TEMPLATE - AULAS PRÁTICAS 2

Prévia do material em texto

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD
	
AULA: 2 
	
	
	DATA:
18/12/2021
VERSÃO:01
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA – aula 2
DADOS DO(A) ALUNO(A):
	NOME: Giovanna Maria Santos Sá
	MATRÍCULA: 01442012
	CURSO: Farmácia
	POLO: Barras-pí
	PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Maria Clara Pestana Costa
	TEMA DE AULA: CONTAGEM DE LEVEDURAS POR DILUIÇÃO SERIADA
RELATÓRIO:
1. Definir o método de contagem de leveduras em placa por diluição seriada; 
A contagem de microrganismos em placas de petri com meios de cultura é um dos métodos mais utilizados em laboratórios, e ajuda a determinar o verdadeiro tamanho de uma população de bactérias. A principal vantagem de utilizar essa técnica está na possibilidade de quantificar a exata quantidade de células vivas presentes. São necessárias 24 horas para que as colônias visíveis apareçam de maneira clara nas placas utilizadas. Esse período é considerado relativamente longo, impedindo que a técnica seja utilizada em áreas que demandam maior agilidade como controle de qualidade de alimentos, que muitas vezes não podem esperar tanto por tipo de análise. 
Os materiais necessários para realizar a contagem são:
- Tubos de ensaio (5)
- Água peptonada
- A bactéria 
- Alça de platina 
- Lamparina 
- Alça de vidro
- Pipeta 
- Pera de borracha
- Proveta
Diluição: 
- Para realizar a diluição iremos colocar 10 ml da água peptonada em 1 tubo e 9 ml nos outros tubos.
- Liga o fogo para manter o campo estéril 
- Utilizar uma proveta para medir 10ml para colocar no primeiro tubo, e 9 ml nos demais tubos.
- Com a alça flambada, pegar com a alça de platina a bactéria próximo ao fogo.
- Sem tocar nas paredes do tubo, dissolva a bactéria, após a diluição a alça deverá ser flambada para descontaminar.
- Após a bactéria ter sido dissolvida no tubo 1, ela já estará presente nele podendo ver a água turva diferenciando-se no tubo 2.
- A diluição será distribuída, feita com o auxílio da pipeta e da pera de borracha. Transportando: 
1ml do tubo 1 para o tubo 2
1 ml do tubo 2 para o tubo 3 
1ml do tubo 3 para o tubo 4 
1ml do tubo 4 para o tubo 5
- Após ser diluído os 5 tubos, pegar 0,5ml da última diluição no caso o tubo 5, para plaquear numa placa de petri que tem um meio de cultura, jogar líquido na placa.
- Utilizando uma alça de vidro, ela deverá ser flambada esperar esfriar para espalhar. Espalhar até o líquido secar.
- Depois que secar tampar e pôr na estufa de cabeça para baixo, para que ela cresça, ficar de 24 à 48 horas em 37º graus. 
2. Calcular a UFC/g ou mL da amostra estudada.
UFC= Número de colônia na placa x Diluição Alíquota Semeada
UFG/g = Nº de colônia x Diluição (10 elevado a 6) Alíquota (0,1ml)
Exemplo: UFG/g = 13 x10⁶ = 1,3. 10⁶ 0,1
	TEMA DE AULA: COLORAÇÃO DE GRAM
RELATÓRIO:
1. Definir o fundamento da coloração de Gram;
O método consiste em tratar sucessivamente um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. As bactérias que adquirem coloração azul violeta são chamados de Gram-positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelha são chamadas de Gram-negativas. 
- Observamos o crescimento bacteriano na nossa placa
- Com a alça de platina depositamos o material na lâmina com movimentos circulares.
- Fixamos o esfregaço na lâmina com a lamparina.
- Cobrimos a lâmina com coral violeta, deixamos agir por 1 minuto.
- Tiramos o excesso do corante com um fio de água.
- Cobrimos a lâmina com lugol e deixamos por mais 1 minuto.
- Lavamos a lâmina com um fio de água para retirar o excesso.
- Cobrimos com descolorante por 30 segundos e lavamos logo em seguida.
- Cobrimos a lâmina com corante fucsina de deixamos por 30 segundos 
- Lavamos e secamos a lâmina, cobrimos o esfregaço com uma lâmina e pingamos 1 gota de óleo de imersão. 
- Usamos o microscópio 10x e 100x 
2. Visualizar a morfologia e classificar as bactérias nas lâminas de acordo com o seu comportamento diante dos corantes de Gram. 
Morfologicamente, as bactérias são caracterizadas quanto ao tamanho, forma (nesta, subdividindo-se em cocos, Bacilos, Espirilos e curvos) a divisão que existe de grupos bacterianos, através da estrutura da membrana celular.
Bactérias Gram positivas, apresentam camada espessa de peptídeo glicano.
Ex: Staphylococcus aures, clostridius tetani e streptococcus pmneumoniae.
Bactérias Gram negativas, apresentam uma camada delgada de peptídeo glicano 
no entanto apresentam dupla membrana celular.
Ex: Escherichia coli, pseudonomas aeruginosas e víbrio colerae. 
.
Fontes:
https://www.prolab.com.br/blog/curiosidades/veja-o-metodo-de-contagem-de-microrganismos-em-placas/
http://www.provida.ind.br/site/index.php/bacterias/bacterias/122-tecnica-de-gram.html