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DOSEAMENTO DE VITAMINA C - 2019 
 
A vitamina C ou ácido ascórbico encontra-se amplamente difundida na natureza, tanto no reino animal como no reino 
vegetal. 
 Nos animais é encontrada principalmente nos órgãos de grande atividade metabólica como fígado e glândulas endócrinas. 
No leite humano pode aparecer 75 mg/L e no de vaca 22 mg/L. 
 Nos vegetais, aparece em todas as células vivas com destaque para folhas e flores, onde há grande atividade de crescimento. 
São fontes de vitamina C: os vegetais folhosos, ervilhas, frutas cítricas, goiaba, caju (20-150 mg/100g). 
 No homem as necessidades diárias mínimas de vitamina C são: crianças, 30 mg (menores de 1 ano de idade) até 80 mg 
(adolescência); adultos, 75 mg; grávidas, 100 mg; lactantes, 150 mg. 
 A carência de vitamina C no homem somente é diagnosticada prontamente no caso de escorbuto avançado, o que é raro. 
Normalmente ocorre uma deficiência relativa, subclínica. 
 Para extrair ácido ascórbico ou vitamina C das plantas e tecidos animais utiliza-se o ácido metafosfórico em solução. Este 
ácido além de extrair o ácido ascórbico, precipita as proteínas, portanto as enzimas que oxidam o ácido ascórbico. 
 
PRINCÍPIO DO MÉTODO 
 Para se detectar a presença de vitamina C usa-se o 2,6-dicloro-fenol-indofenol que é um corante que em soluções ácidas 
apresenta coloração levemente rosa (quase incolor) e em soluções neutras apresenta-se azul. 
 O ácido ascórbico se oxida facilmente em presença de luz e do ar, perdendo suas propriedades vitamínicas. Em presença 
do indicador 2,6-dicloro-fenol-indofenol também ocorre uma reação de óxido-redução. O ácido ascórbico perde dois hidrogênios 
que são transferidos ao indicador: 
 
 
 
Figura 1. Estrutura do ácido L-ascórbico (Vitamina) e a reação de oxidação com 2,6-dicloro-fenol-indofenol que o converte em 
Ácido l-deidroascórbico. O conjunto ácido ascórbico-ácido deidroascórbico constitui um par redox. Por esta razão o 2,6-dicloro-
fenol-indofenol pode ser utilizado como indicador de vitamina C em uma solução. 
 
 
OBJETIVOS 
Dosagem de vitamina C (suco de fruta, pastilhas de vitamina C, etc.). 
 Titulometria através da reação de óxido-redução. 
 
 
MATERIAIS 
Faca, algodão, 1 suporte para bureta com garra, 1 funil, 1 proveta de 50 mL, 2 buretas de 25 mL, 2 bequers de 50 mL, 3 
erlenmeyers de 125 mL, pipeta automática de 1 mL, ponteira de 1 mL, 1 pipeta de vidro de 10 mL, 1 pró-pipeta, fita crepe, solução 
padrão de ácido ascórbico 0,1%, solução de ácido metafosfórico 5%, solução de 2,6-dicloro-fenol-indofenol 0,01%, frutas cítricas 
(laranja e limão), suco de laranja, limão e acerola industrializados, pastilha de vitamina C (Observação: produtos com muito 
corantes podem atrapalhar a visualização da transição de cores do azul para rosa/incolor durante a Titulometria). Equipamento 
de Proteção Individual (EPI): Luvas de borracha nitrílico ou de PVC, Máscara, Óculos de segurança com proteção lateral e Avental. 
Pipeta automática para medir amostras e reagentes. Ponteiras. Papel higiênico macio. Piceta com água deionizada. 
 
PROCEDIMENTOS 
a) Lavar a fruta, cortar com uma faca limpa, espremer o suco filtrando-o em algodão dentro do funil apoiado sobre um erlenmeyer 
pequeno; 
 
b) Pipetar 3 mL (utilizar pipeta automática) do suco filtrado, transferindo a um béquer e adicionar 27 mL com ácido metafosfórico 
a 5%, medidos em proveta; 
 
c) Em outro béquer, pipetar 2 mL de solução-padrão de ácido ascórbico 0,1% e adicionar 18 mL de ácido metafosfórico a 5%, 
medidos em proveta; 
 
d) Tomar 2 erlenmeyers e colocar em cada um 10 mL (utilizar pipeta de vidro e pró-pipeta) de solução de 2,6-dicloro-fenol-
indofenol; 
 
 
 
e) Ajustar a bureta no suporte universal, verificar se a torneira está fechada, encher a bureta com a solução padrão de ácido 
ascórbico, colocar o béquer da solução padrão e colocar sob a torneira, abrir a torneira para tirar bolhas de ar na ponta, devolver 
o volume da solução padrão do béquer, anotar o volume na bureta; 
 
 
 
Figura 2. Titulação da solução padrão de ácido ascórbico e da amostra. 
 
f) Titular o erlenmeyer n 1 com a solução-padrão diluída de ácido ascórbico colocada em bureta; 
Gotejar vagarosamente a solução contendo o suco ou o padrão observando a virada de cor de azul para incolor; 
Cuidado, pois o corante ou a cor do suco pode mascarar a alteração de cor!!!!! 
 
g) Titular o erlenmeyer n 2 com solução-problema diluída colocada em outra bureta. Repetir as mesmas etapas do item “e” e “f”; 
 
h) Anotar o que se gastou do padrão e da amostra-problema (Volume inicial – Volume Final) para que o indicador ficasse 
incolor. 
 
CÁLCULO 
Sabendo-se que a concentração da solução-padrão de ácido ascórbico é 0,1%, isto é, 100 mg/100 mL, pode-se calcular a 
quantidade de ácido ascórbico na solução-problema (suco). Suponhamos, como exemplo, que foram utilizados 3,0 mL da solução-
padrão e 4,6 mL da solução-problema para virar o indicador. 
 
 0,1% .......................3,0 
 C’..........................4,6 
 
 Como são grandezas inversamente proporcionais (volume e concentração), inverte-se um dos termos. 
 
 C’...........................3,0 
 0,1% ........................4,6 
 
 C’ = 0,1 x 3,0 
 4,6 
 C’ = 0,065% 
 
 
 Portanto, a concentração de vitamina C no suco da fruta é de 0,065%. 
 
EXERCÍCIO 
1º Converta o resultado em mg/mL; 
2º Calcular em U.I. (Unidade Internacional) de vitamina C, sabendo-se que 1 U.I. equivale a 0,05 mg de ácido ascórbico. 
 
QUESTÃO: Qual a importância da vitamina C na saúde oral? Qual a função bioquímica da vitamina C? 
 
REFERÊNCIAS 
1. HARVEY, R.A.; FERRIER, D.R. Bioquímica Ilustrada, 5ª ed., Artmed, 2012. 
2. CARDOSO, M. A. Nutrição e Metabolismo: Nutrição Humanda, 1ª ed., Guanabara Koogan, 2006. 
3. GIBNEY, M. J. Nutrição Clínica, 2005, 1ª ed., Guanabara Koogan, 2005.