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Prof. Dr. Walace Kiffer Jr 1/31 Transcrição e Tradução Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 2/31 Transcrição é a síntese de uma molécula de RNA : A partir de moldes de DNA; Semelhante ao processo de Replicação! Na transcrição, apenas pequenas partes da molécula de DNA – em geral um único gene, ou, no máximo, alguns genes – são transcritos em RNA. 1. Um molde de DNA. Um segmento de DNA. 2. Matérias-primas (substratos de transcrição = trifosfato de ribonucleotídeo) necessárias para construir uma molécula de RNA. U, A, C e G. 3. O aparato de transcrição, com as proteínas necessárias para catalisar a síntese de RNA. Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 3/31 Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 4/31 Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 5/31 Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 6/31 Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 7/31 Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 8/31 Em 1970, Oscar Miller Jr., Barbara Hamkalo e Charles Thomas: As extremidades do RNA serão 5’ e o DNA 3’ <-- 5’ Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 9/31 Apenas 1 fita de DNA é utilizada!!! Fita Molde Fita não molde Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 10/31 Apenas 1 fita de DNA é utilizada!!! Fita Molde Fita não molde Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 11/31 Regiões críticas do DNA (Unidade de Transcrição = Segmento de DNA + o aparato de transcrição): 1 Promotor; 1 Sequência codificadora de RNA; 1 Terminador. O que a fita de DNA não molde tem em comum com o RNA transcrito? São Idênticos!!! Exceto as bases U e T! Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 12/31 Em algumas literaturas: UTR = Regiões transcritas mas não são traduzidas. Cap 5’ = Função de proteção contra a degradação. Cauda poli-A (Alanina) = Auxilia a exportação do núcleo. Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 13/31 Promotor: Sequência de DNA que o aparato de transcrição reconhece e se liga; Ele indica qual das duas fitas de DNA deve ser lida como molde e qual será o sentido da transcrição; Determina o sítio de início da transcrição e o primeiro nucleotídeo a ser transcrito (AUG – Metionina); O PROMOTOR NÃO É TRANSCRITO! Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 14/31 Sequência codificadora de RNA: Sequência de nucleotídeos de DNA. Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 15/31 Terminador: Uma sequência de nucleotídeos que sinaliza onde a transcrição deve terminar; Fazem parte da sequência de transcrição; A transcrição para somente após o terminador ter sido copiado em RNA. Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 16/31 Trifosfatos de ribonucleosídeos: Adicionados a ponta 3’ Sentido 5’ 3’ Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 17/31 O processo de transcrição: Similar ao processo de replicação; Entretanto a proteína é a RNA polimerase; NÃO PRECISA DE PRIMERS... Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 18/31 Transcrição é diferente entre procariotos e eucariotos: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 19/31 Transcrição é diferente entre procariotos e eucariotos: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 20/31 Síntese proteica: Códons (sequência de 3 bases). Splicing dos íntrons (transforma o pré-RNAm em RNAm maduro); Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 21/31 Síntese proteica: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 22/31 Síntese proteica: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 23/31 Síntese proteica: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 24/31 Síntese proteica: Transcrição Tipos de RNA Molde de DNA Substratos de transcrição Início, meio e fim Tradução 25/31 Síntese proteica: https://www.youtube.com/watch?v=gG7uCskUOrA https://www.youtube.com/watch?v=gG7uCskUOrA 26/31 Resumo Transcrição é a síntese de uma molécula de RNA a partir de um molde de DNA; A transcrição não utiliza toda a molécula de DNA; Existem 3 tipos básicos de RNA; A transcrição de um Gene utiliza apenas uma das duas fitas do DNA; As regiões críticas do DNA são segmentos que codificam moléculas de RNA mensageiro + os segmentos necessários para o aparato da transcrição; As regiões críticas do DNA são compostas por 1 promotor, 1 sequência codificadora de RNA e 1 terminador; O promotor não é transcrito, ele é utilizado pelo aparato de transcrição; A transcrição para somente após o terminador ter sido copiado em RNA. 27/31 Resumo A síntese do RNAm segue o sentido 5’ -> 3’; O RNA transcrito (pré-RNAm) sofre remoção dos íntrons formando o RNAm maduro; O RNAm maduro é traduzido no citoplasma com a ação dos ribossomos; A adição dos aminoácidos é realizada pelo aporte do RNA transportador (RNAt) junto aos ribossomos. Assista ao vídeo no slide 25!!! 28/31 Exercícios de Fixação 1 – O americano Roger Kornberg, da Universidade Stanford, foi laureado por registrar em imagens o momento em que a informação genética contida no DNA no núcleo da célula é enviada para fora do núcleo através da molécula de RNA. Esse mecanismo de transcrição, por meio do qual o RNA carrega consigo as instruções para a produção de proteínas (e por isso ele ganha o nome de RNA mensageiro), já era conhecido pelos cientistas desde a década de 50. A partir da leitura do trecho acima e de seu conhecimento de Genética molecular, assinale a alternativa incorreta. a) A produção de RNA mensageiro ocorre por controle do material genético. b) No núcleo da célula, ocorre transcrição do código da molécula de DNA para a de RNA. c) O RNA mensageiro leva do núcleo para o citoplasma instruções transcritas a ele pelo DNA. d) No citoplasma, o RNA mensageiro determina a sequência de aminoácidos apresentada por uma proteína. e) Cada molécula de RNA mensageiro é uma longa sequência de nucleotídeos idêntica ao DNA. 29/31 Exercícios de Fixação 2 – Considere um RNA transportador cujo anticódon é CUG. O códon correspondente no RNA mensageiro e a trinca de nucleotídeos na fita do DNA que é transcrita são, respectivamente: a) CTG e GAC. b) TAC e GUC. c) AUT e CAG. d) CUG e CTG. e) GAC e CTG. 3 – Quais os materiais necessários para que ocorra a o processo de transcrição da molécula de DNA e consequente síntese de RNA? 30/31 Exercícios de Fixação 4 – A base molecular da vida pode ser contemplada, em seus aspectos primários, no esquema abaixo: Os números 1, 2 e 3 referem-se às substâncias químicas envolvidas, enquanto os números 4, 5 e 6 indicam setas que representam o processamento destas substâncias. Quais são as estruturas representadas pelos números 1, 2 e 3? Quais são os processos representadas pelos números4, 5 e 6? 31/31 Exercícios de Fixação 5 – O diagrama a seguir representa uma das estruturas semelhantes à árvore de Natal descrita em 1970 por Oscar Miller Jr., Barbara Hamkalo e Charles Thomas e que representa o processo de transcrição do DNA. Identifique as partes de “a” a “i” no diagrama: a) Molécula de DNA. b) Extremidades 5′ e 3′ da fita molde de DNA. c) Pelo menos uma molécula de RNA. d) As extremidades 5′ e 3′ de pelo menos uma molécula de RNA. e) Sentido do movimento do aparato de transcrição na molécula de DNA. f) Localização aproximada do promotor. g) Possível localização de um terminador. h) Sentidos upstream e downstream. i) Moléculas de RNA polimerase (use pontos para representar essas moléculas).