BIOLOGIA MOLECULAR E FARMACOGENETICA

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1.
		O surgimento da genômica, na virada do milênio, e sua expansão tecnológica nas duas décadas seguintes permitiram o acúmulo de quantidades enormes de dados genéticos. Aspectos éticos sobre a informação genética obtida têm sido levantados. Sobre discriminação genética, é correto afirmar que:
	
	
	
	Planos e seguros de saúde são responsáveis pela execução de testes genéticos antes da assinatura de contratos de cobertura.
	
	
	Indivíduos têm o direito a cobrarem às empresas por testes genéticos antes de entrar no emprego.
	
	
	As informações genéticas são de propriedade pública e podem ser exigidas dos cidadãos a qualquer momento.
	
	
	Empresas têm o direito de exigir exames genéticos para determinar a elegibilidade do candidato ao emprego.
	
	
	Nenhum indivíduo pode sofrer discriminação genética ou ser compelido a ter testes feitos.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:28:09
		Explicação:
A resposta certa é:Nenhum indivíduo pode sofrer discriminação genética ou ser compelido a ter testes feitos.
	
	
	 
		
	
		2.
		Questões éticas envolvendo a farmacogenética e farmacogenômica incluem os pontos abaixo, exceto:
	
	
	
	A inequidade no acesso a tratamento farmacogenético.
	
	
	A redução de indivíduos ao seu mero perfil genético.
	
	
	A existência de resolução que proíbe a aplicação da farmacogenética.
	
	
	A inequidade nas populações-alvo de pesquisa em farmacogenética.
	
	
	A discriminação genética de portadores de doenças e polimorfismos farmacogenéticos.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:30:25
		Explicação:
A resposta certa é:A existência de resolução que proíbe a aplicação da farmacogenética.
	
	
	 
		
	
		3.
		(Adaptada de VUNESP - 2018 - Prefeitura de Guararapes - SP -Farmacêutico) A farmacogenética permite estudar a variabilidade individual ao tratamento com medicamentos devida a fatores genéticos. A tabela a seguir apresenta um esquema que relaciona a presença de polimorfismo nos genes da enzima citocromo P450 e a velocidade de metabolização de drogas por esse sistema.
CYP2D6 -converte codeína em morfina, seu metabólito ativo.
CYP2D6 -metaboliza e inativa fluoxetina.
CYP2C19 -metaboliza e inativa sertralina.
Com base nas informações do quadro e de alguns fármacos metabolizados por esse sistema, assinale a alternativa correta.
	
	
	
	Os metabolizadores intermediários de CYP2C19 são os que estão mais sujeitos aos efeitos colaterais da sertralina.
	
	
	A maioria da população caucasiana testada apresenta metabolismo reduzido para as enzimas CYP2D6 e CYP2C19.
	
	
	Pode-se esperar que metabolizadores ultrarrápidos de CYP2D6 sofram mais efeitos tóxicos da fluoxetina do que os metabolizadores pobres.
	
	
	Metabolizadores normais de CYP2D6 são os mais sujeitos aos efeitos adversos da fluoxetina.
	
	
	Metabolizadores lentos de CYP2D6 não devem responder bem ao tratamento com codeína.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:31:47
		Explicação:
A resposta certa é:Metabolizadores lentos de CYP2D6 não devem responder bem ao tratamento com codeína.
	
	
	 
		
	
		4.
		A farmacogenética desdobra-se na farmacogenômica, com uma abordagem mais completa das interações genéticas e suas dinâmicas. Tem-se, por exemplo, a farmacogenômica do tratamento com varfarina, afetado geneticamente tanto em sua farmacocinética quanto farmacodinâmica. Sobre a farmacogenômica, é correto afirmar que:
	
	
	
	É uma das ferramentas mais bem estabelecidas em si, com a capacidade de detecção de múltiplos genótipos de uma única vez.
	
	
	Necessita de técnicas robustas e clássicas, como o sequenciamento Sanger, para sua aplicação.
	
	
	É um dos alicerces da medicina de precisão, um ramo que vem crescendo para personalização do tratamento.
	
	
	É sinônimo da farmacogenética, atuando da detecção de polimorfismos da mesma forma.
	
	
	Baseia-se na detecção de haplótipos de genes associados e contíguos no mesmo cromossomo homólogo.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:33:50
		Explicação:
A resposta certa é: É um dos alicerces da medicina de precisão, um ramo que vem crescendo para personalização do tratamento.
	
	
	INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR
	 
		
	
		5.
		Leia com atenção a definição seguinte. É a ciência estuda as variações nos traços fenotípicos pela ação de fatores externos ou ambientais que afetam a expressão gênica de modo reversível. Em relação ao termo definido, assinale a opção correta.
	
	
	
	Epigenética.
	
	
	Neurogenética.
	
	
	Genética.
	
	
	Exogenética.
	
	
	Transgenética.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:35:38
		Explicação:
A genética é o estudo dos genes, das características hereditárias de determinados organismos, guardadas nas moléculas de DNA. A epigenética é o estudo das características que vão acima dos genes, pois ¿epi¿ deriva do radical grego que indica a posição superior. Essa ciência estuda as variações nos traços fenotípicos pela ação de fatores externos ou ambientais que afetam a expressão gênica de modo reversível. A compreensão da epigenética pode nos ajudar a estabelecer relações entre a forma com que vivemos e o surgimento de determinadas doenças.
	
	
	 
		
	
		6.
		A origem da vida é uma das questões mais polêmicas e que intrigam a humanidade. Como a vida originou-se na Terra? Na tentativa de responder essa questão, surgiram várias hipóteses.
(Origem da Vida. Disponível em:https://www.biologianet.com/origem-universo-vida. Acessado em 21/09/2022).
Uma das hipóteses se baseia na ideia da formação espontânea. Assinale a alternativa que contém o nome dessa teoria.
	
	
	
	Criacionismo.
	
	
	Teoria da panspermia.
	
	
	Lamarckismo.
	
	
	Teoria de Oparin e Haldane
	
	
	Darwinismo.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:36:41
		Explicação:
Dentre as teorias existentes, uma delas, a teoria de Oparin e Haldane, era justamente a ideia da formação espontânea de pequenas moléculas orgânicas, as quais, com o tempo, passaram a se organizar de maneira cada vez mais complexa até se replicarem e evoluírem, formando as células primitivas. A teoria da panspermia surgiu a partir da observação de compostos orgânicos presentes em meteoritos e ganhou força a partir de 1997 com a análise do Meteorito de Muchinson. Os pesquisadores encontraram diversos aminoácidos e adenina, presente no nosso DNA, que datavam de aproximadamente 7 bilhões de anos, sendo assim mais antigos que nosso próprio planeta, que possui cerca de 4,5 bilhões de anos. Apesar de muito interessante, essa teoria não possui evidências científicas suficientes para explicar a origem da vida no nosso planeta, diferente da teoria de Oparin e Haldane.O criacionismo é uma hipótese defendida por religiosos que afirmam que Deus criou o Universo e todos os seres nele viventes, a partir do nada, conforme está descrito no ¿Gênesis¿, livro presente na Bíblia. Essa hipótese é comumente ligada à crença religiosa, não sendo aceita pela comunidade acadêmica. O Darwinismo e o Lamarckismo são teorias da evolução das espécies.
	
	
	 
		
	
		7.
		Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que:
 
	
	
	
	Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo.
	
	
	Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento.
	
	
	Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula.
	
	
	As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide.
	
	
	O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:40:27
		Explicação:
A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide.
	
	
	 
		
	
		8.
		Considerando um trecho de uma molécula deDNA fita dupla, podemos afirmar que:
	
	
	
	Se existe 20% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina.
	
	
	Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 10% de uracila.
	
	
	Se existe 25% de guanina, logo este trecho também possui 15% de timina.
	
	
	Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina.
	
	
	Se existe 10% de adenina, logo este trecho também possui 20% de timina.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:42:08
		Explicação:
A reposta correta é :Se existe 35% de timina, logo este trecho também possui 15% de citosina.
	
	
	ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS
	 
		
	
		9.
		O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é:
	
	
	
	Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução.
	
	
	Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA.
	
	
	Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível.
	
	
	Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA.
	
	
	Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:44:47
		Explicação:
A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução.
	
	
	 
		
	
		10.
		Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem:
	
	
	
	Por etapas
	
	
	Sistemática
	
	
	Aleatória simples
	
	
	Probabilística
	
	
	Não-probabilística
	Data Resp.: 26/10/2023 13:45:55
		Explicação:
A resposta correta é: Sistemática
	
	
	 
		
	
		11.
		Após completar a extração do DNA de uma amostra de sangue não há como saber se a extração foi devidamente realizada a não ser que se faça um controle de qualidade do material extraído. Com relação ao controle de qualidade podemos afirmar que:
	
	
	
	A etapa de quantificação apenas pode ser realizada com o uso da técnica de fluorometria.
	
	
	É composto por três etapas: quantificação, coloração e validação.
	
	
	Deve ser realizado a partir da observação, estabelecimento de hipóteses, análise, conclusões e divulgação de um relatório final.
	
	
	A eletroforese é feita para medir a integridade do extraído e tem como princípio diferenciar a solubilidade de cada componente.
	
	
	A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:47:13
		Explicação:
A resposta correta é: A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra.
	
	
	 
		
	
		12.
		Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA:
	
	
	
	O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma.
	
	
	A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias.
	
	
	O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina.
	
	
	A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA.
	
	
	Tubos de vidro devem ser evitados.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:51:00
		Explicação:
A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias.
	
	
	AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA
	 
		
	
		13.
		A curva padrão desempenha um papel essencial na quantificação absoluta de um DNA alvo em uma amostra. Qual é a finalidade da curva padrão em quantificação absoluta de DNA alvo?
	
	
	
	Estabelecer a linearidade e eficiência da amplificação para cálculos precisos.
	
	
	Calibrar a concentração de reagentes na reação de amplificação.
	
	
	Identificar a sequência específica do DNA alvo.
	
	
	Avaliar a presença de contaminantes na amostra.
	
	
	Determinar a temperatura ótima de amplificação do DNA alvo.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:53:33
		Explicação:
A curva padrão é essencial para a quantificação absoluta de DNA alvo, permitindo relacionar o ciclo de limiar (Ct) de uma amostra desconhecida com a quantidade de DNA presente nela. Através da linearidade da curva e da eficiência de amplificação, podemos calcular com precisão a concentração de DNA nas amostras, garantindo resultados confiáveis.
	
	
	 
		
	
		14.
		Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas.
Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta.
 
	
	
	
	A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa.
	
	
	A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase.
	
	
	A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA.
	
	
	Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G.
	
	
	O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:55:30
		Explicação:
A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase.
	
	
	 
		
	
		15.
		Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição - restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados.
Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta.
	
	
	
	Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter  o cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações.
	
	
	Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente.
	
	
	O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas.
	
	
	Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos.
	
	
	A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:56:45
		Explicação:
A resposta correta é: Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos.
	
	
	 
		
	
		16.
		No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistênciaa antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas.
A partir das informações apresentadas, conclui-se que:
	
	
	
	O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral.
	
	
	o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra.
	
	
	A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico.
	
	
	O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência.
	
	
	A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:57:13
		Explicação:
A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra.
	
	
	SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO
	 
		
	
		17.
		O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a retirada de genes de uma espécie e a posterior introdução deles em outro indivíduo de espécie diferente. Com essa ferramenta em mãos, o homem foi capaz de reproduzir genes de interesse.
COSTA, Marco Antônio F.; COSTA, Maria de Fátima B. Biossegurança de OGM: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Publit, 2009, p. 154, com adaptações.
Com base nos conceitos de organismos geneticamente modificados (OGMs), assinale a alternativa correta.
	
	
	
	Os OGMs, na respectiva totalidade, são considerados transgênicos.
	
	
	Os transgênicos são produzidos através da alteração de genes em organismos adultos, sendo a modificação genética transmitida de uma célula a outra através de transformação.
	
	
	Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica.
	
	
	Organismos que tiveram genes alterados apenas quanto à respectiva posição ou expressão são transgênicos
	
	
	O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de questionamento em relação ao uso dos OGMs, considerando os inúmeros benefícios trazidos por eles para o setor.
	Data Resp.: 26/10/2023 13:59:57
		Explicação:
A resposta correta é: Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica.
	
	
	 
		
	
		18.
		Alguns processos biotecnológicos podem ser empregados na produção de bioderivados, como é o caso dos ensaios de hibridização. Qual nome é dado para o processo de hibridização em que o DNA é fixado e transferido para uma membrana de nitrocelulose ou nylon?
	
	
	
	​​​Northern Blot
	
	
	​​​​Southern Blot
	
	
	Hibridização in situ
	
	
	​​​​Western Blot
	
	
	​​​​Hibridização por microarray
	Data Resp.: 26/10/2023 14:00:24
		Explicação:
A resposta correta é: ​​​​Southern Blot
	
	
	 
		
	
		19.
		As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta.
	
	
	
	​​​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	
	
	​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	
	
	Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger.
	
	
	​​​Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento).
	
	
	​​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	Data Resp.: 26/10/2023 14:01:44
		Explicação:
A resposta correta é: ​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	
	
	 
		
	
		20.
		A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de doenças genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne, e infecciosas, como a infecção por papilomavírus humano (HPV) em colo uterino. Sobre as técnicas de hibridização in situ, é incorreto afirmar que:
	
	
	
	​​​Permite a identificação com precisão do local na célula ou tecido em que a sequência-alvo está;
	
	
	​​​​Exigem leitura através de microscópios especializados.
	
	
	​​​​Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo;
	
	
	​​​As sondas podem ser marcadas com enzimas, fluoróforos e radioatividade;
	
	
	​​​​São feitas em tecidos e células fixadas e permeabilizadas, para preservação das estruturas celulares e entrada das sondas, respectivamente;
	Data Resp.: 26/10/2023 14:03:28
		Explicação:
A resposta correta é: ​​​​Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo;