Técnicas em Biologia Molecular

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BARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741) 
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Prova65440202 
Qtd. de Questões10 
Acertos/Erros10/0 
Nota10,00 
1 
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa 
prática depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após 
a desnaturação (período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de 
fusão do DNA, ou seja, o momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e 
a abertura da dupla fita de DNA, varia de um organismo para outro. O ponto de fusão 
do DNA também depende da quantidade de pares de base G-C e A-T, sendo que, quanto 
mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre porque o par G-C é 
mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta apenas 
com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o 
padrão de hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de 
fusão, outros fatores podem interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses 
fatores, analise as opções a seguir: 
I- Temperatura de fusão. 
II- pH alto para produzir condições de hibridização. 
III- Concentração de cátions monovalentes. 
IV- Presença de solventes orgânicos. 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a opção II está correta. 
B 
As opções I, II, III e IV estão corretas. 
C 
Somente a opção III está correta. 
D 
Somente a opção I está correta. 
2Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o 
gene de um organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis 
mutações, cadeias de transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. 
De acordo com as técnicas empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) 
são utilizados para o sequenciamento com o método de Sanger, em que, posteriormente, 
faz-se a identificação da sequência com eletroforese. ( ) O pirosequenciamento tem 
como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita. ( ) 
O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos 
testes de sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de 
sequenciamento de DNA. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
F - F - V. 
B 
V - V - F. 
C 
V - F - V. 
D 
V - F - F. 
3Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a 
construção de bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa 
CORRETA: 
A 
Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo 
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido. 
B 
As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que 
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa. 
C 
A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos 
de DNA, incluindo o não codificante. 
D 
As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas 
de restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA. 
4A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da 
molécula a ser isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e 
poliacrilamida para a técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: I- A 
poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base 
nitrogenada de diferença. II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda 
presente no gel, representa um agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. III- 
No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se 
movimentar, enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de 
agarose. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a sentença III está correta. 
B 
Somente a sentença II está correta. 
C 
Somente a sentença I está correta. 
D 
As sentenças I, II e III estão corretas. 
5A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice Wilkins 
e Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da replicação e 
transmissão da informação genética de uma célula à outra. Sobre o DNA, assinale a 
alternativa CORRETA: 
A 
O DNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela pentose, denominada 
desoxirribose, os nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato. 
B 
O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, 
citosina e guanina. 
C 
O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina. 
D 
O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si. 
6 
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a hibridização é 
uma técnica que tem o princípio da complementariedade das bases nitrogenadas dos 
ácidos nucleicos como base (adenina com timina e citosina com guanina). Essa técnica 
consiste, de forma básica, em localizar sequências de interesse no genoma de quaisquer 
organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da espécie. 
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e 
vermelho. 
B 
A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes. 
C 
A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de scanner. 
D 
O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de 
FISH, sem necessidade de incubação. 
7Com o passar do tempo, as técnicas de sequenciamento ficaram mais sofisticadas e 
automatizadas. Sobre o sequenciamento de segunda geração, analise as sentenças a 
seguir: I- O Next Generation Sequencing (NGS) não utiliza nucleotídeos terminadores 
de cadeira, permitindo a criação de plataformas mais eficientes e rápidas. II- Os 
métodos de segunda geração compreendem o uso de plataformas portáteis com 
processamento rápido e eficiente, em plataformas do tamanho de um pen drive. III- Os 
métodos de segunda geração compreendem o pirosequenciamento, o sequenciamento 
por síntese, sequenciamento por terminação de cadeia reversível, sequenciamento por 
hibridização e ligação, dentre outros. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As sentenças I e III estão corretas. 
B 
As sentenças I e II estão corretas. 
C 
Somente a sentença II está correta. 
D 
Somente a sentença I está correta. 
8O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA 
de uma maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de 
pesquisa, a PCR qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os 
resultados esperados. De acordo com essas duas técnicas, classifique V para as 
sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) A PCR qualitativa indica a presença de um 
fragmento específico de DNA ou cDNA em uma amostra, mas não indica quanto do 
gene está expresso na amostra. ( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real 
(quantitativa) e fornece informações precisas relativas à quantidade de expressão de um 
gene. ( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de 
quantificar a amplificação dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
V - V - F. 
B 
F - F - V. 
C 
F - V - F. 
D 
V - F - F. 
9A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de 
amplificar a molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o 
DNA a ser sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a 
uma placa de vidro por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca deDNA, 
que será submetida ao PCR. 
B 
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA 
de forma portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos 
equipamentos, semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada. 
C 
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas 
sólidas, nas quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, 
formando uma biblioteca de DNA. 
D 
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em 
fragmentos de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada 
novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção 
ocorre em tempo real. 
10 
"A clonagem de genes possui variadas aplicações na área de pesquisa, por meio do 
conhecimento da organização de genomas, da sequência de genes e suas proteínas 
codificadas, da criação de bibliotecas de DNA e cDNA, além de produtos que 
beneficiam a sociedade, como a produção de enzimas industriais, produção de insulina 
humana, vacinas, hormônios de crescimento e melhoramento genético". Sobre as 
principais diferenças entre essas técnicas, destacando os objetivos de cada uma delas, 
analise as sentenças a seguir: 
I- As Bibliotecas de DNA ou cDNA são grandes coleções de material genético mantidas 
em colônias de bactérias, nas quais um fragmento específico de DNA ou um gene 
podem ser procurados. 
II- Uma biblioteca de DNA é formada por fragmentos originados a partir de um DNA 
genômico. Já uma biblioteca de cDNA é formada por sequências codificantes dos genes 
que estavam expressos na forma de mRNA em uma determinada amostra. 
III- A formação das bibliotecas de DNA e cDNA permite que fragmentos clonados 
sejam mantidos e replicados por tempo indeterminado. 
Assinale a alternativa CORRETA: 
Fonte: CALEFFE, R. T. T.; OLIVEIRA, S. R.; FREITAS, A. C. O.; KIDO, K. K.; 
GARCIA, A.; PAMPHILE, J. A. Clonagem de genes: métodos e aplicações. Revista 
UNINGÁ, v. 47, p. 73-77, jan./mar. 2016. Disponível em: 
http://revista.uninga.br/index.php/uninga/article/view/1252/874. Acesso em: 5 fev. 
2021. 
A 
As sentenças I, II e III estão corretas. 
B 
Somente a sentença II está correta. 
C 
Somente a sentença I está correta. 
D 
Somente a sentença III está correta.