Exercícios de fixação Virologia

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ - Setor de Palotina
	Disciplina: Microbiologia Geral 
	Professor(a): Adriana Fiorini Rosado
EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO VIROLOGIA
1) Como se denomina o tipo de vírus que ataca bactérias?
a) Intracelular obrigatório.
b) Bactericida.
c) Bacteriose.
d) Bacteriófago.
2) Os vírus são formados basicamente por moléculas de ácido nucleico, que pode ser DNA ou RNA, envoltas por proteínas. A capa de proteína que envolve o ácido nucleico é chamada de:
a) Nucleocapsídio.
b) Envelope viral.
c) Interferon.
d) Capsídeo.
e) Capsômero.
3) Atualmente, muitas doenças têm preocupado a população mundial, tais como a AIDS, a febre amarela, o possível retorno da varíola e, mais recentemente, a SARS. Todas elas são causadas por vírus, e sobre esses organismos é INCORRETO afirmar que
a) são, estruturalmente, semelhantes às bactérias, podendo apresentar DNA ou RNA como material genético.
b) apresentam ciclos de vida lítico ou lisogênico. No ciclo lítico, determinam a destruição da célula infectada.
c) comandam o metabolismo celular do hospedeiro para a produção de proteínas de seu capsídeo e duplicação do seu material genético.
d) apresentam a enzima transcriptase reversa, quando têm RNA como material genético, que produz um DNA viral para ser integrado ao DNA do hospedeiro.
e) são parasitas obrigatórios, mas alguns podem sobreviver cristalizados por muitos anos.
4) Considerando os vírus, assinale V (verdadeiro) ou F (falso) para as alternativas. 
a) Nos vírus, a informação genética pode ser guardada no DNA ou no RNA, podendo esses dois tipos de ácidos nucleicos ser encontrados tanto na forma de fita simples, quanto de fita dupla (V). 
b) No ciclo lisogênico, o DNA viral duplica-se somente quando o genoma celular se duplicar (V). 
c) Apenas os vírus envelopados penetram na célula hospedeira por fusão com a membrana celular (V)
d) Nos vírus não envelopados, o processo de liberação da célula hospedeira ocorre por brotamento ou exocitose (F)
5) Sobre os vírus, assinale a alternativa INCORRETA. 
a) Vírus envelopados apresentam um revestimento lipoproteico ao redor do nucleocapsídeo. b) O material genético dos vírus pode ser de RNA ou DNA, dependendo do tipo de vírus. 
c) Vírus apresentam ação específica, e os que infectam bactérias são os bacteriófagos. 
d) O vírus da AIDS é um retrovírus, e seu RNA é transcrito em DNA pela transcriptase reversa. 
e) Os bacteriófagos têm dois ciclos reprodutivos, o ciclo lítico e o lipoalergênico.
6) Explique a técnica de PCR convencional e a RT-PCR
A técnica de PCR permite a detecção e amplificação de uma sequência de DNA ou RNA utilizando o DNA molde, 1 ou mais pares de primers (iniciadores), desoxinucleotídeos trifosfatados – dNTPs, Tampão da enzima, Taq DNA Polimerase e MgCl2. Misturam-se todos estes componentes e coloca em um termociclador, onde ocorrerão 3 etapas, sendo elas: desnaturação do DNA, anelamento dos primers e extensão da fita de DNA recém-sintetizada. 1 – Desnaturação: O DNA genômico contendo a sequência a ser amplificada é desnaturado por aquecimento a cerca de 95°C por cerca de 30 segundos. 2 – Anelamento ou hibridização: Após a separação das fitas, um par de iniciadores ou primers (uma fita de DNA específica para o gene que se quer estudar) complementam a fita oposta da sequência de DNA a ser amplificada. A reação ocorre entre 50-60 ºC. 3 – Extensão ou polimerização: Com o molde já identificado, a enzima DNA-polimerase adiciona as bases complementares, formando uma nova fita e então tem-se novamente a duplicação da fita de DNA. Esse processo acontece a uma temperatura de 72°C. A RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR), utilizada antes da PCR a enzima de origem viral transcriptase reversa para converter RNA em cDNA, seguido de amplificação por uma PCR convencional.
7) Quais as três principais formas de cultivo de vírus animais, de bactérias e de plantas?
Animais: cultivo em ovos embrionados, células em cultura e cultivo em animais de biotério.
Bactérias: inserção de vírus lisogênicos em bactérias. Com o cultivo das bactérias em meios de cultura, os bacteriófagos lisogênicos irão se multiplicar, sem provocar a morte da bactéria.
Plantas: obtenção de protoplastos, infecção das plantas com o vírus e cultivo de células vegetais in vitro.
8) Quais as principais diferenças entre linhagens celulares (para cultivo de vírus), contínua, primária e embrionária?
Contínua: células de linhagem tumoral (crescimento contínuo)
Embrionárias ou diplóides: crescimento intermediário (por ex.: obtidas de cordão umbilical)
Primárias: células de ciclo de vida rápido, de tecidos normais.
9) Quais as principais características dos vírus?
10) O que significa dizer que os vírus apresentam tropismo celular?
A presença ou ausência de receptores (proteínas ou glicoproteínas) nas células hospedeiras determina o tropismo viral, ou seja, o tipo de célula em que são capazes de infectar. Ex.: vírus HIV só reconhece os receptores CD4 de células humanas, mesmo estando presentes também em outros animais.
11) Explique qual o procedimento e a finalidade de se obter placas de lise quando se cultivam bacteriófagos:
Mistura-se a amostra que se acredita que haja bacteriófago com bactérias em ágar fundido. Espalha-se a mistura numa placa de Petri que contém ágar solidificado. Depois de vários ciclos de multiplicação viral são destruídas as bactérias vizinhas às partículas virais originais. Isso determina o aparecimento de áreas claras, as partes claras correspondem a bactérias lisadas e as túrgidas a bactérias que ainda não foram mortas pelo vírus ou não foram infectadas. Cada placa de lise corresponde teoricamente a uma das partículas virais iniciais. A finalidade é se obter as UFP/ml (unidades formadoras de placas), para a contagem dos bacteriófagos).
12) Descreva as principais diferenças entre vírus envelopados, não envelopados, icosaédricos, helicoidais e complexos.
Os helicoidais parecem com fios longos e enrolados, o capsídeo é um cilindro helicoidal oco.
Os icosaédricos têm a estrutura de icosaedro, com os capsômeros formando triângulos equiláteros.
Os envelopados possuem um envelope (composto de lipídeos, carboidratos e proteínas) envolvendo o capsídeo. 
Os vírus complexos são aqueles que não se enquadram em nenhuma das outras classificações. Por exemplo, o Bacteriófago que possui um capsídeo icosaédrico e uma bainha helicoidal.
13) O que é a fagoterapia?
Fagoterapia a utilização dos bacteriófagos e suas aplicações na cura das doenças. A técnica consiste em inocular no paciente estes bacteriófagos, que acabam matando as bactérias causadoras de doenças. 
14) Como ocorre a entrada (adsorção) e a saída dos vírus envelopados e não envelopados, das células hospedeiras?
Envelopados: Entrada por fusão com a membrana plasmática ou via endossomos e saída por brotamento.
Vírus não envelopados: Entrada somente via endocitose mediada por receptor (pela formação de endossomos também) e saída por lise (destruição) da célula.
15) Estude cada etapa do ciclo de replicação de um vírus de DNA e de um retrovírus, utilizando as figuras abaixo:
 
19) 
 Vírus de DNA 
 Retrovírus 
16) Explique os processos de infecção viral:
Adsorção
As proteínas de fixação virais reconhecem receptores específicos, que podem ser proteínas, carboidrados ou lipídios, na parte externa da célula. 
Penetração
O vírus entra na célula e várias maneiras de acordo com a natureza do vírus.
Desencapamento ou desmontagem
Os ácidos nucléicos tem que estar suficientemente desencapados para que a replicação viral possa se iniciar neste estágio. 
Biossíntese:
Síntese de ácido nucléico viral e proteínas
Montagem/maturação
Novas partículas virais são montadas. Deve haver uma etapa de maturação que se segue ao processo inicial de montagem.
Liberação
Vírus pode ser liberado devido à liseda célula, ou, se envelopado, pode brotar da célula.