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MICROSCOPIA UNIDADE 1 2 O poder de resolução máximo do microscópio de luz (também chamado de resolução ou limite de resolução) é de aproximadamente 0,2 μm; esta resolução toma possível a obtenção de boas imagens aumentadas até 1.000 a 1.500 vezes. MICROSCOPIA DE LUZ 3 Ao microscópio de luz (também chamado microscópio óptico), as preparações coradas são examinadas por iluminação que atravessa o espécime (transiluminação). O microscópio de luz é composto de partes mecânicas e ópticas. O componente óptico consiste em três sistemas de lentes: condensador, objetivas e oculares. O condensador concentra a luz de uma lâmpada e projeta um feixe luminoso sobre o espécime. A objetiva recebe a luz que atravessou o espécime e projeta uma imagem aumentada do espécime em direção à ocular, que novamente amplia a imagem e a projeta na retina, em uma tela, em uma câmera fotográfica ou em um detector eletrônico. No caso das imagens projetadas na retina, a ampliação total é calculada multiplicando-se o aumento da objetiva pelo aumento da ocular. Ao contrário de muitos instrumentos científicos, um microscópio de luz sempre irá mostrar algum tipo de imagem, ainda que de baixa qualidade. Na pesquisa científica, as imagens obtidas são usadas para validar ou rejeitar hipóteses experimentais. Como método de ensino, a microscopia serve para ilustrar o que se aprende nas aulas teóricas. De qualquer forma, a microscopia nos permite observar detalhes que não são perceptíveis a olho nu. PARTE MECÂNICA A parte mecânica do microscópio de luz é representada pelo corpo do microscópio, que se encontra apoiado pela extremidade inferior em uma base de tamanho e peso suficientes para garantir o equilíbrio do equipamento. A parte superior do braço se prende a um tubo metálico conhecido como canhão, que sustenta as lentes. Um sistema de cremalheira permite a movimentação do canhão para baixo e para cima, por meio dos parafusos macro e micrométricos. O parafuso macrométrico permite deslizamentos rápidos e de grande amplitude, enquanto o micrométrico possibilita pequenos deslocamentos e um ajuste focal mais delicado. Na parte inferior do tubo, ficam posicionadas as lentes objetivas, em número variável, rosqueadas a um dispositivo giratório denominado revólver. Entre o canhão e a base do microscópio, existe uma plataforma metálica chamada platina, sobre a qual a lâmina deve ser posicionada para observação. Para permitir a visualização completa de todo campo, um dispositivo denominado charriot movimenta as lâminas para frente/trás e lateralmente. PARTE ÓPTICA As lentes oculares são adaptadas na extremidade superior do tubo do microscópio e é por meio dessas lentes que o observador olha. A lente ocular, geralmente, produz aumento de 10 vezes 4 As lentes objetivas são constituídas por um conjunto de lentes posicionadas na porção inferior do tubo do microscópio. A maioria dos microscópios apresenta três objetivas a seco e uma objetiva de imersão (cuja utilização é feita com o auxílio de um óleo especial). Pé ou Base – suporta o microscópio, assegurando a sua estabilidade. Braço ou Coluna – peça fixa à base, na qual estão aplicadas todas as outras partes constituintes do microscópio. Tubo ou Canhão – cilindro que suporta os sistemas de lentes, localizando-se na extremidade superior a ocular e na inferior o revólver com objetivas. Platina – peça circular, quadrada ou retangular, paralela à base, onde se coloca a preparação a observar, possuindo no centro um orifício circular ou alongado que possibilita a passagem dos raios luminosos concentrados pelo condensador Parafuso Macrométrico – engrenagem que suporta o tubo e permite a sua deslocação a da platina. É indispensável para fazer a focagem. Parafuso Micrométrico – imprime ao tubo ou à platina movimentos de amplitude muito reduzida, completando a focagem. Permite explorar a profundidade do campo do microscópio. Revólver – disco adaptado à zona inferior do tubo, que suporta duas a quatro objetivas de diferentes ampliações: por rotação é possível trocar rápida e comodamente de objetiva. Sistema de Oculares e Sistema de Objetivas – o conjunto de lentes que permitem a ampliação do objeto. A ampliação dada ao microscópio é igual ao produto da ampliação da objetiva pela ampliação da ocular. Fonte Luminosa – existem vários tipos de fontes luminosas, podendo ser uma lâmpada (iluminação artificial), ou um espelho que reflita a luz solar (iluminação natural). Os dois tipos de iluminação têm virtudes e defeitos, mas destinam-se os dois à iluminação da preparação, possibilitando assim a sua visualização. Condensador – distribui regularmente, no campo visual do microscópio. Diafragma – regula a intensidade luminosa no campo visual do microscópio. MICROSCOPIA DE LUZ
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