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Disciplina: BIOLOGIA MOLECULAR AV Aluno: SUELEN F S MURARI DE PAIVA 202204248964 Professor: PAMELLA ANTUNES DE MACEDO SALES Turma: 9001 DGT0998_AV_202204248964 (AG) 09/01/2023 16:21:49 (F) Avaliação: 8,00 pts Nota SIA: 10,00 pts ENSINEME: AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 1. Ref.: 4119323 Pontos: 1,00 / 1,00 Sobre o tema Biologia Molecular, analise as a�rmativas a seguir: 1. A síntese do DNA é semiconservativa, ou seja, ela conserva metade da �ta mãe incorporada na �ta �lha de DNA, a replicação precisa que desoxirribonucleotídeos livres sejam posicionados sobre uma cadeia polinucleotídica molde, e estejam unidos entre si, formando uma nova cadeia complementar à cadeia mãe que serve como molde. A enzima que atua nesse processo é a polimerase. 2. As polimerases do DNA atuam adicionando um nucleotídeo por vez na extremidade 3¿OH livre de uma cadeia polinucleotídica em formação, que se encontre emparelhada com a cadeia molde. Por isso dizemos que a síntese de DNA ocorre no sentido 5 3. 3. No processo de transcrição, toda a informação genética contida no DNA é transcrita para uma molécula de RNA mensageiro, que, no citoplasma, norteará o processo de tradução. 4. A técnica de PCR consiste em ampli�car todo o DNA de um ser vivo, usando uma DNA polimerase que atua em altas temperaturas e é chamada de Taq polimerase, encontrada em procariotos do tipo arquea. Assinale a alternativa que indica todas as a�rmativas corretas. São corretas apenas as a�rmativas 1, 2 e 3. São corretas as a�rmativas 1, 2, 3 e 4. São corretas apenas as a�rmativas 1, 3 e 4. É correta apenas a a�rmativa 3. É correta apenas a a�rmativa 1. 2. Ref.: 4119324 Pontos: 1,00 / 1,00 A PCR é uma reação cíclica que depende de diversos fatores e reagentes, e pode ser aplicada em diversos contextos. Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: O último passo da PCR, a polimerização, é a excisão da �ta de DNA no sentido 3' 5', começando no primeiro nucleotídio do primer iniciador incorporado. Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de �ta dupla, usualmente com extremidade 3'-OH, e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse. A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA - dNTP - iniciando a síntese de novas �tas de DNA. A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 °C e 45 °C. A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase. PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidas bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA ampli�cado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipi�cados usando- se diferentes métodos. → → javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4119323.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4119324.'); ENSINEME: INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 3. Ref.: 7694399 Pontos: 1,00 / 1,00 Os organismos eucariotos apresentam um grande diferença na organização do seu material genético em relação aos procariotos. Essa diferença se deve a presença da membrana celular. ribossomos. carioteca. DNA. citoplasma. 4. Ref.: 7694677 Pontos: 0,00 / 1,00 "Uma dica para quem quer entender com mais facilidade o vocabulário da ciência moderna: aprenda as preposições do grego antigo. É sério. Essas palavrinhas da língua de Homero ajudam demais da conta na hora de acompanhar o que os cientistas estão querendo dizer. Considere a preposição helênica epi, por exemplo. Ela corresponde mais ou menos ao nosso "sobre" (no sentido de "em cima", "por cima"). O que signi�ca, claro, que "epigenética" é aquilo que está "por cima da genética" "literalmente uma camada adicional de complexidade biológica que in�uencia nosso velho conhecido, o DNA." (Entenda de uma vez: o que é epigenética? Disponível em: https://super.abril.com.br/ciencia/entenda-de-uma-vez-o- que-e-epigenetica/. Acessado em 21/09/2022) Sobre a epigenética, avalie as asserções abaixo e a relação entre elas. I. As modi�cações epigenéticas ocorrem exclusivamente pela exposição recorrente a determinadas substâncias químicas. PORQUE II. Um indivíduo fumante consome grandes quantidades de nicotina, cuja molécula modi�ca o padrão metilação em diversos genes. Então, os genes que, em condições normais, não estariam sendo expressos passam a ser. Com base no apresentado, assinale a opção correta. As duas asserções são falsas. As duas asserções são verdadeiras, mas a segunda não é uma justi�cativa correta da primeira. As duas asserções são verdadeiras e a segunda é uma justi�cativa correta da primeira. A primeira asserção é falsa e a segunda é verdadeira. A primeira asserção é verdadeira e a segunda é falsa. ENSINEME: ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS 5. Ref.: 4134261 Pontos: 1,00 / 1,00 Você foi contratado por uma empresa de coleta de DNA para realizar testes de ancestralidade, a coleta é feita com swab pelo próprio cliente e o tubo chega em suas mãos. Leia as alternativas e marque a incorreta. O swab utilizado deve estar limpo, sem detritos, caso tenha marcas de batom ou restos de comida o cliente deve repetir o procedimento. javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 7694399.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 7694677.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4134261.'); A amostra coletada pode �car por até uma semana em temperatura ambiente. É importante checar se tem dupla identi�cação através de um código de barras ou código numérico, além do nome do cliente. O kit utilizado para a coleta de DNA deve possuir informações claras e objetivas. A coleta pode ser realizada, sem a necessidade de ir ao laboratório. O tubo deve conter apenas o swab limpo dentro dele. 6. Ref.: 4131264 Pontos: 0,00 / 1,00 Considerando a sequência de RNAm abaixo, qual dos primers especí�cos para esta sequência deve ser utilizado? 5' AUGCAAUUGGUCCAGUCGAUGCAGUCAGAACCAUG 3' 5' TTTTTTTTTTTTTTT 3' 5' ATGCTTUUGGUCCAG 3' 5' GACCUGGTTAACGTA 3' 5' CGTCAGTCTTGGTAC 3' 5' CATGGTTCTGACTGC 3' 7. Ref.: 4134265 Pontos: 1,00 / 1,00 A clonagem molecular tem demonstrado ser uma técnica excepcional para o isolamento de fragmentos de DNA especí�cos de um organismo. Os processos de clonagem e isolamento de tais fragmentos começam com a construção de bibliotecas de DNA, cDNA ou genômicas. Uma biblioteca de cDNA não apresenta íntrons porque: Os íntrons são retirados in vitro depois da construção do cDNA, por ação de nucleases. É construída a partir de mRNA maduro. Não podem ser construídas a partir de genes. Os íntrons são degradados pela transcriptase reversa. É construída a partir de DNA genômico. ENSINEME: SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 8. Ref.: 4116461 Pontos: 1,00 / 1,00 É de conhecimento mundial que o desa�o central da moderna biologia celular é entender o funcionamento das células em seus detalhes moleculares. Esse objetivo requer técnicas que viabilizem a análise das moléculas envolvidas no processo de �uxo de informação do DNA para proteína e no controle desse �uxo. Muitas técnicas são baseadas em hibridização (ou hibridação). Em relação à hibridização in situ, é CORRETO a�rmar: A hibridização in situ não pode ser aplicada em preparações para avaliações dos cromossomos. O resultado do experimento de hibridização in situ �uorescente deve ser analisado em microscópio eletrônico com �uorescência. As sondas utilizadas correspondem a segmentos de ácido nucleico no qual são incorporados nucleotídeos modi�cados. O DNA é retirado de uma amostra tecidual, e passa por uma reação de PCR para incorporação de nucleotídeos marcados; javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4131264.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4134265.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4116461.'); Os nucleotídeos marcados sempre apresentam um isótopo radioativo, que é detectado através de impressão em �lme de raio-X. 9. Ref.: 4119308Pontos: 1,00 / 1,00 Em tecnologia de DNA recombinante, o biotecnólogo insere um gene de interesse, isolado através de reação de transcrição reversa associada à PCR (RT-PCR), em um vetor, e este último em um organismo hospedeiro para expansão do vetor ou expressão do gene. Assinale a alternativa que apresenta e descreve corretamente o método utilizado para introduzir plasmídeos em células de bactéria E.coli no laboratório. Microinjeção; células são manipuladas ao microscópio e o DNA é introduzido com ajuda de uma agulha. Transformação; células são incubadas com o DNA na presença de cálcio e recebem um choque térmico. Transfecção; DNA é transferido para um lisado de células, através do uso de lipofectamina. Infecção; bacteriófagos são utilizados para a introdução do DNA de interesse. Transformação; um lisado de células é incubado com o DNA e é submetido a uma corrente elétrica. 10. Ref.: 4122295 Pontos: 1,00 / 1,00 Sequenciamento de nova geração, conhecido também como NGS ou sequenciamento profundo de ácidos nucleicos, é um termo geral utilizado para descrever uma série de tecnologias modernas de sequenciamento. Sobre esta tecnologia é correto a�rmar que: Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição. Illumina (Solexa) e 454 (Roche) são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento direto tanto de DNA quanto de RNA. As tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular. Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 Kpb. Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos. javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4119308.'); javascript:alert('C%C3%B3digo da quest%C3%A3o: 4122295.');
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