Ed
há 2 semanas
Vamos analisar as alternativas sobre o sequenciamento de DNA, especialmente o método de Sanger, que é o mais clássico: A) Incorreta. No método de Sanger, os fragmentos são de diferentes comprimentos, terminando em nucleotídeos marcados, mas não necessariamente começam em um ponto comum com todos os quatro nucleotídeos nas extremidades. B) Incorreta. O primer é colocado na extremidade 3' da cadeia molde para que a síntese ocorra na direção 5' para 3', não na extremidade 5'. C) Correta. Após a reação de sequenciamento, os fragmentos terminados em diferentes nucleotídeos, cada um marcado com fluoróforos distintos, são separados por eletroforese capilar, permitindo a leitura das cores para determinar a sequência. D) Incorreta. Os nucleotídeos modificados (ddNTPs) não possuem o grupo 3'-OH, o que impede a adição de novos nucleotídeos, mas isso é uma característica fundamental para o término da síntese, não um impedimento geral. E) Incorreta. O método de Sanger tradicionalmente usava substâncias radioativas; a marcação com fluoróforos foi uma evolução posterior. Portanto, a alternativa correta é: C) Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores.