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Disciplina: Hematologia e Citologia Clínica Prof. responsável: Prof. Dr. Fábio Haach Téo Lessandra Aparecida de Aquino RA 202115840 Lista de exercícios 1 1) Defina o termo "sangue". Qual é a sua classificação histológica? R: Sangue é tecido conjuntivo líquido, presente no sistema circulatório, que segue um fluxo regular e em uma única direção, devido as contrações rítmicas do coração. 2) O tecido sanguíneo pode ser dividido em duas partes. Como elas são denominadas e de quais componentes elas são constituídas? R: O primeiro componente é o Plasma (parte líquida) e por Glóbulos sanguíneos (componentes do sangue), que são os glóbulos vermelhos (hemácias/ eritrócitos), plaquetas (fragmentos celulares) e os leucócitos (glóbulos brancos de defesa). Os leucócitos são subdivididos em granulócitos e agranulócitos. 3) Explique a diferença entre "plasma" e "soro". R: Após a coleta do sangue, o que determina a diferenciação entre plasma e soro é a presença ou não de anticoagulante. Sendo assim, plasma é a parte líquida de um sangue com presença de anticoagulante e soro é a parte líquida de um sangue sem anticoagulante. 4) explique as funções desempenhadas pelo sangue no organismo humano. R: O sangue tem a função de transportar diversas substâncias para todo o organismo como, por exemplo, o transporte de gases como CO2 e O2, auxilia o transporte das células de defesa para os locais de infecção, distribui nutrientes, transporta metabolitos para os órgãos de excreção com o fim de serem eliminados, permite a circulação de hormônios (mensagens químicas) para diversos órgãos, regula a distribuição de calor, etc. 5). Quais são os elementos figurados do sangue? R: Os elementos figurados do sangue são, os glóbulos vermelhos, hemácias ou eritrócitos que servem para transportar gases, como o oxigénio e o dióxido de carbono. Os glóbulo brancos ou leucócitos que servem para defender o organismo contra corpos invasores. As plaquetas que servem para coagular o sangue quando há um ferimento. 6). Como os leucócitos são classificados? R: Os leucócitos são classificados, de acordo com a sua estrutura vista em microscópio óptico, em granulosos e agranulosos. Existem três tipos de leucócitos granulosos: os neutrófilos, os eosinófilos e os basófilos; enquanto os leucócitos agranulosos podem ser de dois tipos: os monócitos e os linfócitos (T e B ) 7). Explique as funções desempenhadas por cada um dos glóbulos sanguíneos. R: As hemácias (eritrócitos) são responsáveis pelo transporte de gases como o O2 e o CO2 pelo organismo. As plaquetas são fragmentos de células e auxiliam durante o processo de coagulação. Os leucócitos são responsáveis pelas respostas imunológicas de defesa em casos de infecção. Entretanto, os leucócitos também podem estar associados a processos inflamatórios e doenças autoimunes. Os monócitos e os neutrófilos fazem parte da resposta imunológica inativa. Os neutrófilos são conhecidos por serem os primeiros a chegarem no local da infecção, realizarem fagocitose e obtém diversos mecanismos enzimáticos que auxiliam na destruição do microrganismo. Os macrófagos estão presentes nos tecidos e são o segundo tipo celular que chega ao local da infecção. Eles fagocitam os microrganismos e possuem mecanismos de destruição semelhantes aos neutrófilos. Além disso, os macrófagos também são responsáveis pela apresentação de antígenos para os linfócitos CD4 através do MHC-1. Quando ocorre essa apresentação de antígeno, os linfócitos se ativam e iniciam a resposta imune adquirida para combater a infecção. Se o microrganismo for extracelular, ocorrerá a ativação dos linfócitos B e a produção de anticorpos, porém, caso o microrganismo for intracelular, ocorrerá ativação dos linfócitos T CD4+ (Helper), que ativam células capazes de realizar a destruição do patógeno, ou ocorrerá a ativação dos linfócitos T CD8+ parte da resposta imunológica inativa. Os neutrófilos são conhecidos por serem os primeiros a chegarem no local da infecção, realizarem fagocitose e obtém diversos mecanismos enzimáticos que auxiliam na destruição do microrganismo. Os macrófagos estão presentes nos tecidos e são o segundo tipo celular que chega ao local da infecção. Eles fagocitam os microrganismos e possuem mecanismos de destruição semelhantes aos neutrófilos. Além disso, os macrófagos também são responsáveis pela apresentação de antígenos para os linfócitos CD4 através do MHC-1. Quando ocorre essa apresentação de antígeno, os linfócitos se ativam e iniciam a resposta imune adquirida para combater a infecção. Se o microrganismo for extracelular, ocorrerá a ativação dos linfócitos B e a produção de anticorpos, porém, caso o microrganismo for intracelular, ocorrerá ativação dos linfócitos T CD4+ (Helper), que ativam células capazes de realizar a destruição do patógeno, ou ocorrerá a ativação dos linfócitos T CD8+ 8). Explique os critérios utilizados para a identificação dos diferentes glóbulos sanguíneos nos esfregaços, identificando as características específicas de cada célula em relação aos parâmetros especificados abaixo. a) núcleo: morfologia, grau e padrão de condensação da cromatina b) citoplasma: morfologia, afinidade pelos corantes do tipo Romanowsky (basófilo ou acidófilo) e presença de grânulos c) relação núcleo/citoplasma d) posição do núcleo Hemácias (Eritrócitos): Células anucleadas em formato de disco bicôncavo que facilita nas trocas gasosas e na flexibilidade da célula para que a passagem por capilares sanguíneos seja possível. São facilmente corados pelo corante eosina devido a sua característica acidófila atribuída pela presença de hemoglobina. Linfócitos: Células com núcleo esférico central que ocupa quase toda a dimensão da célula, com cromatina condensada e organizada em grumos. O citoplasma dessa célula é reduzido sem grânulos específicos, cora-se me azul claro nos esfregaços, característica de células basófilas. Monócito: Célula com núcleo em forma de rim ou ferradura, levemente deslocado para uma das extremidades da célula, com dois ou três nucléolos. A cromatina é pouco densa e comparação aos leucócitos. O citoplasma dessa célula é basófilo, portanto coram-se me azul. É uma célula que não possui muitas organelas desenvolvidas. Eosinófilo: Célula que apresenta núcleo lateral em forma de cotonete, com grânulos acidófilos corados com eosina que ocupam quase todo o citoplasma. Suas organelas são pouco desenvolvidas. Basófilo: Célula com núcleo em forma de S, meio irregular. O citoplasma é repleto de grânulos que, quando corados, apresentam a cor roxa. Essa célula possui em sua membrana plasmática com receptores para IgE que, quando ativados pelos anticorpos IgE ,os basófilos liberam seus grânulos para o meio extracelular. Neutrófilo: Célula que apresenta núcleo formado por 3 á 5 lóbulos que estão ligados entre si. Nos núcleos dos neutrófilos das mulheres, aparece frequentemente um pequeno apêndice, menor do que um lóbulo nuclear, com a forma de uma raquete, onde está a cromatina sexual formada pelo cromossomo X heterocromático. No citoplasma dessa célula está presente muitos grânulos que tem pouca afinidade com os corantes. 9) Defina o termo "hematopoiese". R: Hematopoiese é a formação de células constituintes do sangue, originadas pela proliferação e diferenciação das células tronco hematopoiéticas pluripotentes. As diferenciações dessas células troncam limitam a potencialidade das mesmas. 10) Identifique os sítios de hematopoiese durante as fases do ciclo de vida do ser humano, as quais estão listadas abaixo. a) 0 a 2 meses: saco vitelínico. b) 2 a 7 meses: fígado e baço. c) 5 a 9 meses: medula óssea (todos os ossos). d) 9 meses a 10 anos: medula óssea (praticamente todos os ossos). e) 10 anos a 18 anos: medula óssea (vértebras, costelas,esterno, crânio, sacro, ossos da pelve e epífises dos ossos longos). f) acima de 20 anos: medula óssea (vértebras, costelas, esterno, crânio, sacro, ossos da pelve e porção proximal do fêmur). 11) O que são células-tronco? Como elas são classificadas? R: São células que possuem a capacidade de se renovarem e darem origem a diversos tipos celulares através da diferenciação. A classificação essas células são de acordo com a origem e a potencialidade de diferenciação. As células-tronco embrionárias são originadas de blastocistos e podem dar origem a qualquer tipo celular do organismo (totipotentes). As células-tronco somáticas são encontradas somente em indivíduos adultos e dão origem apenas a algumas células do organismo (pluripotentes), ou seja, se diferenciam menos do que as totipotentes. As células-tronco induzidas são células criadas em laboratório originadas de células somáticas já diferenciadas de indivíduos adultos que, a partir de processos laboratoriais in vitro, essa diferenciação é revertida. Mesmo após essa reversão, essas células ainda possuem diferenciação limitada. 12). Quais são os fatores necessários para a hematopoiese? Como eles agem durante o processo? R: A hematopoiese ocorre em um microambiente adequado fornecido pela medula óssea dos indivíduos adultos. Esse microambiente é fornecido por diversas células que proporcionam fatores que incentivam a multiplicação e diferenciação de todas as células hematopoiéticas a partir das células pluripotentes. O contado dessas células com outras células e com a matriz extracelular geram fatores de crescimento e fatores de diferenciação. Porem, o mesmo fator pode desempenhar diferentes funções no mesmo tipo celular ou em tipos celulares diferentes. 13). Descreva como se dá a geração de cada um dos glóbulos sanguíneos, identificando as células-tronco, as células progenitoras, as células precursoras, os fatores de crescimento e os fatores de diferenciação envolvidos no processo. R: As células-tronco hematopoiéticas pluripotentes dão origem a todas as células hematopoiéticas. Essas células-tronco dão origem aos linfócitos T, linfócitos B e células NK (linhagem linfoide), aos monócitos, basófilos, neutrófilos e eosinófilos (linhagem mielóide) e as plaquetas. Existem citocinas que induzem a célula-tronco hematopoiética a se dividirem, como a IL3 e o ligante de c-kit. O progenitor mielóide (CFU-GEMM) dá origem aos progenitores BFU-E, que originam eritrócitos, CFU-GM, que originam os neutrófilos e monócitos, CFU-MEG, que originam às plaquetas, CFU-Eo, que originam os eosinófilos, e CFU-Ba, que origina os basófilos. A geração das diferentes CFUs a partir da CFU-GEMM depende das citocinas IL3, GM-CSF, IL-1 e IL-6. Maturação dos tipos celular mielóides: Eritrócitos: BFU-E, CFU-E (normoblasto), proeritroblasto, eritroblasto basófilo, eritrosblasto policromático, eritroblasto ortocromático ou acidófilo, reticulócito e eritrócito. A eritropoietina produzida nos rins é a responsável pelo processo e maturação desse tipo celular. Neutrófilos: CFU-GM, CFU-G, mieloblasto, prómielócito neutrófilo, mielócito neutrófilo, metamielócito neutrófilo, bastonete neutrófilo e neutrófilo. As citocinas IL-3, o GM-CSF e o G-SCF são responsáveis pelo processo de maturação desse tipo celular. Eosinófilo: CFU-Eo, mieloblasto, promielócito eosinófilo, mielócito eosinófilo, metamielócito eosinófilo, bastonete eosinófilo e eosinófilo. A citocina IL-5 é a responsável pela maturação desse tipo celular. Basófilo:CFU-Ba, mieloblasto, promielócito basófilo, mielócito basófilo, metamielócito basófilo, bastonete basófilo e basófilo. Os agentes responsáveis pela maturação desse tipo celular não são conhecidos. Monócito: CFU-GM, CFU-M, monoblasto, promonócito, monócito e macrófago. As citocinas IL-3, o GM-CSF e o M-SCF são responsáveis pela maturação desse tipo celular. Plaquetas: CFU-MEG, megacarioblasto, promegacariócito, megacariócito e plaquetas. Os agentes responsáveis pela maturação desse tipo celular são a trombopoetina produzida no fígado e a citocina IL-11. O progenitor CFU-L (linfoide), dá origem ao linfoblasto, em seguida dá origem aos prolinfócito e, posteriormente, aos linfócitos. Existe ainda, um precursor especifico para as células T e outro precursor especifico para as células B. Os agentes Kits, a IL-1, a IL-6 e a IL-7 participam da transição CFU-L/linfoblasto em células T e B. A diferenciação do linfoblasto linfóide T para prolinfócito T envolve as citocinas IL-2 a IL-3. A diferenciação do prolinfócito T em linfócito T envolve as citocinas IL-4, IL-2 e IL-10, e a diferenciação dos prolinfócito B em linfócito B envolve as citocinas IL-5, IL- 1 e IL-6. A origem das células NK é desconhecida. 14) Explique os papéis desempenhados por timo, baço e linfonodos na linfopoiese. R: O timo é um órgão de diferenciação dos linfócitos T. Nesse órgão, os prolinfócitos T originam os timócitos corticais que passam pela seleção positiva e negativa. Na seleção positiva essas células interagem com outras células reticulares epiteliais corticais e com células derivadas da medula óssea que expressam complexos de MHC. Os timócitos capazes de reconhecer o complexo são positivamente selecionados, sobrevivem e proliferam. A seleção negativa elimina os timócitos que interagem com os complexos MHC de forma exacerbada, sendo fundamental para eliminação de células autoreativas que poderiam causar processos patológicos autoimunes. No final do processo do timo , dependendo do tipo de complexo que a célula foi reconhecida , os timocitos perdem ou a expressão de CD4 ou de CD8 , tornando-se linfócitos T auxiliares ( CD4+) ou citotóxico ( CD8+). Esses linfócitos circulam pelo organismo passando pelos linfonodos e pelo baço, onde podem ser ativados a qualquer momento quando expostos aos antígenos estranhos. Quando ativados, os linfócitos T tornam-se células efetoras e conseguem realizar as suas funções. Os linfócitos T auxiliadores do tipo 1 efetuam a resposta imune celular , enquanto o linfócito T auxiliadores do tipo 2 efetuam a resposta imune humoral , onde as células B são fundamentadas. Porem, as células B passam pela maturação na medula óssea e vão para a circulação onde se alojam nos linfonodos e no baço. Quando ativados pelo linfócito T, os linfócitos B se tornam plasmócitos e começam a produzir anticorpos 15) Explique como se dá a destruição dos eritrócitos pelas células dos sistemareticuloendotelial (SRE). Qual é o destino dado a cada componente da hemoglobina nesse processo? R: Os eritrócitos são destruídos pelos macrófagos e seus componentes vão para diversos destinos. A protoporfirina dá origem a bilirrubina não conjugada que vai para o fígado, onde ocorre a conjugação da bilirrubina que se transforma em ácido glicurônico. Após a conjugação, a bilirrubina conjugada é transformada na bile. A bile é excretada no intestino delgado. Com as enzimas bacterianas do intestino, a bile se torna urobilinogenios que são oxidados e se transformam em urobilinas. Uma parte da urobilinas é reabsorvida no intestino e direcionada para os rins e outra parte é excretada. Em geral, a protoporfirina é modifica e excretada, enquanto o ferro se liga atransferrina e é reaproveitado para novas células. As cadeias globínicas são degradas em aminoácidos que são usados nas síntese de proteínas. 16) Aponte as diferenças entre a destruição extravascular (SRE) e intravascular dos eritrócitos (hemólise). Qual desses processos ocorre naturalmente durante o turnover de eritrócitos do sangue e qual geralmente está associado a patologias? R: Durante a destruição extravascular das hemácias, a hemoglobina não é liberada na corrente sanguínea e a protoporfirina se transforma em bilirrubina indireta nos hepatócitos, enquanto na destruição intravascular a hemoglobina é liberadano sangue. A hemoglobina livre se satura e sofre oxidação, formando a metalbumina. O excesso de hemoglobina livre é excretado pelos rins na urina (hemoglobinúria). 17) Aponte três fatores que influenciam a eritropoiese. R: Ferro, vitamina B12 e folato. 18) A injeção de eritropoetina sintética constitui um dos artifícios que pode ser utilizado por atletas profissionais para melhorar o desempenho e, portanto, tem sido associada a um número crescente de casos de doping. Descreva os efeitos dessa sustância no organismo e explique como ela pode melhorar o rendimento de atletas. R: A eritropoetina é um hormônio produzido nos rins e participa efetivamente na eritropoiese (formação de hemácias), portanto, o uso desse hormônio gera um elevado acréscimo de hemácias no sangue, aumentando a capacidade respiratória e potencializa as trocas gasosas. Esses efeitos podem ser vantajosos para alguns atletas de determinadas modalidades. 19) Explique os mecanismos pelos quais o O2 e o CO2 são transportados pelo organismo. Como ocorrem as trocas gasosas nos tecidos periféricos e nos alvéolos pulmonares? R: O oxigênio é transportado pelas hemácias através da hemoglobina e grande parte do CO2 é transportada pelo plasma em forma de bicarbonato. Dentro dos alvéolos pulmonares, a concentração de O2 é maior do que no sangue venoso e o oxigênio se difunde facilmente para dentro do capilar alveolar. Quando o oxigênio esta no sangue, ocorre um deslocamento de um H+ da hemoglobina . Esse H+ se liga no HCO3- , formando o ácido carbônico, e em contato com a anidrase carbônica , o ácido carbônico se trona água e CO2. O CO2 se difunde nas hemácias e passa dos capilares pulmonares para os álveos pulmonares, porque o CO2 é menor do que no sangue venoso. As hemácias levam o O2 até os tecidos onde ocorre a troca gasosa e o CO2 sai dos tecidos e vai para o sangue . Nesse momento, a grande quantidade de CO2 desloca a anidrase carbônica , dando origem a HCO3- e H+ . O hidrogênio liberado faz com que o meio fique ácido, auxiliando com que a hemoglobina que está dentro das hemácias liberam O2. O oxigênio entra nos tecidos e o CO2 vai para o sangue. Quando as hemácias chegam nos pulmões , o O2 se ligam nas células novamente e o ciclo recomeça. 20) Com relação à curva de dissociação do O2 - hemoglobina, indique dois fatores que a deslocam para a esquerda e dois fatores que a movimentam para a direita. O que essas mudanças acarretam no papel desempenhado pela hemoglobina? R: Para que a curva de dissociação de oxigênio se desloque para a esquerda é necessário que o pH e a concentração de 2,3 DPG diminua , isso faz com que a hemoglobina tenha afinidade por O2 . Entretanto, o aumento do pH e da concentração de CO2 faz com que a curva de dissociação de oxigênio se desloque para direita, fazendo com que a hemoglobina tenha menos afinidade pelo O2. 21) Explique a estrutura molecular da molécula de hemoglobina, indicando seus componentes. R: A hemoglobina é uma célula composta por 4 cadeias polipeptídicas que são mantidas juntas através de ligação não covalente. Cada cadeia possui um grupo heme e um único centro de ligação de oxigênio. O grupo heme é constituído por ferro (Fe2+). Além disso, a principal hemoglobina presente nos adultos é constituída por duas cadeias alfa e duas beta. 22) Descreva a estrutura molecular da membrana plasmática das hemácias e explique como ela está relacionada com sistema ABO de tipagem sanguínea. R: A membrana plasmática das hemácias é constituída por duas camadas de lipídios que estão envolvido em proteínas e sustentado pelo citoesqueleto. Alem disso, há a presença de glicoproteínas chamadas de glicoforinas A, B e C que são classificadas de acordo com os resíduos de carboidrato na porção peptídica. O tipo sanguíneo A significa que há a presença de glicoforina A nas hemácias. O tipo sanguíneo B significa que há a presença de glicoforina B nas hemácias. O tipo sanguíneo AB significa que tanto a glicoforina A quanto a glicoforina B está presentes nas hemácias. O tipo sanguíneo O significa que a glicoforina C nas hemácias. 23) Como as hemácias obtém a energia para manter o seu metabolismo? Porque elas duram, em média, apenas 120 dias no organismo? R: O principal método de obtenção de energia para as hemácias é através da via glicolitica anaeróbica. Outro método de obtenção de energia é através da via das pentoses, porém essa via não é tão eficiente quanto a glicolitica anaeróbica. As hemácias duram cerca de apenas 120 dias porque elas não conseguem renovar seus componentes celulares devido á ausência de núcleo e organelas. 24) Descreva a morfologia dos eritrócitos. Quais são as modificações, observáveis em esfregaços sanguíneos, que ocorrem em situações patológicas? Relacione-as com as possíveis enfermidades em curso. R: As hemácias são células anucleadas em formato de disco bicôncavo, o que facilita as trocas gasosas e aumenta a flexibilidade celular permitindo que a célula passe pelos capilares sanguíneos. É possível que haja algumas alterações morfológicas nas hemácias de acordo com a presença de determinadas patologias. Alterações morfológicas nas hemácias Patologia Anisocitose Talassemia Macrocitose Anemia deseritropoietica congênita II Esferocitose Esferocitose hereditária Acantócito Insuficiência renal Células-alvo Doença hepática alcóolica Corpúsculo de Pappenheimer Anemia sideroblástica Estomatócito Leucemia mielógica crônica Policromasia Anemias regenerativas Corpúsculo de Heinz β-talassemia major Microcitose Anemia ferropriva Pontilhado basofílico Traço talassêmico Keratócito Deficiência de G6PD Falcização Anemia falciforme Corpúsculo de Howell-Jolly Anemia macrocítica megaloblástica por deficiência de vitamina B12 e/ou folato Leptocitose β-talassemia major, após esplenectomia Equinócito Envenenamento por cloreto de sódio Poiquilocitose Heterozigose composta para hemoglonina E e β0 talassemia Contração irregular Anemia hemolítica Ovalocitose Ovalocitose do sudeste asiático Hipocromia Anemia ferropriva Esquizócito Anemia hemolítica microangiopática Eliptocitose Anemia hemolítica Anisocromasia Anemia ferropriva 25) O hemograma é divido em vários blocos. Quais são eles e quais são os componentes avaliados em cada um? R: As divisões do hemograma são: - Eritrograma: analise dos eritrócitos - Leucograma: analise dos leucócitos - Plaquetograma: analise das plaquetas 26) Quais são os índices hematimétricos? Descreva o significado de cada um deles. O índice VCM significa Volume Corpuscular Médio e serve para avaliar o tamanho médio dos glóbulos vermelhos e diagnosticar anemias. Se o valor for inferior a 80 fl, significa que as hemácias estão pequenas e a anemia é do tipo microcítica. Um exemplo comum desse tipo de anemia é a anemia ferropriva, causada por deficiência de ferro. Se o VCM for maior que 96 fl, a anemia é do tipo macrocítica, pois as hemácias estão maiores que o normal. Dentre esse tipo de anemia, as mais comuns são a anemia megaloblástica e a perniciosa. Valores de VCM entre 80 e 100 fl indicam que as hemácias estão dentro do tamanho normal. No entanto, se o número de glóbulos vermelhos estiver reduzido, a anemia é chamada normocítica. O índice HCM significa Hemoglobina Corpuscular Média e indica o peso da hemoglobina na hemácia. Portanto, serve para avaliar a quantidade média de hemoglobina na célula. A hemoglobina é a proteína que dá a cor vermelha aos glóbulos vermelhos e, consequentemente, ao sangue. Sua principal função é se ligar ao oxigênio para que este seja transportado para as células do corpo. Valores altos de HCM são encontrados em glóbulos vermelhos mais escuros. Nesses casos, a anemia é denominada hipercrômica. Se o HCM estiver baixo,as hemácias terão coloração mais clara e a anemia é chamada hipocrômica. Valores normais de HCM são encontrados em glóbulos vermelhos de cor normal, chamados normocrômicos. Caso haja anemia, ela é denominada normocrômica. O resultado do HCM é dado em picogramas. O valor de referência é de 30 a 33 pg. RDW é a sigla em inglês para Red Cell Distribution Width (Amplitude de Distribuição dos Glóbulos Vermelhos). É um índice que indica a variação de tamanho entre as hemácias, representando a percentagem da variação entre os tamanhos obtidos. Serve para avaliar a distribuição dos glóbulos vermelhos de uma amostra em relação ao seu diâmetro, mostrando assim o grau de heterogeneidade dessas células. Para classificar a anemia, deve ser usado em conjunto com o VCM. Os valores de referência do RDW ficam entre 11% e 14%.
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