ANÁLISES CLÍNICAS III

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ATIVIDADE PRÁTICA SUPERVISIONADA 
ANÁLISES CLÍNICAS III 
 
Texto introdutório: Citometria de fluxo é uma tecnologia capaz de analisar simultaneamente 
diversos parâmetros de células ou partículas em suspensão. Seu princípio está na incidência de 
uma fonte de luz laser que intercepta cada partícula. A dispersão da luz fornece dados 
relativos ao tamanho e à granularidade da partícula. Moléculas ou estruturas de interesse 
podem ser estudadas por marcação com fluoro cromos ou anticorpos monoclonais acoplados 
a fluoro cromos. 
 
Fonte: http://www.icb.usp.br/~imunoicb/?page_id=295 
 
ATIVIDADE 1: O aluno deverá assistir um vídeo, disponibilizado no link: 
https://www.youtube.com/watch?v=EQXPJ7eeesQ 
 
ATIVIDADE 2: O aluno deverá fazer a leitura do artigo: “Papel da imunofenotipagem por 
citometria de fluxo no diagnóstico diferencial das pancitopenias e das linfocitoses”, 
disponibilizado no link: http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n5/aop8109.pdf 
 
ATIVIDADE 3: O aluno deverá responder as questões: 
1. Qual o princípio da técnica de citometria de fluxo? 
Resposta: A citometria de fluxo é uma técnica usada para analisar células em suspensão e 
permite a medição simultânea de múltiplos parâmetros em milhares de células individuais em 
tempo real. O princípio básico da citometria de fluxo é a suspensão de células individuais em 
uma corrente fluida fina que flui através de um feixe de laser. À medida que as células passam 
pelo feixe de laser, elas interagem com o feixe de laser e espalham a luz em ângulos 
diferentes. Esta luz dispersa é coletada por lentes e convertida em sinais elétricos que são 
processados e analisados por um computador para gerar informações quantitativas e 
qualitativas sobre as células em questão. 
 
2. Quais são as vantagens de se utilizar a técnica de citometria de fluxo comparada aos 
outros métodos de análise? 
Resposta: A citometria de fluxo oferece várias vantagens em comparação a outros métodos de 
análise celular, incluindo: 
1. Análise de células individuais: A citometria de fluxo permite a análise de células 
individuais em suspensão, o que significa que as células não precisam ser cultivadas 
em placas ou lâminas, evitando interferências de substrato, e permitindo a análise de 
amostras heterogêneas, com diferentes tipos de células. 
2. Multiplexação: A citometria de fluxo permite a medição simultânea de múltiplos 
parâmetros em uma única célula, como tamanho, morfologia, expressão de proteínas, 
etc. Essa capacidade de multiplexação permite uma análise mais abrangente e 
detalhada das características celulares. 
3. Alta sensibilidade: A citometria de fluxo é altamente sensível, permitindo a detecção 
de eventos raros, como células tumorais em amostras de sangue periférico. Isso torna 
a técnica muito útil para análise de amostras clínicas. 
4. Velocidade: A citometria de fluxo é uma técnica de análise de alta velocidade, capaz 
de analisar milhares de células por segundo. Isso permite uma análise rápida de 
grandes volumes de amostras, economizando tempo e aumentando a eficiência da 
análise. 
5. Flexibilidade: A citometria de fluxo é uma técnica muito flexível, permitindo a 
utilização de diferentes corantes fluorescentes e a análise de diferentes tipos de 
amostras, como células de tecidos, fluidos corporais, microrganismos, etc. 
 
3. O que podemos analisar através da citometria de fluxo? 
Resposta: A citometria de fluxo é uma técnica versátil e poderosa que permite a análise de 
diversas características celulares e moleculares. Algumas das análises mais comuns realizadas 
pela citometria de fluxo incluem: 
1. Identificação de células: A citometria de fluxo pode ser usada para identificar 
diferentes tipos de células em uma amostra, com base na expressão de proteínas 
específicas. 
2. Quantificação de células: A citometria de fluxo pode ser usada para contar o número 
de células em uma amostra. 
3. Análise de tamanho e morfologia celular: A citometria de fluxo pode ser usada para 
medir o tamanho e a forma das células, bem como para avaliar a heterogeneidade da 
população celular. 
4. Análise de viabilidade celular: A citometria de fluxo pode ser usada para determinar 
se as células estão vivas ou mortas, com base na integridade da membrana celular. 
5. Análise de ciclo celular: A citometria de fluxo pode ser usada para analisar o ciclo 
celular, medindo a quantidade de DNA nas células. 
6. Análise de apoptose: A citometria de fluxo pode ser usada para detectar a apoptose, 
uma forma de morte celular programada. 
7. Análise de autofluorescência: A citometria de fluxo pode ser usada para avaliar a 
autofluorescência de células ou tecidos, que pode ser útil na detecção de doenças. 
8. Análise de expressão de proteínas: A citometria de fluxo pode ser usada para 
quantificar a expressão de proteínas em células individuais ou em populações 
celulares. 
9. Análise de sinalização celular: A citometria de fluxo pode ser usada para monitorar a 
sinalização celular em resposta a diferentes estímulos. 
 
4. Qual a relação entre citometria de fluxo e imunofenotipagem? 
Resposta: A citometria de fluxo e a imunofenotipagem são conceitos intimamente 
relacionados. A imunofenotipagem é uma técnica que utiliza a citometria de fluxo para 
identificar e quantificar diferentes tipos de células em uma amostra, com base na expressão de 
proteínas específicas na superfície celular. 
 
5. O que significa a sigla “CD” muito utilizada em imunofenotipagem? 
Resposta: A sigla "CD" é uma abreviação de "cluster de diferenciação" (em inglês, "cluster of 
differentiation"), e é frequentemente utilizada em imunofenotipagem para se referir a 
proteínas específicas na superfície celular. Os CD são moléculas antigênicas presentes na 
superfície de diferentes tipos de células, incluindo células do sistema imunológico, e são 
usados como marcadores para identificar e quantificar diferentes tipos de células em uma 
amostra. 
 
6. Qual a importância da citometria de fluxo no diagnóstico das doenças 
hematopatológicas? 
Resposta: A citometria de fluxo é uma técnica importante no diagnóstico e na classificação das 
doenças hematopatológicas, permitindo a identificação e a quantificação de diferentes tipos 
de células sanguíneas com base em sua expressão de proteínas específicas na superfície 
celular. A análise por citometria de fluxo pode auxiliar na escolha do tratamento mais 
adequado para cada paciente, melhorando a qualidade de vida e a sobrevida dos pacientes 
com doenças hematopatológicas. 
 
ATIVIDADE 4: Participar de dois (2) cursos disponibilizados no TELELAB, um programa de 
educação continuada, do Ministério da Saúde, que disponibiliza cursos gratuitos, para 
profissionais da área da saúde. O aluno deverá realizar dois cursos de interesse da disciplina. 
Ao completar o curso, o aluno deverá fazer uma avaliação, composta por 10 questões de 
múltipla escolha. Caso sua nota seja igual ou superior a 7, o estudante receberá um certificado 
de participação disponibilizado somente em formato digital, pelo próprio provedor do curso. 
Curso 1: Doença Falciforme 
Curso 2: Diagnósticos de Hepatites Virais 
 
1. Para selecionar o curso de interesse, acessar: http://telelab.aids.gov.br/index.php/cursos 
2. Para cadastramento no curso de interesse: http://telelab.aids.gov.br/index.php/cadastro