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As etapas Essenciais da Fitoquímica Profª. Dra. Luana Martins de Andrade da Cruz Doutorado em Biotecnologia pela Universidade Federal de São Carlos (UfsCar). Mestre em Biotecnologia pela Universidade Federal de São Carlos (UfsCar). Graduação em Zootecnia pela Universidade Estadual de São Paulo - UNESP, Campus Jaboticabal. Profa. Dra. Luana Martins de Andrade da Cruz Pós-Doutorado Empresarial na Verdartis Desenvolvimento Biotecnológico, VERDARTIS, Ribeirão Preto. Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico As Etapas Essenciais da Fitoquímica A Fitoquímica é a ciência que estuda os constituintes químicos dos vegetais desde a estrutura química molecular até as propriedades biológicas dos vegetais. Análises dos componentes químicos das plantas: ● preservação; ● uso sustentável; ● benefícios à saúde humana. As Etapas Essenciais da Fitoquímica ● Estes constituintes químicos também chamados de princípios ativos são os metabólitos secundários, os quais fazem parte do metabolismo dos vegetais. ● Os metabólitos secundários são compostos orgânicos produzidos pela célula vegetal como derivação do metabolismo primário. É importante para a sobrevivência, reprodução e dispersão da planta. Além disso, possuem a capacidade de proteção contra os raios UV, atração de polinizadores e dispersores de sementes, ação contra herbívoros, comunicação entre plantas, entre outras. As Etapas Essenciais da Fitoquímica Para chegar nesses compostos ativos, existem etapas essenciais. Fonte: Filho & Yunes (1997) ● A obtenção da planta é feita através de estudos bibliográficos e levantamentos etnobotânicos. As Etapas Essenciais da Fitoquímica Etapas para identificação de substâncias ou classes de substâncias Preparo do extrato: coleta, secagem, moagem, extração, concentração e secagem do líquido extrator. • Secagem da amostra (que impede a hidrólise e contaminação e pode ser feito em estufas ou no ambiente ao sol, sombra ou misto, porém na estufa é o método mais utilizado e eficaz). • Maior estabilização pela ação do calor ou desidratantes, como o etanol. • Moagem - reduzir mecanicamente, o material vegetal a fragmentos de pequenas dimensões, preparando o material para extração. Extração exaustiva: indicada para substâncias ativas que estão presentes em pequenas quantidades ou são pouco solúveis. Concentração: Eliminar parcialmente o líquido extrator. Secagem: Eliminação da fase líquida até valores residuais. São utilizados rotaevaporadores, que são capazes de diminuir a temperatura de ebulição do líquido a ser eliminado, facilitando a sua remoção As Etapas Essenciais da Fitoquímica Prospecção Fitoquímica ● A prospecção pode ser realizada por testes de reações químicas ou por métodos cromatográficos. ● A escolha dos métodos depende da complexidade e dos valores (recurso disponível), pois os testes de reações químicas têm um custo mais baixo do que os métodos cromatográficos, por exemplo. Leva-se em consideração também, os objetivos a se atingir. As vezes há a necessidade de usar os dois métodos. A prospecção pode ser realizada por testes de reações químicas ou por métodos cromatográficos. Os métodos cromatográficos mais comumente usados são: ● cromatografia de adsorção em coluna; ● cromatografia de partição; ● cromatografia de exclusão molecular; ● cromatografia em camada delgada; ● cromatografia gasosa (CG); ● cromatografia líquida (CL); ● cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Prospecção Fitoquímica Testes com reações químicas ● Coloração; ● Precipitação em tubos de ensaios; ● Placas de toques. Os testes por reações químicas têm por base a reação química entre os compostos esperados nos extratos vegetais e regentes detectores. Esses reagentes detectores podem precipitar proteínas, mudar de coloração ou formar espumas. Por exemplo, para o metabólito secundário Alcaloides, usa- se reações de precipitação, para Flavonoides usa-se o teste de Cianidina. Os por reações químicas são rápidos, de baixo custo e tem relevância por possibilitar traçar o perfil químico do vegetal. Se a prospecção fitoquímica mostrar que uma determinada planta apresenta atividade farmacológica, ocorre então o isolamento dos compostos por fracionamento cromatográfico, em seguida é feita uma elucidação da estrutura molecular de todos os constituintes isolados. São utilizadas técnicas como espectro de absorção no ultravioleta, no infravermelho, espectrometria de massa, espectrometria de ressonância magnética nuclear entre outros. Há estudos envolvendo manipulação molecular ou modificação molecular, os quais otimizam um composto biologicamente ativo, por exemplo, introduzir grupos que conferem ao composto uma maior ou menor hidrofobicidade ou doadores e/ou aceptores de elétrons, entre outros. As Etapas Essenciais da Fitoquímica Quando selecionado as substâncias puras ativas é realizado análises de ação biológica como: ❖ Atividade antifúngica e antibacteriana; ❖ Atividade analgésica; ❖ Atividade antiinflamatória; ❖ Atividade antialérgica; ❖ Atividade antitumoral. Detecção do efeito específico da espécie medicinal testada
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