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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BROMATOLOGIA – aula 2 DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Giovanni Parize Gama MATRÍCULA: 28294704 CURSO: Biomedicina POLO: UNG - Centro PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): ORIENTAÇÕES GERAIS: • O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e • concisa; • O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; • Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); • Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; • Espaçamento entre linhas: simples; • Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). TEMA DE AULA: DETERMINAÇÃO DE LIPÍDEOS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula (relatar os principais métodos de determinação de lipídeos e o que foi utilizado em aula, importância para a composição centesimal, os métodos referentes a deterioração de lipídeos e como evita-los) 2. Materiais utilizados. 3. Realizar os cálculos. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 Para a aula, foi feita a determinação com o método de Soxhlet, utilizando-se queijo qualho. O queijo foi previamente picado e macerado, facilitando a penetração do solvente nas partículas do alimento. Como solvente, foi utilizado o éter etílico. Pode-se usar éter petróleo, ou, ainda, clorofórmio ou hexano. Para vidrarias, utilizou- se proveta (medir o éter), dessecador (para secar o cadinho seco a 105ºC). No dessecador, colocou-se um papel de filtro, pois precisa estar seco e a umidade pode interferir na análise. Usou-se também espátula e balança analítica para pesagem, além de pinça para movimentação dos itens. O método é importante para a determinação de gordura de cada alimento. Pesou-se o papel de filtro para descartar essa pesagem. Pesou-se a amostra (geralmente, o protocolo pede 5g). Envelopou-se a amostra no papel de filtro e levou- se para o aparelho de Soxhlet, para remover a gordura por meio do refluxo. É feita por meio de solvente a quente. Após o refluxo, o solvente é condensado e cai frio na amostra, até toda a gordura ser extraída e cair no recipiente. Utilizou-se 50mL de solvente. O aquecimento dura por volta de 4h. Após, levou-se para secagem total do solvente na estufa em temperatura de 30ºC a 35ºC e ao dessecador, e o restante, após pesagem, e o resultado da gordura total do alimento. Para determinação de lipídeos em alimentos, há diversos métodos, a saber: • Extração com solvente a quente: é baseado em três fazes, que são extração de gordura da amostra do alimento com solvente, eliminação do solvente por evaporação e, por fim, o extrato é quantificado na pesagem. Para a escolha do solvente utilizado, deve-se analisar os componentes existentes no alimento, de modo que o solvente é mais eficaz em amostras secas, uma vez que sua penetração é facilitada; • Extrator Soxhlet: é uma peça de vidraria criado com o fim de extrair lipídeos com o uso de material sólido, sendo um extrato com refluxo de solventes, de processo intermitente, com amostras sólidas e evita alta temperatura de ebulição do solvente, uma vez que a amostra não fica o tempo todo em contato com o solvente. Contudo, o solvente sofre saturação; • Método de Bligh e Dyer: a amostra é misturada com metanol e clorofórmio, formando uma só fase. Após, coloca-se mais clorofórmio e água, até que se forme duas fases distintas (uma de clorofórmio com lipídeos e outra com metanol e água, sem lipídeos). Isola-se a fase do clorofórmio com gordua e, quando o clorofórmio evapora, tem-se a quantidade de gordura por pesagem; • Método de Goldfish: parecido com o método de Soxhlet, também se usa solvente para extração em processo contínuo sendo, assim, mais rápido. É usado omente com amostras sólidas. Sua desvantagem é o contato do solvente muito quente com a amostra, o que pode gerar degradação da gordura. A fim de cálculo, a Instituição forneceu os seguintes dados: Quantidade de amostra pesada: 10g; Peso do balão (antes da extração): 145,5g; Peso do balão após a extração: 145,9g. Para cálculo, tem-se: RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 Lipídios (%)(m/m) = massa do resíduo / massa total da amostra * 100 = 0,4 / 10 * 100 = 4%. Assim, o resultado da determinação de lipídios é de 4%, ou 4g a cada 100g. GALERIANI, T. M.; COSMO, B. M. N. Métodos de determinação de extrato etéreo, proteína bruta e fibra de detergente neutro. UNESP. 2020. Acesso em 19 de março de 2022. Disponível em: <https://www.fcav.unesp.br/Home/ensino/departamentos/cienciasdaproducaoagricol a/laboratoriodematologia-labmato/revistaagronomiabrasileira/rab202010.pdf>. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 TEMA DE AULA: DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula, relatando a importância da determinação do teor de proteínas para a composição centesimal dos alimentos. 2. Determinar o teor de proteínas das amostras estudadas. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 A proteína é um macronutriente presente nos alimentos. Para determinação, foi utilizada a metodologia de Kjeldahl, que é feita em três etapas, onde a primeira é a digestão, a segunda de destilação e a terceira de titulação. Para a digestão (metodologia indireta), coloca-se um solvente na amostra para liberar nitrogênio. Quantifica-se o nitrogênio e converte-se. Utilizou-se uma balança analítica, almofariz e pistilo (para macerar amostra), espátula, mistura catalítica, tubo de Kjeldahl, ácido sulfúrico, pipeta graduada e pera. Primeiro, pesou-se a amostra (utilizou-se bacon macerado). Pegou-se papel manteiga e pesou-se na balança analítica e tarou-se. Com a espátula, colocou-se a amostra no papel (0,25g). Embrulhou-se a amostra e colocou-se no fundo do tubo de Kjeldahl. Então, pesou-se 2,5g de mistura catalítica (mistura de sais que acelera a velocidade da reação) e colocou-se no tubo de Kjeldahl e colocou-se, utilizando a pera e a pipeta graduada, ácido sulfúrico (7mL) para quebrar a molécula de proteína e liberar nitrogênio. Levou-se ao tubo digestor a 400ºC e começou o processo de queima da amostra (ficando a amostra na cor preta), ficando por 3h ou 4h, até não haver mais coloração escura (ficando na cor branca, transparente ou levemente verde, e só então desliga-se o tubo digestor). Assim, todas as moléculas estarão desprendidas. Encerra-se a primeira etapa. Submeteu-se o tubo de Kjeldahl para a destilação (segunda etapa). Leva-se o tubo de Kjeldahl (ao esfriar) ao destilador, com 10mL de água destilada (reação exotérmica, com liberação de calor, ficando levemente azulada), para que, com o vapor, colete-o em um erlenmeyer com ácido bórico e indicador (4 gotas – onde há a coleta do nitrogênio) e quantifique-o. Colocou-se também soda cáustica (20mL) na máquina para que entre em contato com a amostra. O nitrogênio tornou-se amônia, condensou-se no condensador e decantou no erlenmeyer com ácido bórico – formou- se borato de amônia (manter até coletar de 200 a 250mL, de cor azul-esverdeada). Então, na terceira etapa, a titulação, no borato de amônia há o nitrogênio a ser quantificado. Utilizou-se uma bureta. Preencheu-se a bureta com ácido clorídrico (0.1M – fator da solução). Na base do suporte universal que suspende a bureta, há um papel toalha para analisar a coloração da amostra. Assim que a amostra entra em contato com o ácido clorídrico, analisa-se o ponto de viragem, ficando rosa, de acordo com a quantidade de nitrogênio neutralizado no contato do ácido. Colocou-se o erlenmeyer em cima do papel e titulou-se, colocando o ácido clorídrico aos poucos e homogeneizandoaté a coloração ficar rosada (ponto de viragem). Usa-se o volume de ácido clorídrico utilizado é utilizado para calcular a quantidade de proteína. O cálculo é o seguinte: Proteína (%) = volume gasto de HCl * fator da solução * 0,0014 * 6,25 (fator de conversão de Nitrogênio para Proteína) * 100 = 3,1mL * 0,1 * 0,0014 * 6,25 * 100 = 0.27% de proteína na amostra. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 TEMA DE AULA: ANÁLISE DE LEITE RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula, ressaltando a importância das análises que atestam a qualidade do leite, diante das constantes falsificações. 2. Apresentar os resultados das análises realizadas no leite. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 Um dos métodos de terminação de leite é por meio do processo de tratamento térmico. Nos últimos anos, houve muitas notícias a respeito de leites falsificados, inclusive utilizando substâncias cancerígenas, como os leites das marcas Hollmann e Parmalat, com soda cáustica, bicabornato de sódio e água oxigenada (fontes: https://agenciabrasil.ebc.com.br/geral/noticia/2014-05/empresarios-sao-presos- acusados-de-adicionar-produtos-cancerigenos-ao-leite e https://veja.abril.com.br/economia/leite-com-formol-soda-caustica-e-agua-oxigenada- foi-vendido-em-sp/). Assim, evidencia-se a importância da análise do leite, para garantia de suas propriedades e segurança. Explicou-se que o leite pasteurizado (vendido em saquinho) tem as propriedades mantidas, e o UHT (em embalagem Tetra Pak). Foram utilizados bureta (com hidróxido de sódio a 0.1M), pipeta volumétrica, pera, erlenmeyer, proveta, béquer e fenolftaleína. Transferiu-se, utilizando a pipeta volumétrica e a pera, o leite (10mL) para o erlenmeyer, com 20mL de água e 6 gotas de fenolftaleína (para realizar o teste de acidez por meio de titulação). Para-se a titulação quando a coloração ficar rosa claro por volta de 30 segundos, correspondendo o volume usado de hidróxido de sódio proporcionalmente à acidez da amostra (ácido lático – quanto mais ácido, o leite está mais fermentado, ou seja, estragado; já, se a acidez é pequena, pode ser que o animal esteja com mastite). Quando estiver rosa, o pH está neutro (7). Foi feita também a análise de peroxidase no leite (enzima presente no leite e, quando aquecido acima de 80ºC, é desnaturada a enzima). O leite cru e o leite pasteurizado tem a análise peroxidase ativa, já o UHT não há (pois a peroxidase se desfaz por volta de 80ºC). Os testes enzimáticos do leite referem-se tanto à fosfotase como à peroxidase (no leite cru, há as duas enzimas ativas; no pasteurizado, somente peroxidase ativa e fosfatase desativada; no leite UHT, as duas enzimas estão inativadas). Ou seja, observa-se se os tratamentos térmicos do leite foram eficazes. A análise da peroxidase se faz, com o auxílio de pipeta, colocando 10mL de cada leite em um tubo de ensaio em banho maria a 40ºC por cinco minutos (ativar a enzima); em seguida, na capela, coloca-se 2mL guaiacol a 1% e 3 gotas de peróxido de hidrogênio a 3% para identificar a enzima. Na amostra de leite pasteurizado, formou-se um anel de coloração salmão (indica presença de enzima peroxidase), já no leite UHT não. Fez-se também a análise de identificação de amido, que não deve existir no leite, mas coloca-se para adulterá-lo para aumentar o volume. Foi utilizado amido solúvel para adulterar o leite propositalmente. Colocou-se leite adulterado e leite sem adulteração em tubos de ensaio diferentes, sendo 10mL cada. Colocou-se em banho maria fervente por cinco minutos para ativar a estrutura do amido (para o amido ficar gelatinoso). Após, colocou-se 5 gotas de lugol. O leite adulterado teve uma formação de coloração azul, enquanto o leite sem adulteração não teve mudança de coloração. Ainda, foi feito teste de determinação de pH (para determinar a acidez), com 50mL de leite em uma proveta, transferindo-o para um béquer. No phmetro, mostrou- se que o pH está em torno de 7.1. Para o último teste, analisou-se a densidade do leite, que indica ou não a adição de compostos no leite. O leite deve estar com densidade entre 1,028g/mL a RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 1,034g/mL. Colocou-se 500mL de leite em uma proveta e utilizou-se o termolactodensímetro (para leite a 15ºC). Caso o leite não esteja a 15ºC, faz-se a correção (para cada ºC, adiciona-se 0,0002 ao valor, caso esteja acima de 15ºC, ou subtrai-se, caso esteja abaixo de 15ºC). Para a amostra em aula, estava em torno de 1.051g/mL, não estando de acordo com a legislação (MET POA 09 02 c/c Instrução Normativa Nº 76, de 26 de novembro de 2018).
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