Pré e Pós Teste - Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

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Pré e Pós Teste - Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) 1
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Pré e Pós Teste - Reação 
em Cadeia da Polimerase 
(PCR)
PRÉ TESTE
1. A técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR), a mais 
utilizada para amplificação do DNA in vitro, revolucionou o 
acesso às informações genéticas. Com relação a essa 
técnica, assinale a opção correta.
A. Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridizam com 
moléculas de DNA dupla-fita separadas;
B. Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua 
atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para 
desnaturar a molécula de DNA;
C. A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas.
2. Considere que um projeto de pesquisa em biologia está sob 
análise, para que sejam constatadas sua viabilidade e a 
adequação dos recursos obtidos para sua realização. O 
projeto visa à expressão de determinado gene humano em um 
microrganismo e à purificação da proteína de interesse. A 
metodologia proposta para o desenvolvimento do projeto 
envolve reações catalisadas por DNA polimerases 
termoestáveis, na presença de oligonucleotídeos, utilizados 
como primers, e nucleotídeos livres, sendo realizadas em 
tubos de polipropileno. Depois de outras etapas, é proposta 
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a inserção dos oligonucleotídeos amplificados em 
microrganismos e a ligação da proteína expressa a um 
anticorpo específico. Em relação às reações catalisadas 
pela DNA polimerase mencionadas no texto, assinale a opção 
correta.
A. Para que as reações de amplificação possam ser concluídas, 
é imprescindível a adição de DNA ligase;
B. A metodologia descrita no texto é compatível com a técnica 
de PCR;
C. O texto permite concluir que as reações descrevem a 
clonagem de um cromossomo.
3. Por meio da PCR, uma sequência de DNA pode ser amplificada 
milhões ou bilhões de vezes, produzindo cópias suficientes 
de DNA para serem analisadas por outras técnicas, como o 
sequenciamento, ou digeridas por enzimas de restrição e 
clonadas em um plasmídeo. Existem recomendações específicas 
para a construção de primers, tais como: assegurar relação 
entre bases purinas e pirimidinas entre 40% e 60%; procurar 
sequência do primer com maior concentração de bases G/C na 
extremidade 5’ e menor concentração (um C ou um G) na 
porção 3’; evitar trincas de bases repetidas. Assinale a 
alternativa correta.
A. Os primers devem ser complementares em sua composição, ou 
seja, deverá haver uma interação intermolecular entre eles;
B. É necessário estabelecer o tamanho entre 10 e 15 bases de 
cada primer;
C. É crucial que as temperaturas de anelamento dos dois 
primers sejam próximas.
4. A PCR é uma técnica com múltiplas aplicações na biologia 
molecular. A partir de uma molécula de DNA inicial, têm-se 
milhões de cópias do fragmento de DNA desejado. Em sua 
primeira etapa, ocorre a desnaturação da dupla-fita de DNA 
em fitas simples, pelo aumento da temperatura (95°C). Na 
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segunda etapa, a temperatura é reduzida, para que os 
oligonucleotídeos (primers) se liguem às regiões 
complementares. Na terceira etapa, a enzima DNA polimerase 
reconhece os primers ligados e catalisa a polimerização das 
fitas, inserindo os nucleotídeos e formando novas fitas de 
DNA. Esse ciclo é repetido de 30 a 40 vezes, de forma que o 
fragmento de DNA é amplificado. Ao aumentar e reduzir a 
temperatura, as ligações entre as fitas da molécula de DNA 
são desfeitas e refeitas, respectivamente. Que tipo de 
ligação presente na molécula de DNA permite esse fenômeno?
A. Ligação fosfodiéster;
B. Ligação de hidrogênio;
C. Ligação covalente.
5. Em exames clínicos, a técnica de amplificação de DNA pela 
PCR é muito utilizada. No diagnóstico de infecção de um 
paciente por um determinado vírus com genoma de DNA, por 
exemplo, a técnica permite a amplificação específica de 
material genético do vírus. O que garante a especificidade 
dessa reação?
A. A DNA polimerase do próprio vírus, que amplifica a 
sequência do DNA viral;
B. Os sais e nucleotídeos fosforilados do tampão empregado, 
que reconhecem o DNA viral;
C. Os oligonucleotídeos iniciadores, complementares à 
sequência do DNA viral.
PÓS TESTE
1. A técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) permitiu 
uma grande evolução na ciência e na medicina. Considerando 
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a importância da PCR na ciência, assinale a alternativa 
correta.
A. A técnica da PCR consiste em uma amplificação inespecífica 
utilizando um iniciador (primer) que limita o espaço a ser 
polimerizado pela Taq polimerase;
B. A PCR consiste em uma ciclagem de temperaturas com o 
propósito de desnaturação, anelamento dos iniciadores e 
extensão pela DNA polimerase termoestável;
C. O número de ciclos da PCR não é o limitante para amplificar 
o DNA pesquisado, pois a Taq polimerase consegue fazer 
milhares de cópias do fragmento gênico nos primeiros cinco 
ciclos da PCR.
2. A técnica da PCR é muito utilizada para identificação 
molecular, sendo voltada também para as áreas forenses. A 
respeito dessa utilização, assinale a alternativa correta.
A. Apenas o DNA extraído de células vivas e tecidos saudáveis 
pode ser analisado por PCR, para fins de identificação 
molecular dentro da área das ciências forenses, excluindo o 
DNA de amostras mortas;
B. Utilizando a PCR como método ouro de identificação 
molecular, peritos podem chegar a conclusões de crimes, por 
exemplo, amplificando uma região do DNA e comparando com uma 
amostra de um suspeito;
C. As ciências forenses preferem utilizar metodologias 
voltadas para a identificação de proteínas, pois as sequências 
dos aminoácidos conseguem evidenciar e diferenciar indivíduos 
muito melhor do que as sequências nucleotídicas.
3. A PCR inclui um protocolo bem estabelecido, contendo 
reagentes essenciais para a catálise das reações. Com base 
em seus conhecimentos, assinale a alternativa que descreve 
por completo os reagentes necessários para a PCR.
A. Taq DNA polimerase, DNA-molde, íons de magnésio e água;
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B. DNA-molde, íons de magnésio, água e iniciadores;
C. Iniciadores, íons de magnésio, água, Taq DNA polimerase, 
DNA-molde e nucleotídeos livres.
4. A técnica da PCR é baseada em uma ciclagem de temperaturas 
específicas que determinam o sucesso da reação. Todo esse 
processo é altamente controlado e, se houver alguma 
mudança, erros catalíticos podem ocorrer. Com base em seus 
conhecimentos a respeito das ciclagens durante a PCR, 
assinale a alternativa correta.
A. Existem três temperaturas diferentes na reação, sendo que a 
primeira requer a desnaturação do DNA, ocorrendo a 72 °C;
B. Existem duas temperaturas diferentes na reação, ocorrendo a 
desnaturação do DNA a 95 °C e a polimerização a 72 °C;
C. Existem três temperaturas diferentes na reação, sendo a 
primeira a 95 °C, com a desnaturação do DNA, a segunda 
ocorrendo normalmente, entre 55 °C e 60 °C, permitindo o 
anelamento dos iniciadores (primers), e a última a 72 °C, com 
a atividade de polimerização da Taq DNA polimerase.
5. A primeira versão publicada do genoma humano foi em 2003, 
graças ao sequenciamento do DNA e à PCR.A respeito de sua 
importância e técnica, assinale a alternativa correta.
A. Os principais objetivos do projeto genoma humano consistiam 
em identificar todos os genes e mapeá-los nos cromossomos. Com 
isso, utilizou-se a PCR para analisar a variação genética 
entre humanos;
B. As mutações podem ser identificadas pela PCR, discriminando 
o nível de bases nitrogenadas alteradas entre as amostras 
pesquisadas, como, por exemplo, as mutações que trocam os 
nucleotídeos;
C. A facilidade de execução da PCR abre expectativas 
científicas para o conhecimento de genes de diversas espécies, 
como o coronavírus da pandemia de covid-19.