TESTES SOROLÓGICOS em Imunologia

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TESTES SOROLÓGICOS em Imunologia
Determinam respostas imunes de anticorpos, antígenos ou linfócitos
Pesquisa de :
- Anticorpos:
● IgM
● IgG - Permanece mesmo em menor quantidade por muitos anos
● IgA - Vai para mastócito ou basófilo. É a menor quantidade
● IgE
- Antígenos
● Detecta qualquer proteína ou hormônio no soro
- Utilização:
● Imunodiagnóstico - Detecta imunoglobulina
● Imunodosagens - avalia concentrações até de medicamentos
- Detecta:
● Interação de antígenos e anticorpos
● Interação do epítopo do antígeno e do sítio de ligação do
anticorpo
Tipos
- Qualitativos
● Indica presença ou não
- Semiquantitativos
● Dá ideia de quantidade
- Quantitativos
● Quantifica (sensibilidade maior)
Características
- Sensibilidade
● Mais em testes de triagem
● Menor concentração de antígeno/anticorpo é mais sensível
● Descarta falso negativo
● Indicado primeiramente
- Especificidade
● Testes confirmatórios
● Descarta falso positivo
● Cuidado com janela imunológica
Tipos de interação Ag - Ac
- Primária:
● Imunocomplexo
● Alta sensibilidade
- Secundária
● Sensibilidade menor
● Várias moléculas de Antígeno e anticorpo
● Precipitação: Ags solúvel + Anticorpos
● Aglutinação: Ags particulados + Anticorpos
TIPOS DE TESTES DE AGLUTINAÇÃO
- Direto
● Antígeno e anticorpo = aglomeração
● Antígeno que interage –. Faz parte da partícula e sensibiliza
partícula antes
- Indireto
● Antígeno solúvel sensibiliza antígeno e conjugado gerando
“aglomeração”
TÍTULO
- Maior diluição do soro com maior número de reagente
- Última diluição que foi positiva
- Dilui até parar de dar positivo
TESTES QUANTITATIVOS
- Controles
- Calibradores
● Detecta curva de calibração
● Automatizado
- Curva de Calibração
- Conjugados
● Proteína (Ac ou Ag) + Marcador
● Alta sensibilidade
● Radioimunoensaio
❖ Radiosoro ligado a proteína identifica o antígeno
● ELISA
❖ Enzimático
❖ Enzima associada a proteína
❖ Detecta anticorpo específico
❖ Antígeno se liga ao anticorpo
❖ Usa anticorpo secundário
● Quimioluminescência
❖ Produz luz
❖ Mais vantajoso
● Fluorimetria