X X
657 X X X X X X X X X
IUPAC X X X X X X X X X
EURACHEM X X X X X X X X X X X X
** = SE HOUVER REPRODUTIBILIDADE A PREC. INTERM. NÃO É NECESSÁRIA
DEFINIÇÕES
SELETIVIDADE/ESPECIFICIDADE
CAPACIDADE DO MÉTODO EM 
DETERMINAR INDUBITAVELMENTE O 
ANALITO DE INTERESSE NA PRESENÇA 
DE COMPONENTES PASSÍVEIS DE 
ESTAREM PRESENTES NA AMOSTRA, 
COMO IMPUREZAS, PRODUTOS DE 
DEGRADAÇÃO, EFEITOS DE MATRIZ, 
ETC.
ICH(E)
CAPACIDADE DO MÉTODO 
EM QUANTIFICAR COM 
EXATIDÃO O ANALITO DE 
INTERESSE, NA 
PRESENÇA DE 
INTERFERENTES
IUPAC(S)
USP(E)
ANVISA(E/S)
MÉTODO QUE PRODUZ RESPOSTA PARA 
VÁRIOS ANALITOS, MAS QUE PODE 
DISTINGUIR A RESPOSTA DO ANALITO DE 
INTERESSE DA DE OUTROS INMETRO(S)
CAPACIDADE DO 
MÉTODO DE 
DISCRIMINAÇÃO ENTRE 
A SUBSTÂNCIA A 
ANALISAR E 
SUBSTÂNCIAS ANÁLOGAS
MAPA(S/E)
PROPRIEDADE DE UM SISTEMA DE 
MEDIÇÃO,..., SEGUNDO A QUAL O 
SISTEMA FORNECE RESPOSTA DE 
UM OU MAIS ANALITOS, DE TAL 
FORMA QUE AS RESPOSTAS DOS 
ANALITOS SEJAM INDEPENDENTES 
ENTRE SI ...
VIM(S)
SELETIVIDADE/ESPECIFICIDADE
EURACHEM(E) CAPACIDADE DO MÉTODO EM 
DETERMINAR COM EXATIDÃO E 
ESPECIFICAMENTE O ANALITO DE 
INTERESSE NA PRESENÇA DE 
COMPONENTES PASSÍVEIS DE ESTAREM 
PRESENTES NA AMOSTRA, COMO 
IMPUREZAS, PRODUTOS DE 
DEGRADAÇÃO, EFEITOS DE MATRIZ, ETC.
657(E)
CAPACIDADE DE UM MÉTODO 
DISTINGUIR A SUBSTÂNCIA A 
ANALISAR DE OUTRAS 
SUBSTÂNCIAS
PROPRIEDADE DE UM SISTEMA DE 
MEDIÇÃO,..., SEGUNDO A QUAL O 
SISTEMA FORNECE RESPOSTA DE 
UM OU MAIS ANALITOS, DE TAL 
FORMA QUE AS RESPOSTAS DOS 
ANALITOS SÃO INDEPENDENTES 
ENTRE SI ...
VIM(S)
EXATIDÃO
EXPRESSA O GRAU DE CONCORDÂNCIA 
ENTRE O VALOR ACEITO COMO 
VERDADEIRO E O VALOR MEDIDO.
ICHUSP
PROXIMIDADE DOS 
RESULTADOS OBTIDOS 
PELO MÉTODO EM ESTUDO 
EM RELAÇÃO AO VALOR 
VERDADEIRO ANVISA
GRAU DE CONCORDÂNCIA 
ENTRE O RESULTADO DE 
UMA MEDIÇÃO E O VALOR 
VERDADEIRO DO 
MENSURANDO INMETRO
MAPA
HABILIDADE DO 
INSTRUMENTO EM DAR 
RESPOSTAS PRÓXIMAS AS 
DO VALOR VERDADEIRO 
DO MENSURANDO
EURACHEM
GRAU DE 
CONCORDÂNCIA ENTRE 
O RESULTADO DE UM 
ENSAIO E O VALOR DE 
REFERÊNCIA ACEITO. É 
DETERMINADA 
ATRAVÉS DA 
VERACIDADE E DA 
PRECISÃO 657
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE O 
VALOR MEDIDO E O VALOR 
VERDADEIRO DO MENSURANDO VIM
RECUPERAÇÃO/VERACIDADE
GRAU DE CONCORDÂNCIA 
ENTRE O VALOR MÉDIO 
OBTIDO DE UMA SÉRIE DE 
RESULTADOS DE ENSAIOS E 
UM VALOR DE REFERÊNCIA 
ACEITÁVEL
INMETRO(R)
EURACHEM(R/V)
EXPRESSA O GRAU DE CONCORDÂNCIA 
ENTRE O VALOR ACEITO COMO 
VERDADEIRO E O VALOR MEDIDO.
IUPAC(V/R)
FRAÇÃO DA QUANTIDADE TOTAL 
DO ANALITO PRESENTE NA 
AMOSTRA, QUE É OBTIDA APÓS A 
FINALIZAÇÃO DO PROCESSO DE 
EXTRAÇÃO MAPA(R)
657(R)
PERCENTAGEM DA 
CONCENTRAÇÃO 
REAL DE UMA 
SUBSTÂNCIA 
RECUPERADA 
DURANTE O 
PROCESSO 
ANALÍTICO
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE A 
MÉDIA DE UM NÚMERO INFINITO
DE REPLICATAS E O VALOR 
VERDADEIRO
VIM (V)
PRECISÃO
IUPAC
EXPRESSA O GRAU DE DISPERSÃO DE 
UMA SÉRIE DE MEDIDAS E DEVE SER 
CONSIDERADA EM TRÊS NÍVEIS: 
REPETITIVIDADE, PRECISÃO 
INTERMEDIÁRIA E 
REPRODUTIBILIDADE ICH
EXPRESSA O GRAU DE DISPERSÃO 
DE UMA SÉRIE DE MEDIDAS 
INDEPENDENTES E REALIZADAS 
EM CONDIÇÕES DEFINIDAS. DEVE 
SER INVESTIGADA EM CONDIÇÕES 
DE REPETITIVIDADE E DE 
PRECISÃO INTRA-ENSAIO
EXPRESSA O GRAU DE 
CONCORDÂNCIA DE 
UMA SÉRIE DE 
MEDIDAS QUANDO O 
PROCEDIMENTO É 
APLICADO 
REPETIDAMENTE A 
ALÍQUOTAS DE UMA 
AMOSTRA. ELA PODE 
SER UMA MEDIDA DA 
REPRODUTIBILIDADE 
OU DA REPETITIVIDADE 
USP
É A AVALIAÇÃO DA 
PROXIMIDADE DOS 
RESULTADOS OBTIDOS 
EM UMA SÉRIE DE 
MEDIDAS DE UMA 
AMOSTRAGEM MÚLTIPLA 
DE UMA MESMA 
AMOSTRA ANVISA
DISPERSÃO DE RESULTADOS ENTRE 
ENSAIOS INDEPENDENTES, 
REPETIDOS DE UMA MESMA 
AMOSTRA, AMOSTRA SEMELHANTE 
OU PADRÕES, EM CONDIÇÕES 
DEFINIDAS
INMETRO
PRECISÃO
É A AVALIAÇÃO DA DISPERSÃO DE 
RESULTADOS ENTRE ENSAIOS 
INDEPENDENTES, REPETIDOS DE UMA 
MESMA AMOSTRA, AMOSTRAS 
SEMELHANTES OU PADRÕES, EM 
CONDIÇÕES DEFINIDAS. AS DUAS FORMAS 
MAIS COMUNS DE EXPRESSÁ-LA SÃO POR 
MEIO DA REPETITIVIDADE E DA 
REPRODUTIBILIDADE MAPA
GRAU DE 
CONCORDÂNCIA 
ENTRE 
RESULTADOS DE 
ENSAIOS 
INDEPENDENTES, 
OBTIDOS EM 
CONDIÇÕES 
ESPECÍFICAS 
657
GRAU DE CONCORDÂNCIA 
ENTRE RESULTADOS 
OBTIDOS POR REPLICATAS 
DE UMA MESMA AMOSTRA 
EM CONDIÇÕES 
ESPECIFICADAS 
EURACHEM
VIM
REPETITIVIDADE/PRECISÃO INTRA-ENSAIO 
OU INTRA-CORRIDA
EXPRESSA A PRECISÃO SOB AS 
MESMAS CONDIÇÕES EXPERIMENTAIS 
NO MENOR INTERVALO DE TEMPO 
POSSÍVEL ICH USP
CONCORDÂNCIA ENTRE OS 
RESULTADOS DENTRO DE UM 
CURTO PERÍODO DE TEMPO 
COM O MESMO ANALISTA E 
MESMA INSTRUMENTAÇÃO ANVISA
PRECISÃO EM CONDIÇÕES 
DE REPETITIVIDADE, ISTO 
É, OBTENÇÃO DE 
RESULTADOS A PARTIR DE 
ENSAIOS INDEPENDENTES, 
COM O MESMO MÉTODO, 
COM MATERIAL DE 
ENSAIO IDÊNTICO, NO 
MESMO LABORATÓRIO, 
PELO MESMO OPERADOR 
EUTILIZANDO O MESMO 
EQUIPAMENTO 657
CONDIÇÃO DE MEDIDA ... 
QUE COMPREENDE O 
MESMO MÉTODO, OS 
MESMOS OPERADORES, O 
MESMO SISTEMA DE 
MEDIÇÃO, AS MESMAS 
CONDIÇÕES DE 
FUNCIONAMENTO, O MESMO 
LABORATÓRIO, E MEDIDAS 
EM REPLICATAS DE UMA 
MESMA AMOSTRA, DURANTE 
UM CURTO ESPAÇO DE 
TEMPO VIM
CONDIÇÃO DE MEDIDA ... QUE COMPREENDE 
O MESMO MÉTODO, OS MESMOS 
OPERADORES, O MESMO SISTEMA DE 
MEDIÇÃO, AS MESMAS CONDIÇÕES DE 
FUNCIONAMENTO, O MESMO LABORATÓRIO, E 
MEDIDAS EM REPLICATAS DE UMA MESMA 
AMOSTRA, DURANTE UM CURTO ESPAÇO DE 
TEMPO VIM
REPETITIVIDADE/PRECISÃO INTRA-ENSAIO 
OU INTRA-CORRIDA
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE OS 
RESULTADOS DE MEDIÇÕES 
SUCESSIVAS DE UM MESMO 
MENSURANDO, EFETUADAS SOB AS 
MESMAS CONDIÇÕES DE MEDIÇÃO 
INMETRO
MAPA
VARIAÇÕES OBSERVADAS 
EM UMA CORRIDA
IUPAC
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA/PRECISÃO INTER-
ENSAIOS OU INTER-
CORRIDAS/REPRODUTIBILIDADE 
INTRALABORATORIAL
EXPRESSA VARIAÇÃO NO LABORATÓRIO 
QUANDO DA TROCA DE DIAS, DE 
ANALISTAS, DE EQUIPAMENTOS, ETC 
ICH
VARIAÇÕES OBSERVADAS 
ENTRE CORRIDAS IUPAC
USP
CONCORDÂNCIA ENTRE OS 
RESULTADOS DO MESMO 
LABORATÓRIO MAS OBTIDOS 
EM DIAS DIFERENTES, COM 
ANALISTAS DIFERENTES E/OU 
EQUIPAMENTOS DIFERENTES
ANVISA INMETRO
EURACHEM
CONDIÇÕES DE MEDIDAS QUE 
INCLUEM O MESMO MÉTODO, 
O MESMO LABORATÓRIO, E 
REPLICATAS DE UMA MESMA 
AMOSTRA POR UM PERÍODO 
LONGO, ALÉM DE OUTRAS 
CONDIÇÕES DE MUDANÇAS
VIM
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA/PRECISÃO INTER-
ENSAIOS OU INTER-
CORRIDAS/REPRODUTIBILIDADE 
INTRALABORATORIAL
PRECISÃO OBTIDA NO MESMO 
LABORATÓRIO EM CONDIÇÕES 
PRÉ-ESTABELECIDAS 
ESPECÍFICAS (RELATIVAS, POR 
EXEMPLO, AO MÉTODO, 
MATERIAIS DE 
ENSAIO,OPERADORES, 
AMBIENTE) E AO LONGO DE 
INTERVALOS DE TEMO 
JUSTIFICADAMENTE LONGOS
657
PRECISÃO AVALIADA SOBRE 
MESMA AMOSTRA, AMOSTRAS 
IDÊNTICAS OU PADRÕES, 
UTILIZANDOO MESMO MÉTODO, 
MESMO LABORATÓRIO, MAS 
ALTERANDO ALGUMAS 
CONDIÇÕES, TAIS COMO: 
ANALISTAS EQUIPAMENTOS E 
CONDIÇÕES AMBIENTAIS, ENTRE 
OUTRAS
MAPA
REPRODUTIBILIDADE/
PRECISÃO INTER-
LABORATORIAL
USO DE UM PROCEDIMENTO ANALÍTICO EM 
DIFERENTES LABORATÓRIOS, COMO EM 
COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS
USP
CONCORDÂNCIA ENTRE OS RESULTADOS 
OBTIDOS EM LABORATÓRIOS DIFERENTES 
COMO EM ESTUDOS COLABORATIVOS
ANVISA
GRAU DE CONCORDÂNCIA ENTRE 
OS RESULTADOS DE MEDIÇÕES 
DE UM MESMO MENSURANDO 
EFETUADAS SOB CONDIÇÕES 
VARIADAS DE MEDIÇÃO
INMETRO
A REPRODUTIBILIDADE DEVE 
SER AVALIADA A PARTIR DE 
ESTUDOS COLABORATIVOS 
DE ACORDO COM A NORMA 
ISO 5725-2 657
CONDIÇÕES DE 
MEDIDAS QUE 
INCLUEM 
DIFERENTES 
LABORATÓRIOS, 
OPERADORES, 
SISTEMAS DE 
MEDIÇÃO, E 
REPLICATAS DE 
UMA MESMA 
AMOSTRA
VIM
CONDIÇÕES DE MEDIDAS QUE 
INCLUEM DIERENTES 
LABORATÓRIOS, 
OPERADORES, SISTEMAS DE 
MEDIÇÃO, E REPLICATAS DE 
UMA MESMA AMOSTRA
REPRODUTIBILIDADE/
PRECISÃO INTER-
LABORATORIAL
VIM
A 
REPRODUTIBILIDADE 
PODE SER AVALIADA A 
PARTIR DE 
RESULTADOS 
OBTIDOS COM O 
MESMO MÉTODO NAS 
MESMAS AMOSTRAS 
EM LABORATÓRIOS 
DIFERENTES COM 
OPERADORES 
DIFERENTES E 
EQUIPAMENTOS 
DIFERENTES
EURACHEM
EXPRESSA A PRECISÃO 
ENTRE LABORATÓRIOS ICH
LIMITE DE DETECÇÃO
ICH
MENOR QUANTIDADE DE ANALITO NA 
AMOSTRA QUE PODE SER 
DIFERENCIADO DO ZERO IUPAC
USP
MENOR QUANTIDADE DO 
ANALITO PRESENTE NA 
AMOSTRA QUE PODE SER 
DETECTADO, PORÉM NÃO 
NECESSARIAMENTE 
QUANTIFICADO
ANVISA
INMETRO
EURACHEM
VALOR MEDIDO ATRAVÉS 
DE UM DETERMINADO 
PROCEDIMENTO PARA O 
QUAL A PROBABILIDADE 
DE DETECTAR 
INCORRETAMENTE UM 
ANALITO É ββββ, E 
CORRETAMENTE É αααα
VIM
LIMITE DE 
QUANTIFICAÇÃO
MENOR QUANTIDADE DE ANALITO 
NA AMOSTRA QUE PODE SER 
QUANTIFICADA COM PRECISÃO E 
EXATIDÃO ACEITÁVEIS
ICH
CONCENTRAÇÃO ABAIXO DA 
QUAL O MÉTODO NÃO ALCANÇA 
A PRECISÃO ACEITÁVEL
IUPAC
USP
ANVISA
MENOR QUANTIDADE DE ANALITO QUE 
PODE SER DETERMINADA COM NÍVEL 
ACEITÁVEL DE PRECISÃO E TENDÊNCIA
INMETRO
EURACHEM
LINEARIDADE
HABILIDADE DE SE OBTER 
RESULTADOS DIRETAMENTE 
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO 
DO ANALITO NA AMOSTRA
ICH
USP
CAPACIDADE DE UMA METODOLOGIA 
ANALÍTICA EM DEMONSTRAR QUE OS 
RESULTADOS OBTIDOS SÃO DIRETAMENTE 
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO 
ANALITO NA AMOSTRA, DENTRO DE UM 
INTERVALO ESPECIFICADO
ANVISA
HABILLIDADE DE UM MÉTODO ANALÍTICO 
PRODUZIR RESULTADOS QUE SEJAM 
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO 
ANALITO NA AMOSTRA, EM UMA DADA 
FAIXA DE CONCENTRAÇÃO, TANTO 
DIRETAMENTE QUANTO POR MEIO DE UMA 
TRANSFORMAÇÃO MATEMÁTICA BEM 
DEFINIDA
INMETRO
MAPA
LINEARIDADE
HABILILIDADE DE UM MÉTODO ANALÍTICO 
PRODUZIR RESULTADOS QUE SEJAM 
PROPORCIONAIS À CONCENTRAÇÃO DO 
ANALITO NA AMOSTRA, EM UMA DADA 
FAIXA DE CONCENTRAÇÃO, TANTO 
DIRETAMENTE QUANTO POR MEIO DE UMA 
TRANSFORMAÇÃO MATEMÁTICA BEM 
DEFINIDA
EURACHEM
EXPRESSÃO DA RELAÇÃO ENTRE OS 
VALORES MEDIDO E INDICADO
VIM
FAIXA DE 
TRABALHO/INTERVALO
INTERVALO ENTRE A MAIOR E 
A MENOR CONCENTRAÇÃO DO 
ANALITO NA AMOSTRA
ICH
INTERVALO DE CONCENTRAÇÃO 
DO ANALITO NO QUAL O 
MÉTODO É CONSIDERADO 
VALIDADO
IUPAC
INTERVALO ENTRE A MAIOR E A MENOR 
CONCENTRAÇÃO DO ANALITO NA AMOSTRA 
QUE PODE SER DETERMINADO COM 
PRECISÃO, EXATIDÃO E LINEARIDADE 
ADEQUADAS USP
É A FAIXA ENTRE OS 
LIMITES DE 
QUANTIFICAÇÃO 
INFERIOR E SUPERIOR 
DE UM MÉTODO 
ANALÍTICO. É 
DERIVADO DO ESTUDO 
DE LINEARIDADE E 
CONFIRMADO PELA 
EXATIDÃO, PRECISÃO 
E LINEARIDADE 
ADEQUADOS
ANVISA
FAIXA DE CONCENTRAÇÃO NA QUAL 
O ANALITO EM QUESTÃO PODE SER 
DETERMINADO COM PRECISÃO E 
TENDÊNCIA ACEITÁVEIS INMETRO
EURACHEM
LIMITE DE DECISÃO (CCαααα)
CARACTERIZA A 
VARIAÇÃO 
PROVENIENTE DO 
RUÍDO
MAPA
LIMITE A PARTIR DO QUAL SE 
PODE CONCLUIR QUE UMA 
AMOSTRA É NÃO CONFORME, 
COM PROBABILIDADE DE ERRO 
DE αααα
657
CAPACIDADE DE DETECÇÃO (CCββββ)
CARACTERIZA A 
VARIAÇÃO 
PROVENIENTE DA 
MEDIDA
MAPA
657
TEOR MAIS BAIXO DE 
SUBSTÂNCIA QUE PODE SER 
DETECTADO, IDENTIFICADO 
E/OU QUANTIFICADO COM UMA 
PROBABILIDADE DE ERRO DE β β β β 
ROBUSTEZ
MEDIDA DA CAPACIDADE DO MÉTODO 
EM PERMANECER INALTERADO 
QUANDO PEQUENAS VARIAÇÕES SÃO 
IMPOSTAS AS VARIÁVEIS.
ICH
É A RESISTÊNCIA DOS 
RESULTADOS DO MÉTODO A 
PEQUENAS ALTERAÇÕES SÃO 
FEITAS NAS CONDIÇÕES 
EXPERIMENTAIS IUPAC
USP
MEDIDA DA CAPACIDADE DO 
MÉTODO EM RESISTIR A PEQUENAS 
E DELIBERADAS VARIAÇÕES DOS 
PARÂMETROS ANALÍTICOS
ANVISA
HABILIDADE DE UM 
MÉTODO ANALÍTICO NÃO 
SER AFETADO POR 
PEQUENAS E DELIBERADAS 
VARIAÇÕES EM SEUS 
FATORES
INMETRO
SUSCEPTIBILIDADE DE UM 
MÉTODO ANALÍTICO A 
ALTERAÇÕES DAS 
CONDIÇÕES 
EXPERIMENTAIS, AS QUAIS 
PODEM SER EXPRESSAS 
COMO UMA LISTA DE 
MATERIAIS DA AMOSTRA, 
DAS SUBSTÂNCIAS A 
ANALISAR, DAS CONDIÇÕES 
DE ARMAZENAMENTO, 
AMBIENTAIS E/OU DE 
PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
657
EURACHEM
NO ENTANTO, CADA CRITÉRIO DE 
DESEMPENHO TEM COMO OBJETIVO 
DEMONSTRAR A CAPACIDADE / 
ADEQUAÇÃO DE UM DETERMINADO 
MÉTODO EM ATENDER EM UMA 
EXIGÊNCIA ESPECÍFICA
EXECUÇÃO DOS CRITÉRIOS DE 
DESEMPENHO
NENHUMA NORMA/DOCUMENTO/GUIA / 
DIRETRIZ SE REFERE A UMA ORDEM DE 
EXECUÇÃO OU, PELO MENOS, DE APRESENTAÇÃO 
DESTES CRITÉRIOS
1. ESPECIFICIDADE / SELETIVIDADE
2. LINEARIDADE
3. FAIXA DE TRABALHO
4. LIMITE DE DETECÇÃO
1. EXATIDÃO
2. LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO
EQUIPAMENTO
AMOSTRA
1. COMPARAÇÃO INTERLABORATORIAL
2. PRECISÃO DO MÉTODO
FINAIS
BRUCE ET AL. (1996) PROPUSERAM QUE ESTES CRITÉRIOS 
FOSSEM APRESENTADOS NA SEGUINTE ORDEM
IMPLEMENTAÇÃO 
DOS CRITÉRIOS 
DE DESEMPENHO
O MÉTODO DEVE PODER DISCRIMINAR COMPOSTOS DE 
ESTRUTURAS SEMELHANTES. A DISCRIMINAÇÃO PODE 
SER CONFIRMADA OBTENDO-SE RESULTADOS POSITIVOS 
DE AMOSTRAS CONTENDO OS ANALITOS DE INTERESSE 
(TALVEZ ATRAVÉS DE MR) E DE RESULTADOS NEGATIVOS 
DE AMOSTRAS QUE NÃO CONTÉM ESTES ANALITOS
ESPECIFICIDADE
O MÉTODO TAMBÉM PODE SER APLICADO A ANALITOS 
COM ESTRUTURAS SEMELHANTES OU RELACIONADAS AOS 
ANALITOS DE INTERESSE, DE FORMA A CONFIRMAR QUE 
UMA RESPOSTA POSITIVA NÃO VÁ SER ENCONTRADA
ENSAIOS DE IDENTIFICAÇÃO
ICH
O MÉTODO DEVE PODER IDENTIFICAR O 
ANALITO DE INTERESSE NA PRESENÇA DE 
IMPUREZAS. A ESPECIFICIDADE PODE SER 
CONFIRMADA ATRAVÉS DA ANÁLISE DE 
AMOSTRAS FORTIFICADAS COM 
IMPUREZAS EM DIFERENTESCONCENTRAÇÕES E VERIFICANDO QUE OS 
RESULTADOS FICARAM INALTERADOS
USP
ESPECIFICIDADE
ENSAIOS DE IDENTIFICAÇÃO ANVISA
FAZER A ANÁLISE COM A AMOSTRA E 
MATERIAIS DE REFERÊNCIA PELO 
MÉTODO EM ESTUDO E OUTROS 
MÉTODOS VALIDADOS
ANALISAR AMOSTRAS CONTENDO 
VÁRIOS INTERFERENTES SUSPEITOS 
NA PRESENÇA DO ANALITO DE 
INTERESSE
INMETROSELETIVIDADE
A VERIFICAÇÃO DA SELETIVIDADE DEVE 
SER REALIZADA A PARTIR DA COMPARAÇÃO 
ENTRE OS SINAIS ADVINDOS DO 
PROCESSAMENTO DA MATRIZ, DO EXTRATO 
DA MATRIZ FORTIFICADO E DO ANALITO
ANALISAR RÉPLICAS DO EXTRATO DAS 
AMOSTRAS DA MATRIZ, FORTIFICADO 
EM 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
ANALISAR RÉPLICAS DAS 
AMOSTRAS DO ANALITO 
EM SOLUÇÃO, EM 5 
NÍVEIS DE 
CONCENTRAÇÃO
COMPARAR OS 
RESULTADOS POR NÍVEL 
DE CONCENTRAÇÃO
MAPASELETIVIDADE
SELECIONAR UMA GAMA DE COMPOSTOS 
QUIMICAMENTE APARENTADOS (METABÓLITOS, 
DERIVADOS, ETC) OU OUTRAS DE SUSCEPTÍVEIS DE 
SEREM ENCONTRADOS COM O COMPOSTO EM CAUSA 
E QUE POSSAM ESTAR PRESENTES NAS AMOSTRAS
ANALISAR UM NÚMERO ADEQUADO DE AMOSTRAS 
EM BRANCO (n ≥ 20) E VERIFICAR AS POSSÍVIES 
INTERFERÊNCIAS NA REGIÃO EM QUE SE PREVÊ A 
ELUIÇÃO DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR
FORTIFICAR AMOSTRAS EM BRANCO REPRESENTATIVAS 
NUMA CONCENTRAÇÃO RELEVANTE COM SUBSTÂNCIAS QUE 
POSSAM INTERFERIR NA IDENTIFICAÇÃO E/OU 
QUANTIFICAÇÃO DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR
657ESPECIFICIDADE
EM MUITOS TIPOS DE ANÁLISE A SELETIVIDADE É 
ESSENCIALMENTE UMA AVALIAÇÃO QUALITATIVA. 
NO ENTANTO, HÁ MEDIDAS QUANTITATIVAS QUE 
PODEM SER REALIZADAS.
O ÍNDICE DE SELETIVIDADE ( ) É 
UMA POSSÍVEL FORMA DE QUANTIFICAR 
A SELETIVIDADE. 
bAN REPRESENTA A SENSIBILIDADE DO MÉTODO 
(INCLINAÇÃO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO) E bINT A 
INCLINAÇÃO DA CURVA GERADA COM O BRANCO 
DA MATRIZ FORTIFICADO COM O INTERFERENTE
INT
AN
b
b
IUPACSELETIVIDADE
É INVESTIGADA ESTUDANDO A 
HABILIDADE DO MÉTODO EM MEDIR O 
ANALITO DE INTERESSE EM ALÍQUOTAS 
NAS QUAIS TENHAM SIDO INTRODUZIDOS 
DETERMINADOS INTERFERENTES 
PODE AVALIADA TAMBÉM ESTUDANDO SUA HABILIDADE 
EM MEDIR O ANALITO DE INTERESSE EM RELAÇÃO A 
OUTRO MÉTODO 
EURACHEM
ESPECIFICIDADE / SELETIVIDADE
É NORMALMENTE DEFINIDA 
ATRAVÉS DO ESTUDO DA 
LINEARIDADE E DEPENDE DA 
APLICAÇÃO DO MÉTODO
FAIXA DE TRABALHO
É ESTABELECIDA PELA CONFIRMAÇÃO DE QUE O 
PROCEDIMENTO ANALÍTICO LEVA A RESULTADOS 
COM LINEARIDADE, EXATIDÃO E PRECISÃO 
ACEITÁVEIS AO LONGO DA FAIXA SELECIONADA
ICH
USP
ANVISA
DEVE COBRIR A FAIXA DE APLICAÇÃO PARA A QUAL O 
ENSAIO VAI SER USADO E A CONCENTRAÇÃO MAIS 
ESPERADA DA AMOSTRA DEVE, SEMPRE QUE POSSÍVEL, 
SE SITUAR NO CENTRO DA FAIXA DE TRABALHO
FAIXA DE TRABALHO E FAIXA LINEAR
INMETRO
FAIXA DE TRABALHO
A FAIXA DE TRABALHO PODE SER 
UMA PARTE DA FAIXA PARA A QUAL A 
LINEARIDADE FOI VERIFICADA
IUPAC
FAIXA DE TRABALHO E LINEARIDADE
MÍNIMO DE 6 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
A RELAÇÃO RESPOSTA-CONCENTRAÇÃO 
NÃO TEM QUE SER PERFEITAMENTE 
LINEAR, PORÉM, DEVE SER 
REPRODUTÍVEL COM O TEMPO
EURACHEM
LINEARIDADE ICHUSP
UMA RELAÇÃO LINEAR DEVE SER AVALIADA AO 
LONGO DA FAIXA DE TRABALHO E DEMONSTRADA 
ATRAVÉS DE DILUIÇÕES DE UMA SOLUÇÃO MÃE 
PREPARADA COM O ANALITO DE INTERESSE OU 
DE SOLUÇÕES DESTE ANALITO EM DIFERENTES 
CONCENTRAÇÕES. É RECOMENDADO O USO DE, 
NO MÍNIMO, 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
ANVISA
LINEARIDADE
MÍNIMO DE 5 NÍVIES DE CONCENTRAÇÃO NA CURVA 
ANALÍTICA COM UM NÚMERO DE REPLICATAS POR 
NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO O MAIS PRÓXIMO POSSÍVEL 
DAQUELE EMPREGADO NA ROTINA DO LABORATÓRIO
INMETRO
LINEARIDADE
A CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA DEVE SER 
OBTIDA A PARTIR DE 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO, 
EQUIDISTANTEMENTE DISTRIBUÍDOS, COM PELO 
MENOS, 6 RÉPLICAS POR NÍVEL
TRÊS TIPOS DE CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA 
DEVEM SER ELABORADOS:
* PADRÕES DE CALIBRAÇÃO EM SOLUÇÃO
* MATRIZ BRANCA FORTIFICADA COM PADRÕES DE 
CALIBRAÇÃO
* EXTRATO DA MATRIZ BRANCA FORTIFICADO COM 
OS PADRÕES DE CALIBRAÇÃO
MAPA
AS MEDIDAS DEVEM SER FEITAS EM ORDEM 
ALEATÓRIA, ADOTANDO-SE OS DEVIDOS 
CUIDADOS PARA EVITAR CONTAMINAÇÃO 
CRUZADA
AS CURVAS DE CALIBRAÇÃO NÃO DEVEM 
SER FORÇADAS A PASSAR PELA ORIGEM
AVALIAR A HOMOCEDASTICIDADE
AS REPLICATAS DE CADA NÍVEL DE 
CONCENTRAÇÃO DEVEM SER 
INDEPENDENTES OU REPETIÇÕES GENUÍNAS, 
E NÃO SOMENTE REPETIÇÕES DAS LEITURAS
LINEARIDADE MAPA
CURVAS DE CALIBRAÇÃO
A CURVA DE CALIBRAÇÃO/RESPOSTA 
DEVE SER OBTIDA A PARTIR DE 5 NÍVEIS 
DE CONCENTRAÇÃO, INCLUINDO O ZERO
657
CALIBRAÇÃO E LINEARIDADE
A CURVA DEVE TER PELO MENOS 6 
NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
OS NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO DEVEM ESTAR 
IGUALMENTE ESPAÇADOSO INTERVALO DE INTERESSE
O INTERVALO DE CONCENTRAÇÃO DEVE SER ENTRE 0 
E 150% OU 50 E 150% DA CONCENTRAÇÃO MAIS 
PROVÁVEL DE SER ENCONTRADA
AS ANÁLISE PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO 
DEVEM SER REALIZADAS, PELO MENOS, EM 
DUPLICATA, PREFERENCIALMENTE EM TRIPLICATA 
OU MAIS, EM ORDEM ALEATÓRIA
IUPAC
ICH
DEVE SER ESTABELECIDA AO LONGO DA FAIXA DE 
TRABALHO, USANDO UM MÍNIMO DE 9 DETERMINAÇÕES
DE TAL FORMA QUE SEJAM AVALIADOS 3 NÍVEIS DE 
CONCENTRAÇÃO DIFERENTES
EXATIDÃO ANVISA
A USP AINDA INDICA QUE PARA DEMONSTRAR A 
EXATIDÃO, UM PADRÃO DE REFERÊNCIA PODE 
SER UTILIZADO
USP
RECUPERAÇÃO / TENDÊNCIA
OS PROCESSOS UTILIZADOS PARA AVALIAR A 
TENDÊNCIA DE UM MÉTODO SÃO, ENTRE OUTROS: 
USO DE MATERIAIS DE REFERÊNCIA CERTIFICADOS, 
PARTICIPAÇÃO EM COMPARAÇÕES 
INTERLABORATORIAIS E REALIZAÇÃO DE ENSAIOS 
DE RECUPERAÇÃO 
INMETRO
RECUPERAÇÃO
ANALISAR AS 6 RÉPLICAS DA MATRIZ BRANCA
FORTIFICADA COMOS PADRÕES DE CALIBRAÇÃO 
EM 5 NÍVEIS DE CONCENTRAÇÃO
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV EM CADA 
EXATIDÃO
DEVE SER FEITA ATRAVÉS DE ENSAIOS DE RECUPERAÇÃO
CASO NÃO HAJA MRC, A MATRIZ BRANCA FORTIFICADA 
DEVE SER UTILIZADA
MAPA
RECUPERAÇÃO
SELECIONAR 18 ALÍQUOTAS DE UM MATERIAL EM 
BRANCO E FORTIFICAR 3 GRUPOS EM 6 ALÍQUOTAS 
NAS CONCENTRAÇÕES …..
VERACIDADE
DEVE SER FEITA ATRAVÉS DE MRC. NA FALTA DESTE, EM 
VEZ DA VERACIDADE, A RECUPERAÇÃO PODE SER 
DETERMINADA
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV 
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO PRESENTE EM CADA 
AMOSTRA, ASSIM COMO A CONCENTRAÇÃO MÉDIA E O CV 
PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO
657
EXATIDÃO/RECUPERAÇÃO
CASO NÃO EXITA UM MRC, PODE SER UTILIZADO 
UM MATERIAL BEM CARACTERIZADO COMO 
REFERÊNCIA. OUTRQA ALTERNATIVA É USAR 
MATRIZES FORTIFICADAS
A MÉDIA DE UMA SÉRIE DE ANÁLISES COMPLETAS 
REALIZADAS COM MATERIAL DE REFERÊNCIA EM 
DIFERENTES CORRIDAS DEVEM SER AVALIADAS
UM MÉTODO REFERÊNCIA TAMBÉM PODE SER 
USADO PARA AVALIAR A EXATIDÃO DO MÉTODO 
QUE ESTÁ SENDO VALIDADO
IUPAC
RECUPERAÇÃO
6 REPLICATAS DE MATRIZES OU AMOSTRAS 
FORTIFICADAS 
EXATIDÃO
É ESTUDADA EM 2 COMPONENTES; RECUPERAÇÃO E 
PRECISÃO
EURACHEM
ICH
DEVE SER ESTABELECIDA AO LONGO DA FAIXA DE 
TRABALHO, USANDO UM MÍNIMO DE 9 DETERMINAÇÕES
DE TAL FORMA QUE SEJAM AVALIADOS 3 NÍVEIS DE 
CONCENTRAÇÃO DIFERENTES
REPETITIVIDADE OU 
PRECISÃO INTRA-CORRIDA
ANVISA
REPETITIVIDADE
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA
REPRODUTIBILIDADE
DEVEM SER AVALIADAS ATRAVÉS DE UM NÚMERO DE 
REPLICATAS DE UMA AMOSTRA HOMOGÊNEA
USP
PODE SER DETERMINADA POR MEIO DA ANÁLISE DE 
PADRÕES, MATERIAL DE REFERÊNCIA OU ADIÇÃO DO 
ANALITO A BRANCO DE AMOSTRA, EM VÁRIAS 
CONCENTRAÇÕES NA FAIXA DE TRABALHO
INMETRO
REPETITIVIDADE
REPETITIVIDADE 
PREPARAR E ANALISAR UM CONJUNTO DE AMOSTRAS COM 
MATRIZES IDÊNTICAS, FORTIFICADAS COM SUBSTÂNCIAS 
A ANALISAR DE MODO A OBTER CONCENTRAÇÕES 
EQUIVALENTES AS SEGUINTES...
PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO, A ANÁLISE 
DEVE SER REALIZADA EM, PELO MENOS, 6 
RÉPLICAS
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA, O DESVI 
PADRÃO E O CV
MAPA657
A FORMA MAIS ECONÔMICA DE AVALIAR A 
REPETITIVIDADE É A AVALIAÇÃO NOS LIMITES 
INFERIOR E SUPERIOR (OU PRÓXIMO A ELES) 
DA FAIXA DE TRABALHO
AS EXPERIÊNCIAS DESTE CRITÉRIO DEVEM PODER 
DEMONSTRAR QUE NÃO HÁ MUDANÇA NA PRECISÃO 
COM A MUDANÇA DE CONCENTRAÇÃO DO ANALITO
REPETITIVIDADE 
A ANÁLISES DEVEM SER FEITAS 
EM DUPLICATA VERDADEIRAS
IUPAC
REPETITIVIDADE
PODE SER DETERMINADAPOR MEIO DE MATERIAL DE 
REFERÊNCIA OU ADIÇÃO DO ANALITO A BRANCO DE 
AMOSTRA, EM VÁRIAS CONCENTRAÇÕES NA FAIXA DE 
TRABALHO
REALIZAR 10 REPLICATAS PARA 
CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO
CALCULAR A MÉDIA, O DESVIO 
PADRÃO E O LIMITE DE 
REPETITIVIDADE
EURACHEM
NORMALMENTE É AVALIADA SOBRE AS POSSÍVEIS 
FONTES DE VARIABILIDADE DO MÉTODO COMO POR 
EXEMPLO, EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS 
DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA
ICH
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA OU 
PRECISÃO INTER-CORRIDAS
OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS 
DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
RECOMENDA-SE UM MÍNIMO DE 2 DIAS 
DIFERENTES COM ANALISTAS 
DIFERENTES
ANVISA
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA
OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS 
DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
INMETRO
REPRODUTIBILIDADE 
INTRALABORATORIAL
PREPARAR E ANALISAR UM CONJUNTO DE AMOSTRAS COM 
MATRIZES IDÊNTICAS, FORTIFICADAS COM SUBSTÂNCIAS 
A ANALISAR DE MODO A OBTER CONCENTRAÇÕES 
EQUIVALENTES AS SEGUINTES...
PARA CADA NÍVEL DE CONCENTRAÇÃO, A 
ANÁLISE DEVE SER REALIZADA EM, PELO 
MENOS, 6 RÉPLICAS
MAPA
657
REPRODUTIBILIDADE 
INTRALABORATORIAL
CALCULAR A CONCENTRAÇÃO MÉDIA, O DESVIO 
PADRÃO E O CV
REPETIR ESTES PASSOS PELO MENOS MAIS 2 
VEZES, COM OPERADORES DIFERENTES, 
INSTRUMENTOS DIFERENTES, LOTES DIFERENTES 
DE REAGENTES, SOLVENTES, TEMPERATURA 
AMBIENTE DIFERENTE, ENTRE OUTRAS
MAPA
657
PRECISÃO ENTRE CORRIDAS 
A VARIAÇÃO DAS CONDIÇÕES ENTRE CORRIDAS 
DEVE REPRESENTAR A ROTINA DO LABORATÓRIO
IUPAC
A PRECISÃO PODE LEVAR AINDA EM 
CONSIDERAÇÃO A VARIAÇÃO ENTRE 
OPERADORES, DIAS E EQUIPAMENTOS
PRECISÃO INTERMEDIÁRIA - INTRALABORATORIAL
OBTIDA EM DIAS DIFERENTES, COM ANALISTAS 
DIFERENTES E EQUIPAMENTOS DIFERENTES
REALIZAR 10 REPLICATAS
CALCULAR A MÉDIA, O DESVIO PADRÃO 
E O LIMITE DE REPRODUTIBILIDADE
EURACHEM
REPRODUTIBILIDADE OU 
PRECISÃO INTER-LABORATORIAL
ANVISA
DEVE SER AVALIADA ATRAVÉS DE ENSAIOS DE 
PROFICIÊNCIA/COMPARAÇÕES INTERLABORATORIAIS
ICH
INMETRO
657
EURACHEM
ICH
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS. POR 
EXEMPLO, AVALIAÇÃO VISUAL, RELAÇÃO SINAL-RUÍDO OU 
NA CURVA ANALÍTICA
LIMITE DE DETECÇÃO
USPANVISA
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS 
LIMITE DE DETECÇÃO
DUAS FORMAS DE CÁLCULO SÃO PROPOSTAS
INMETRO
HÁ VÁRIOS MÉTODOS PARA A 
DETERMINAÇÃO DO LIMITE DE DETECÇÃO
LIMITE DE DETECÇÃO 
É RECOMENDADO QUE SEJAM REALZADAS ANÁLISES 
DE 6 AMOSTRAS DE BRANCO DE MATRIZ E O LIMITE 
DE DECISÃO SERÁ 3 VEZES O DESVIO PADRÃO
DESTAS ANÁLISES
IUPAC
ANÁLISE DE 10 BRANCOS DE MATRIZ
LIMITE DE DETECÇÃO
O LD É DETERMINADO COMO SENDO O VALOR MÉDIO DOS 
RESULTADOS DOS BRANCOS, ACRESCIDO DE 3 VEZES O 
DESVIO PADRÃO DAS ANÁLISES DOS BRANCOS
OUTROS MÉTODOS, COMO OS SUGERIDOS PELA IUPAC, 
PODEM SER MAIS ADEQUADOS EM ALGUNS CASOS
EURACHEM
OS CÁLCULOS DEVEM SER REALIZADOS, 
PREFERENCIALMENTE, UTILIZANDO OS 
PROCEDIMENTOS DA CURVA DE CALIBRAÇÃO 
MATRIZADA, DE ACORDO COM A SÉRIE DE 
NORMAS ISO 11843
LIMITE DE DECISÃO (CCαααα)
O LIMITE DE DECISÃO TAMBÉM PODE SER 
CALCULADA A PARTIR DE, PELO MENOS, 20 
MATERIAIS EM BRANCO POR MATRIZ
MAPA
657
ICH
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER EMPREGADAS. POR 
EXEMPLO, AVALIAÇÃO VISUAL, RELAÇÃO SINAL-RUÍDO 
OU NA CURVA ANALÍTICA
LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO
USP
INMETRO
VÁRIAS ABORDAGENS PODEM SER 
EMPREGADAS
LIMITE DE QUANTIFICAÇÃO OU 
LIMITE DE DETERMINAÇÃO
POR EXEMPLO,VISUALMENTE OU 5, 6 OU 10 VEZES 
O DESVIO PADRÃO DO BRANCO DA AMOSTRA
EURACHEM
LIMITE DE DETERMINAÇÃO (CCββββ)
OS CÁLCULOS DEVEM SER REALIZADOS, 
PREFERENCIALMENTE, UTILIZANDO OS PROCEDIMENTOS 
DA CURVA DE CALIBRAÇÃO MATRIZADA, DE ACORDO COM 
A SÉRIE DE NORMAS ISO 11843
O LIMITE DE DETERMINAÇÃO É 
DETERMINADO A PARTIR DO 
LIMITE DE DECISÃO
MAPA
657
USP
DEVE SER AVALIADA DURANTE A ETAPA DE 
DESENVOLVIMENTO DO MÉTODO E DEVE MOSTRAR A 
CONFIABILIDADE DO RESULTADO DAS ANÁLISES EM 
RELAÇÃO A MUDANÇAS DELIBERADAMENTE CAUSADAS 
NAS CONDIÇOES DAS VARIÁVEIS DO MÉTODO
ROBUSTEZ
ANVISAEURACHEM
ICH
INMETRO
PARA AVALIAR A ROBUSTEZ DE UM MÉTODO 
PODE-SE RECORRER AO TESTE DE YOUDEN
ROBUSTEZ
ROBUSTEZ
DEVEM SER AVALIADOS TODOS OS ASPECTOS DO 
MÉTODO QUE SÃO PROVÁVEIS DE INFLUENCIAR SEUS 
RESULTADOS
A ROBUSTEZ É TESTADA PELA INTRODUÇÃO DE 
PEQUENAS MS DELIBERADAS MODIFICAÇÕES NO 
MÉTODO 
É SUGERIDO O USO DE UM PLANEJAMENTO FATORIAL 
FRACIONÁRIO PARA ESTE FIM
ALGUMAS VARIAÇÕES POSSÍVEIS SÃO: MUDANÇAS DE 
EQUIPAMENTOS, OPERADORES, FORNECEDORES DE 
REAGENTES, CONCENTRAÇÃO DE REAGENTES, pH DA 
SOLUÇÃO, TEMPERATURA DA REAÇÃO, TEMPO DE 
REAÇÃO
IUPAC
ROBUSTEZ / APLICABILIDADE 
– PEQUENAS ALTERAÇÕES
ESTES ESTUDOS UTILIZAM A INTRODUÇÃO, 
DELIBERADA PELO PRÓPRIO LABORATÓRIO, 
DE PEQUENAS VARIAÇÕES RAZOÁVEIS E A 
OBSERVAÇÃO DE SUAS CONSEQÜÊNCIAS
DEVEM SER EFETUADOS ESTUDOS PRÉVIOS PARA A 
SELEÇÃO DE FATORES DO PRÉ-TRATAMENTO, DA LIMPEZA 
E DA ANÁLISE DA AMOSTRA, SUSCEPTÍVEIS DE 
INFLUENCIAREM OS RESULTADOS DA MEDIÇÃO. ESTES 
FATORES PODEM INCLUIR O ANALISTA, A FONTE, A IDADE 
DOS REAGENTES, SOLVENTES, PADRÕES E EXTRATOS DE 
AMOSTRA, A TAXA DE AQUECIMENTO, TEMPERATURA, 
pH, ENTRE OUTROS
657
ROBUSTEZ - GRANDES ALTERAÇÕES
O MÉTODO ANALÍTICO DEVE SER TESTADO EM 
DIFERENTES CONDIÇÕES EXPERIMENTAIS QUE 
INCLUEM, POR EXEMPLO, ESPÉCIES DIFERENTES, 
MATRIZES DIFERENTES OU CONDIÇÕES DE 
AMOSTRAGEM DIFERENTES
A IMPORTÂNCIA DESTAS ALTERAÇÕES PODE 
SER AVALIADA, POR EXEMPLO, UTILIZANDO A 
ABORDAGEM DE YOUDEN
657
DEVEM SER AVALIADAS A ESTABILIDADE:
ESTABILIDADE
1. DO ANALITO NA MATRIZ BIOLÓGICA
ESTABILIDADE DE LONGA DURAÇÃO
AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM 
TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES
COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES 
OBTIDOS DA ANÁLISE DAS AMOSTRAS RECÉM 
PREPARADAS
OS INTERVALOS DE TEMPO ENTRE AS 
AMOSTRAS DEVEM SER EQUIDISTANTES
MAPA
APÓS CICLOS DE CONGELAMENTO E DESCONGELAMENTO
AS AMOSTRAS DEVEM SER MANTIDAS CONGELADAS 
POR 24h E ENTÃO SUBMETIDAS AO DESCONGELAMENTO À 
TEMPERATURA AMBIENTE
RECONGELAR AS AMOSTRAS E DESCONGELÁ-LAS EM 
OUTRAS 24h. REPETIR O PROCEDIMENTO POR 3 CICLOS, 
QUANTIFICANDO-SE O ANALITO APÓS O TERCEIRO CICLO
AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM 
TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES
COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES OBTIDOS 
DA ANÁLISE DAS AMOSTRAS RECÉM PREPARADAS
MAPAESTABILIDADE
2. DO PÓS-PROCESSAMENTO
DEVE SER ANALISADA SEMPRE QUE O EXTRATO NÃO 
FOR ANALISADO IMEDIATAMENTE
AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM 
TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES
COMPARAR OS RESULTADOS COM AQUELES OBTIDOS 
DA ANÁLISE IMEDIATA DOS EXTRATOS RECÉM 
OBTIDOS
OS INTERVALOS DE TEMPO ENTRE AS AMOSTRAS 
DEVEM SER EQUIDISTANTES
MAPAESTABILIDADE
3. DAS SOLUÇÕES PADRÃO
DEVE COMEÇAR A SER ESTABELECIDA À 
TEMPERATURA AMBIENTE DO LABORATÓRIO, 
APÓS 6h DEPOIS DO PREPARO
AS AMOSTRAS DEVEM SER ANALISADAS EM 
TRIPLICATAS, EM DUAS CONCENTRAÇÕES
MAPAESTABILIDADE
DEVEM SER AVALIADAS A ESTABILIDADE:
1. DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR EM SOLUÇÃO
PREPARAR UMA SOLUÇÃO MÃE DA SUBSTÂNCIA A 
ANALISAR E DILUIR DE MODO A PREPARAR 
ALÍQUOTAS SUFICIENTES DE CADA CONCENTRAÇÃO 
SELECIONADA
REALIZAR AS ANÁLISES
657ESTABILIDADE
657ESTABILIDADE
2. DA SUBSTÂNCIA A ANALISAR NA MATRIZ
DEVEM SER UTILIZADOS, PREFERENCIALMENTE, 
AMOSTRAS REAIS
ANALISAR AMOSTRAS REAIS APÓS 1, 2, 4 E 20 
SEMANAS
EM AMOSTRAS DE BRANCO FORTIFICADAS PODEM 
SUBSTITUIR S AMOSTRAS REAIS, CASO ESTAS NÃO 
ESTEJAM DISPONÍVEIS
CÁLCULOS E 
TESTES 
ESTATÍSTICOS
DE UMA FORMA GERAL AS NORMAS, GUIAS E 
DIRETRIZES NÃO FORNECEM MUITA 
INFORMAÇÃO SOBRE QUAIS E COMO APLICAR 
TESTES ESTATÍSTICOS PARA OS DIVERSOS 
CRITÉRIOS DE DESEMPENHO
EXCETO O DOCUMENTO DO MAPA QUE 
DESCREVE EM DETALHES O QUE E COMO 
FAZER OS CÁLCULOS E IMPLEMENTAR OS 
TESTES ESTATÍSTICOS
QUE NORMA/ 
GUIA/ DIRETRIZ 
SEGUIR ????
PARA SELECIONAR A FORMA 
COMO A VALIDAÇÃO DEVERÁ 
SER EXECUTADA, É 
NECESSÁRIO
VERIFICAR SE ALGUMA 
NORMA/DIRETRIZ OU 
GUIA DEVE SER 
SEGUIDO
EM CASO AFIRMATIVO, SEGUIR AS 
ORIENTAÇÕES DO MESMO
CASO CONTRÁRIO,SEGUIR AS 
RECOMENDAÇÕES DE UM 
DOCUMENTO REFERÊNCIA, COMO 
OS CITADOS NESTA APRESENTAÇÃO
O GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA 
ANALÍTICA DA ANVISA COMENTA:
“... NÃO EXISTE UM ACORDO UNÂNIME SOBRE 
A INTERPRETAÇÃO DE ALGUNS DOS TERMOS 
NEM SOBRE AS CONVENÇÕES USADAS NA SUA 
DETERMINAÇÃO. ASSIM, AO MENCIONAR 
DADOS DE VALIDAÇÃO, É RECOMENDÁVEL 
MENCIONAR QUAISQUER CONVENÇÕES 
ADOTADAS.”
ABNT NBR ISO/IEC 17025 : 2005
VALIDAÇÃO DE MÉTODO (5.4.5.3)
NOTA 3
“A VALIDAÇÃO É UM EQUILÍBRIO ENTRE 
CUSTOS, RISCOS E POSSIBILIDADES 
TÉCNICAS. ”
BOM SENSO
REFERÊNCIAS
1. SWARTZ, M.E.; KULL, I.; CHROATOGRAPHY ONLINE.COM; THE
2. INTERNATIONAL CONFERENCE ON HARMONISATION OF TECHNICAL
VALIDATION OF ANALYTICAL PROCEDURES: TEXT AND 
METHODOLOGY - Q2(R1)
3. NORMA NBR ISSO 9000:2000 - 2005
SISTEMAS DE GESTÃO DA QUALIDADE – FUNDAMENTOS E
VOCABULÁRIO
4. U.S. PHARCOPOEIA (USP) 32 : 2008
VALIDAÇÃO – CAPÍTULO 1225
REQUIREMENTS FOR REGISTRATION OF PHAMACEUTICALS FOR 
HUMAN USE (ICH) : 2005
WEBSITE OF LC/GC NORTH AMERICA; VALIDATION,
QUALIFICATION OR VERIFICATION?; OUT/2005
5. INTERNATIONAL UNION OF PURE AND APPLIED CHEMISTRY
HARMONIZED GUIDELINES FOR SINGLE LABORATORY 
VALIDATION OF METHODS OF ANALYSIS
6. DECISÃO DA COMISSÃO – DIRETIVA 96/23/CE : 2002 (657)
DESEMPENHO DE MÉTODOS ANALÍTICOS E INTERPRETAÇÃO 
DE RESULTADOS
7. INSTITUTO NACIONAL DE METROLOGIA, NORMALIZAÇÃO
ORIENTAÇÃO SOBRE VALIDAÇÃO DE MÉTODOS ANALÍTICOS –
DOQ-GCRE-008 : 2008
8. GUIA PARA VALIDAÇÃO DE MÉTODOS DE ANALÍTICOS E CONTROLE
MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO 
(MAPA)
(IUPAC) : 2002
E QUALIDADE INDUSTRIAL (INMETRO)
DE QUALIDADE INTERNA DAS ANÁLISES DE MONITORAMENTO 
DO PLANO NACIONAL DE RESÍDUOS E CONTAMINANTES –
PNCRC ANIMAL : 2008
10. VIM : 2008
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA
11. ISO/IEC 17025 : 2005
VOCABULÁRIO INTERNACIONAL DE METROLOGIA
12. PRACTICAL METHOD VALIDATION: VALIDATION SUFFICIENT
13. GUIA PARA A QUALIDADE EM QUÍMICA ANALÍTICA. UMA
FOR AN ANAYSIS METHOD, P. Bruce et al., MIKROCHIMICA
ACTA, 128(1998)93-106
ASSISTÊNCIA À HABILITAÇÃO. SÉRIES TEMÁTICAS 1 –
LABORATÓRIO - ANVISA: 2005