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Teste deTeste de ConhecimentoConhecimento avalie sua aprendizagemavalie sua aprendizagem A origem da vida é uma das questões mais polêmicas e que intrigam a humanidade. Como a vida originou-se na Terra? Na tentativa de responder essa questão, surgiram várias hipóteses. (Origem da Vida. Disponível em:https://www.biologianet.com/origem-universo-vida. Acessado em 21/09/2022). Uma das hipóteses se baseia na ideia da formação espontânea. Assinale a alternativa que contém o nome dessa teoria. BIOLOGIA MOLECULAR LUCIO LOPES DA SILVA JUNIOR 202205118959 BIOLOGIA MOLECULAR 2022.4 FLEX (GT) / EX Prezado (a) Aluno(a), Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha. Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS. INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 1. Lamarckismo. Criacionismo. Teoria de Oparin e Haldane Teoria da panspermia. Darwinismo. Data Resp.: 25/10/2022 14:50:11 Explicação: Dentre as teorias existentes, uma delas, a teoria de Oparin e Haldane, era justamente a ideia da formação espontânea de pequenas moléculas orgânicas, as quais, com o tempo, passaram a se organizar de maneira cada vez mais complexa até se replicarem e evoluírem, formando as células primitivas. A teoria da panspermia surgiu a partir da observação de compostos orgânicos presentes em meteoritos e ganhou força a partir de 1997 com a análise do Meteorito de Muchinson. Os pesquisadores encontraram diversos aminoácidos 25/10/2022 15:03 Página 1 de 7 A metilação e a acetilação tem papel importante na compactação e descompactação do DNA em eucariotos, devido a sua modulação das histonas. Sobre o processo de metilação assinale alternativa correta. O operon Lac tem como função principal: e adenina, presente no nosso DNA, que datavam de aproximadamente 7 bilhões de anos, sendo assim mais antigos que nosso próprio planeta, que possui cerca de 4,5 bilhões de anos. Apesar de muito interessante, essa teoria não possui evidências científicas suficientes para explicar a origem da vida no nosso planeta, diferente da teoria de Oparin e Haldane.O criacionismo é uma hipótese defendida por religiosos que afirmam que Deus criou o Universo e todos os seres nele viventes, a partir do nada, conforme está descrito no ¿Gênesis¿, livro presente na Bíblia. Essa hipótese é comumente ligada à crença religiosa, não sendo aceita pela comunidade acadêmica. O Darwinismo e o Lamarckismo são teorias da evolução das espécies. 2. Adição e remoção de grupamentos metila dificulatm a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional. Remoção de grupamentos metila dificultam a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional. Adição de grupamentos metila favorecem a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional. Remoção de grupamentos metila favorecem a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional. Adição de grupamentos metila dificultam a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional. Data Resp.: 25/10/2022 14:49:26 Explicação: A compactação e descompactação do DNA em eucariotos são dadas pelas proteínas histonas, sendo um tipo de regulação gênica. As histonas ditam a compactação da cromatina e são moduladas por pequenas alterações químicas em sua estrutura, sendo elas: metilação (adição de grupamentos metila favorecem a compactação do DNA pelas histonas, impossibilitando a atuação da maquinaria transcricional) e a acetilação (a adição de grupamentos acetil favorecem a descompactação do DNA, possibilitando a atuação da maquinaria de transcrição. 3. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Data Resp.: 25/10/2022 14:51:35 Explicação: A resposta correta é: Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. 25/10/2022 15:03 Página 2 de 7 Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS 4. O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2- 8°C até a extração do DNA. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Tubos de vidro devem ser evitados. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. Data Resp.: 25/10/2022 14:52:36 Explicação: A resposta correta é: A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. 5. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Data Resp.: 25/10/2022 14:53:16 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. 25/10/2022 15:03 Página 3 de 7 Na extração de RNA todos os cuidados citados abaixo devem ser tomados exceto: Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. 6. Uso de solução fenol/clorofórmio em pH ácido. É preferível o uso de um aparelho sonicador para a quebra das membranas celulares, ao invés do uso de detergentes. O RNA deve ser rapidamente congelado em nitrogênio líquido. Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. Todo o material deve ser RNAse free e lavado com soluções neutralizadoras de RNAses. Data Resp.: 25/10/2022 14:53:53 Explicação: A resposta correta é: Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 7. O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA. Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G. 25/10/2022 15:03 Página 4 de 7 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostraspor PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. A partir das informações apresentadas, conclui-se que: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. Data Resp.: 25/10/2022 14:54:41 Explicação: A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. 8. o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da 25/10/2022 15:03 Página 5 de 7 O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a retirada de genes de uma espécie e a posterior introdução deles em outro indivíduo de espécie diferente. Com essa ferramenta em mãos, o homem foi capaz de reproduzir genes de interesse. COSTA, Marco Antônio F.; COSTA, Maria de Fátima B. Biossegurança de OGM: uma visão integrada. Rio de Janeiro: Publit, 2009, p. 154, com adaptações. Com base nos conceitos de organismos geneticamente modificados (OGMs), assinale a alternativa correta. estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. Data Resp.: 25/10/2022 15:02:24 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 9. Os OGMs, na respectiva totalidade, são considerados transgênicos. Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de questionamento em relação ao uso dos OGMs, considerando os inúmeros benefícios trazidos por eles para o setor. Organismos que tiveram genes alterados apenas quanto à respectiva posição ou expressão são transgênicos Os transgênicos são produzidos através da alteração de genes em organismos adultos, sendo a modificação genética transmitida de uma célula a outra através de transformação. Data Resp.: 25/10/2022 14:56:27 Explicação: A resposta correta é: Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica. 25/10/2022 15:03 Página 6 de 7 As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. 10. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). Data Resp.: 25/10/2022 14:58:06 Explicação: A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Não Respondida Não Gravada Gravada Exercício inciado em 25/10/2022 14:13:14. 25/10/2022 15:03 Página 7 de 7
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