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QUESTÕES DE APROFUNDAMENTO DE CONTEÚDO AULA COCOS GRAM POSITIVOS – IDENTIFICAÇÃO DOS GÊNEROS STAPHYLOCOCCUS E MICROCOCCUS 1. Quais as características gerais do gênero Staphylococcus (família, coloração de Gram, arranjos, motilidade, tamanho, crescimento e cor)? Família Staphylococcacea. Coloração de Gram -> cocos gram positivos, arranjo de cacho de uva, únicos, em pares, tétrade, possui motilidade negativa, tamanho cerca de 1 um de diâmetro, crescimento rápido em condições aeróbias ou microaerófilas. São anaeróbios facultativos. Cor variando do branco ao amarelo. • As colônias de S. aureus são acinzentadas a amarelo dourado intenso. • As colônias de S.epidermidis apresentam coloração de cinza a branca. Apresentam sensibilidade variável a muitos agentes antimicrobianos, produção de B-lactamases, resistência à meticilina e oxacilina Identificação primária: catalase positiva 2. Staphylococcus aureus é um microrganismo presente em várias manifestações clinicas. Determine: Quais as doenças que pode produzir, os sítios de infecção que pode acometer, o seu habitat normal e as principais via de transmissão? Doenças: pústulas, abscessos, furúnculos; causa impetigo, artrite, cistite, osteomielite, meningite, intoxicação alimentar Sítios de infecção: orofaringe, sangue, feridas cirúrgicas, ponta de cateter, dreno abscessos, furunculos, etc. Habitat normal: pele, especialmente nariz e períneo Transmissão: contato e vias aéreas 3. Quais as enzimas extracelulares que o Staphylococcus aureus pode possuir? Detalhe cada uma delas. Pode possuir coagulase, catalase, nuclease, estafiloquinase, B-lactamases e Hialuronidase Coagulase: semelhante a protrombina, capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina. Resistência a opsonização e a fagocitose Catalase: conversão do peróxido de hidrogênio em água e oxigênio Nuclease: hidrólise de DNA e RNA Estafiloquinase: fibrinólise, semelhante a estreptoquinase. Facilitam a disseminação da infecção para os tecidos adjacentes B-lactamase: hidrolisa o anel beta lactâmico Hialuronidase: Despolimeriza o ácido hialurônico existente nos espaços intercelulares que condicionando uma diminuição de viscosidade, propícia a difusão do microrganismo ou de suas toxinas. 4. Qual a principal característica da enterotoxina que provoca a Intoxicação Alimentar Estafilocócica? São enzimas termoestáveis a 100ºC por 30 minutos. Resistentes a hidrólise por enzimas gástricas 5. O que é a síndrome do choque tóxico? Quais os seus sinais e sintomas? Choque causado por toxinas estafilocócicas. Sintomas: vômitos e diarreia, milagia severa, hiperemia vaginal, orofaringe e conjuntival. uréia 2x o valor normal, piúria, plaquetopenia, bilirrubina e TGO/TGP >2x o valor normal, desorientação 6. Quais as doenças que a toxina esfoliativa pode provocar? Eritema cutâneo, síndrome da pele escaldada, impetigo bolhoso 7. Como é feito o teste da catalase e qual a sua importância? Com a alça, retira-se as colônias e sao depostivas numa lâmina, após isso adiciona-se água oxigenada para verificar se a bactéria é capaz de decompor o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio. O teste é positivo com a formação de bolhas **CUIDADO AO RETIRAR COLÔNIAS CRESCIDAS EM ÁGAR SANGUE PORQUE OS FRAGMENTOS PODEM SE MISTURAR COM AS COLÔNIAS E PRODUZIR UM RESULTADO FALSO-POSITIVO. FORMAÇÃO DE BOLHAS indica ser a família Staphylococcaceae (Ex.: Staphylococcus spp., Micrococcus spp.) SEM FORMAÇÃO DE BOLHAS indica ser a família Streptococcaceae (Ex.: Enterococcus spp., Streptococcus spp.). 8. Como Staphylococcus aureus é identificado laboratorialmente? Cocos gram positivos arranjados em cachos, cor amarelo dourado, hemolisina positiva para algumas cepas, catalase: positiva. Coagulase: positiva, manitol: positivo, DNase: positivo 9. Explique o fundamento do teste do Manitol e da DNase? Teste do manitol: degradação do manitol em ácido. Utiliza-se o meio ágar manitol salgado, uma viragem do vermelho original do meio para o amarelo indica degradação do manitol com formação de ácido. Tem como indicador de ácido o vermelho de fenol DNase: utiliza-se o meio agar DNase- se possuir a enzima desorixibinunclease, haverá degradação do ácido nucleico (DNA) Prova positiva - zona clara ao redor do crescimento bacteriano (revelador o ácido clorídrico 1N). Prova positiva - coloração róseo claro acrescentando ao meio original azul de ortoluidina a 0,1%. 10. São dois tipos de coagulase que o Staphylococcus aureus pode promover. Quais são essas coagulases e como são feitas a sua determinação? Coagulase fixa ou ligada ou conjugada e Coagulase livre Coagulase fixa - verifica se o microrganismo possui coagulase na superfície da parede celular. Determinação: o teste positivo ocorre dentro de 15-20 segundos e deve ser considerado negativo após 2-3 minutos Coagulase livre: É secretada extracelularmente e reage com uma substância presente no plasma (Fator de reação de coagulase -CRF para formar um complexo que reage com o fibrinogênio, formando fibrina) Ttr 11. Qual a Identificação laboratorial do Staphylococcus epidermidis? Cocos gram-positivos arranjados em cachos. Cor: branca. Catalase: positiva. Coagulase: negativa. Manitol: negativo. Dnase: negativo 12. Qual a sua associação como patógeno oportunista? Colonização de dispositivos (cateteres e prótese) e o mais frequente encontrado em hemocultura 13. Qual a identificação laboratorial do Staphylococcus saprophyticcus? Cor: branca, catalase: positiva, coagulase: negativa, manitol: negativo, Dnase: negativo; Novobiocina: resistente 14. Como é realizado e qual a interpretação o teste da Novobiocina?São utilizados discos padronizados contendo 5μg de novobiocina. A leitura é feita medindo-se o diâmetro do halo de inibição ao redor do disco após incubação de 18-24 horas. Prova positiva (resistência) – Halo menor ou igual a 14mm. 15. Qual o principal sitio de infecção relacionado com Staphylococcus saprophyticcus? Infecção do trato urinário 16. Como se comporta os gêneros Micrococcus e Staphylococccus frente aos discos de Furazolidona e bacitracina? Micrococcus -> furazolidona resistente e bacitracina sensível Staphylococcus -> furazolidona sensível e bacitracina resistente 17. Cocos Gram positivos em tétrade, catalase positiva, oxidase positiva devem ser testados com meio OF (Micrococcus oxidativo e Staphylococcus fermentativo) e disco de bacitracina ou furazolidona para identificar Micrococcus. 18. . meio OF (Micrococcus oxidativo e Staphylococcus fermentativo) e disco de bacitracina ou furazolidona para identificar Micrococcus.
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