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O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta.A Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades.B Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5' de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo.C Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores.D Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3' -OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase.E O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da
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Ewerton Gáspio Bueno

há 2 semanas

Respostas

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há 2 semanas

Vamos analisar as alternativas sobre o sequenciamento de DNA, especialmente o método de Sanger, que é o mais clássico: A) Incorreta. No método de Sanger, os fragmentos são de diferentes comprimentos, terminando em nucleotídeos marcados, mas não necessariamente começam em um ponto comum com todos os quatro nucleotídeos nas extremidades. B) Incorreta. O primer é colocado na extremidade 3' da cadeia molde para que a síntese ocorra na direção 5' para 3', não na extremidade 5'. C) Correta. Após a reação de sequenciamento, os fragmentos terminados em diferentes nucleotídeos, cada um marcado com fluoróforos distintos, são separados por eletroforese capilar, permitindo a leitura das cores para determinar a sequência. D) Incorreta. Os nucleotídeos modificados (ddNTPs) não possuem o grupo 3'-OH, o que impede a adição de novos nucleotídeos, mas isso é uma característica fundamental para o término da síntese, não um impedimento geral. E) Incorreta. O método de Sanger tradicionalmente usava substâncias radioativas; a marcação com fluoróforos foi uma evolução posterior. Portanto, a alternativa correta é: C) Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores.

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