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Disciplina: BIOLOGIA MOLECULAR AV Aluno: LUCIO LOPES DA SILVA JUNIOR 202205118959 Professor: PAMELLA ANTUNES DE MACEDO SALES Turma: 9001 DGT0998_AV_202205118959 (AG) 08/01/2023 14:46:27 (F) Avaliação: 10,00 pts Nota SIA: 10,00 pts ENSINEME: AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 1.1. Ref.: 4119324 Pontos: 1,00 / 1,00 A PCR é uma reação cíclica que depende de diversos fatores e reagentes, e pode ser aplicada em diversos contextos. Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse. O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da fita de DNA no sentido 3' 5', começando no primeiro nucleotídio do primer iniciador incorporado. A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA - dNTP - iniciando a síntese de novas fitas de DNA. A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 °C e 45 °C. A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase. PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidas bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA amplificado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipificados usando-se diferentes métodos. 2.2. Ref.: 4125262 Pontos: 1,00 / 1,00 A Biotecnologia utiliza conceitos das áreas da Biologia Molecular e da Genética Molecular, que têm uma ampla gama de técnicas, métodos e equipamentos específicos para cada objetivo. Com relação à análise e identificação de material genético utilizando técnicas de biologia molecular, assinale a opção correta. A hibridação de sondas de DNA com RNAs celulares em uma qPCR permite determinar se um gene sofreu ou não uma mutação. Para análise de perfil genético, por exemplo, na Biologia forense, utiliza-se a tecnologia do DNA recombinante, ou por clonagem gênica. ! 15/03/2023 18:32 Página 1 de 5 A eletroforese em gel de agarose é preferencialmente utilizada para separar fragmentos de DNA, como produtos de PCR. Quando uma solução aquosa de DNA é aquecida até 100 °C ou exposta a um pH maior ou igual a 13, a hélice da molécula rapidamente se dissocia em duas fitas duplas. Cromossomos inteiros não podem ser individualizados por meio de técnicas de Biologia Molecular. ENSINEME: INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 3.3. Ref.: 7694758 Pontos: 1,00 / 1,00 No século XIX o Bioquímico Johannes F Miescher estudando os leucócitos encontrou um composto no interior do núcleo, formado por átomos de nitrogênio e fósforo. Assinale a opção que indica o nome dado a esse composto. Bases pirimídicas. Nucleína. Ácido nucléico. Adenina. Guanina. 4.4. Ref.: 3992602 Pontos: 1,00 / 1,00 Qual dessas alternativas, melhor define um gene? Trecho de RNA que será traduzido para uma proteína O gene é um segmento codificante do DNA, ou seja, que de fato será transcrito e traduzido. Conjunto de todos os elementos genéticos responsáveis por armazenas as informações hereditárias de determinado organismo. Gene é o conjunto de informações do RNAm que é traduzido em proteína. Parte do DNA responsável pelo controle da expressão gênica. ENSINEME: ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS 5.5. Ref.: 4134261 Pontos: 1,00 / 1,00 Você foi contratado por uma empresa de coleta de DNA para realizar testes de ancestralidade, a coleta é feita com swab pelo próprio cliente e o tubo chega em suas mãos. Leia as alternativas e marque a incorreta. 15/03/2023 18:32 Página 2 de 5 A amostra coletada pode ficar por até uma semana em temperatura ambiente. É importante checar se tem dupla identificação através de um código de barras ou código numérico, além do nome do cliente. O tubo deve conter apenas o swab limpo dentro dele. O kit utilizado para a coleta de DNA deve possuir informações claras e objetivas. A coleta pode ser realizada, sem a necessidade de ir ao laboratório. O swab utilizado deve estar limpo, sem detritos, caso tenha marcas de batom ou restos de comida o cliente deve repetir o procedimento. 6.6. Ref.: 4131264 Pontos: 1,00 / 1,00 Considerando a sequência de RNAm abaixo, qual dos primers específicos para esta sequência deve ser utilizado? 5' AUGCAAUUGGUCCAGUCGAUGCAGUCAGAACCAUG 3' 5' CGTCAGTCTTGGTAC 3' 5' ATGCTTUUGGUCCAG 3' 5' TTTTTTTTTTTTTTT 3' 5' CATGGTTCTGACTGC 3' 5' GACCUGGTTAACGTA 3' 7.7. Ref.: 4134265 Pontos: 1,00 / 1,00 A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA específicos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: É construída a partir de DNA genômico. Não podem ser construídas a partir de genes. Os íntrons são degradados pela transcriptase reversa. Os íntrons são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de nucleases. É construída a partir de mRNA maduro. ENSINEME: SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 15/03/2023 18:32 Página 3 de 5 8.8. Ref.: 4116461 Pontos: 1,00 / 1,00 É de conhecimento mundial que o desafio central da moderna biologia celular é entender o funcionamento das células em seus detalhes moleculares. Esse objetivo requer técnicas que viabilizem a análise das moléculas envolvidas no processo de fluxo de informação do DNA para proteína e no controle desse fluxo. Muitas técnicas são baseadas em hibridização (ou hibridação). Em relação à hibridização in situ, é CORRETO afirmar: Os nucleotídeos marcados sempre apresentam um isótopo radioativo, que é detectado através de impressão em filme de raio-X. O resultado do experimento de hibridização in situ fluorescente deve ser analisado em microscópio eletrônico com fluorescência. O DNA é retirado de uma amostra tecidual, e passa por uma reação de PCR para incorporação de nucleotídeos marcados; A hibridização in situ não pode ser aplicada em preparações para avaliações dos cromossomos. As sondas utilizadas correspondem a segmentos de ácido nucleico no qual são incorporados nucleotídeos modificados. 9.9. Ref.: 4119308 Pontos: 1,00 / 1,00 Em tecnologia de DNA recombinante, o biotecnólogo insere um gene de interesse, isolado através de reação de transcrição reversa associada à PCR (RT-PCR), em um vetor, e este último em um organismo hospedeiro para expansão do vetor ou expressão do gene. Assinale a alternativa que apresenta e descreve corretamente o método utilizado para introduzir plasmídeos em células de bactéria E.coli no laboratório. Transformação; células são incubadas com o DNA na presença de cálcio e recebem um choque térmico. Microinjeção; células são manipuladas ao microscópio e o DNA é introduzido com ajuda de uma agulha. Transformação; um lisado de células é incubado com o DNA e é submetido a uma corrente elétrica. Infecção; bacteriófagos são utilizados para a introdução do DNA de interesse. Transfecção; DNA é transferido para um lisado de células, através do uso de lipofectamina. 10.10. Ref.: 4122295 Pontos: 1,00 / 1,00 Sequenciamento de nova geração, conhecido também como NGS ou sequenciamento profundo de ácidos nucleicos, é um termo geral utilizado para descrever uma série de tecnologias modernas de sequenciamento. Sobre esta 15/03/2023 18:32 Página 4 de 5 tecnologia é correto afirmar que: Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 Kpb. Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos. Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição. Illumina (Solexa) e 454 (Roche)são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento direto tanto de DNA quanto de RNA. As tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular. 15/03/2023 18:32 Página 5 de 5
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