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Nome: Giulia Oliveira Simplicio RA: 2462420 Professor: Archangelo Fernandes Atividade Prática Supervisionada – Análises Clínicas III Texto introdutório: Citometria de fluxo é uma tecnologia capaz de analisar simultaneamente diversos parâmetros de células ou partículas em suspensão. Seu princípio está na incidência de uma fonte de luz laser que intercepta cada partícula. A dispersão da luz fornece dados relativos ao tamanho e à granularidade da partícula. Moléculas ou estruturas de interesse podem ser estudadas por marcação com fluorocromos ou anticorpos monoclonais acoplados a fluorocromos. Fonte: http://www.icb.usp.br/~imunoicb/?page_id=295 ATIVIDADE 1: O aluno deverá assistir um vídeo, disponibilizado no link: https://www.youtube.com/watch?v=EQXPJ7eeesQ ATIVIDADE 2: O aluno deverá fazer a leitura do artigo: “ Papel da imunofenotipagem por citômetria de fluxo no diagnóstico diferencial das pancitopenias e das linfocitoses”, disponibilizado no link: http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n5/aop8109.pdf ATIVIDADE 3: O aluno deverá responder as questões: 1. Qual o princípio da técnica de citômetria de fluxo? Um citômetro de fluxo contém vários componentes principais: incluindo a amostra, fluídos que vão ajudar a mover a amostra para o citômetro de fluxo, lasers ópticos que captam a luz, detectores que irão detectar a entrada de luz e um sistema de computador para emitir os dados em um formulário que podem ser analisados por pesquisadores. A medida que as células vão passando pelo laser individualmente , o mesmo espalhará em várias direções, o citômetro de fluxo irá captar essa luz de maneira direta (dispersão direta) , a luz espalhada de forma lateral (dispersão lateral) irá analisar o formato e a complexidade interna da célula , a quantidade de luz espalhada para frente de cada célula , cada uma delas é detectada pelo detector do outro lado da célula. O princípio da técnica é medir a entrada de luz pelo laser e detectores de luz, eles irão converter essa luz espalhada em um pulso de tensão que é diretamente proporcional a quantidade de luz espalhada para frente, o computador irá converter esses dados em um gráfico de histograma. 2. Quais são as vantagens de se utilizar a técnica de citômetria de fluxo comparada aos outros métodos de análise? As vantagens são de que conseguimos analisar inúmeras células de populações heterogêneas de uma vez só em uma leitura de histograma, conseguimos analisar o formato, o tamanho e propriedades particulares de cada célula diferente; também conseguimos calcular os valores de HT, HB, VCM, CHCM, RDW e diferencia as células da série branca. 3. O que podemos analisar através da citômetria de fluxo? Na citômetria de fluxo analisamos e contamos o tamanho, formato e propriedades de células individuais dentro de uma população de células diferentes. Dentre essas células temos as vermelhas, as brancas. Podendo também detectar a luz emitida de moléculas fluorescentes excitadas tais como anticorpos marcados com fluorescência ou corantes fluorescentes. 4. Qual a relação entre citômetria de fluxo e imunofenotipagem? A imunofenotipagem vai utilizar uma técnica para identificar as células que compõe um determinado tecido, relacionado a citômetria de fluxo conseguimos coletar esses dados com maior precisão de acertos. Analisamos também a maturação e o fenótipos das células como células neoplásicas hematológicas, podemos também diagnosticar leucemias e seu tipo. 5. O que significa a sigla “CD” muito utilizada em imunofenotipagem ? A sigla CD significa cluster of differentiation que em português quer dizer antígeno de diferenciação celular, que representam vários anticorpos monoclonais que reconhecem o mesmo antígeno. 6. Qual a importância da citômetria de fluxo no diagnóstico das doenças hematopatológicas? Com a citômetria de fluxo conseguimos fazer diversas análises de uma mesma célula por conta disso o diagnostico de doenças hematopatológicas necessitam de uma análise mais profunda e detalhada dessas células como a sua morfologia, fenótipo e genótipo dela. Através da citômetria de fluxo conseguimos detalhes importantes como por exemplo qual o estágio de maturação da célula investigada , por ser um método semi- automatizado permite avaliar milhares de células por amostra. ATIVIDADE 4: Participar de dois (2) cursos disponibilizados no TELELAB, um programa de educação continuada, do Ministério da Saúde, que disponibiliza cursos gratuitos, para profissionais da área da saúde. O aluno deverá realizar dois cursos de interesse da disciplina. Ao completar o curso, o aluno deverá fazer uma avaliação, composta por 10 questões de múltipla escolha. Caso sua nota seja igual ou superior a 7, o estudante receberá um certificado de participação disponibilizado somente em formato digital, pelo próprio provedor do curso. Curso 1: Doença Falciforme Curso 2: Diagnósticos de Hepatites Virais
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