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Professor Dr. José Oliveira dos Santos Disciplina de Bioquímica CURSO: FARMÁCIA Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas: Importância Propriedades Classificação Funções Doenças associadas Conteúdo da aula Quimotripsina Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas Manutenção da vida celular - Conjunto de reações químicas, para cumprir exigências fundamentais: Velocidades adequadas à fisiologia celular - a insuficiência na produção ou na remoção de metabólitos pode levar a condições patológicas, Precisam ser altamente específicas, de modo a gerar produtos definidos. Enzimas: Propriedades e funções biológicas São substâncias que aumentam a velocidade das reações químicas. Reações com catalisadores levam ao mesmo produto, mas requer uma energia de ativação menor para ocorrer. Catalisadores Enzimas: Propriedades e funções biológicas São catalisadores biológicos, ou seja, aumentam a velocidade das reações e diminuem a Energia de Ativação. Em sua maior parte, são proteínas. Enzimas Catalase 2 H2O2 → 2 H2O + O2 Peróxido de Hidrogênio Água oxigenada Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Ribozima - Molécula de RNA com capacidade catalítica semelhante às enzimas. Ácido ribonucleico + enzimas = ribozima. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Clivagem do RNA por Ribozimas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Energia de Ativação É a energia mínima necessária para que uma determinada reação química aconteça. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas como catalisadores Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas Podem ser formadas apenas pela cadeia polipeptídica ou em alguns casos necessitam de outros grupos, outros componentes químicos. São os grupos prostéticos. Cofatores São componentes químicos associados: Fe2+, Mg2+, Cu2+, Mn2+, Zn2+ etc. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Cofatores Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas Coenzimas Quando o cofator é uma molécula orgânica é chamada de coenzima. A maioria é derivada de vitaminas, daí a importância do consumo desses micronutrientes. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas Coenzimas Vit. B7 Vit. B5 Vit. B9 Vit. B3 Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas Holoenzima - É a enzima ativa, com seus cofafores ou coenzimas associadas. Apoenzima - É a parte proteica de uma enzima. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas Zimogênio – É a enzima na forma inativa produzida dentro da célula. Exemplos: Enzimas digestivas Pepsinogênio Pepsina Tripsinogênio Tripsina Quimotripsinogênio Quimotripsina (Células do estômago) (Interior do estômago) (Pâncreas) (Pâncreas) (Duodeno) (Duodeno) Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas - Zimogênio Enzimas: Propriedades e funções biológicas Estrutura das Enzimas - Zimogênio Forma inativa de uma enzima Enzimas: Propriedades e funções biológicas Fatores que influenciam as reações enzimáticas pH Ótimo Enzimas: Propriedades e funções biológicas Fatores que influenciam as reações enzimáticas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Fatores que influenciam as reações enzimáticas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Temperatura Ótima Fatores que influenciam as reações enzimáticas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Sítio ativo Sítio ativo ou centro ativo - Região de uma enzima onde ocorrerá uma reação química. Ocorre a atividade catalítica. E + S ES E + P Enzimas: Propriedades e funções biológicas Sítio ativo O sítio ativo tem afinidade pelo substrato e geralmente é específico. Algumas enzimas não são tão específicas e agem sobre um grupo com características semelhantes. Enzimas: Propriedades e funções biológicas Mecanismo de ação das enzimas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Exemplo de enzimas alteradas em condições patológicas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Fenilcetonúria: Deficiência da enzima fenilalanina hidroxilase Enzimas: Propriedades e funções biológicas Enzimas: Propriedades e funções biológicas Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Concentração do substrato Cinética e Inibição enzimática Constante de Michaelis-Menten (KM) KM é a concentração de substrato na qual acontece a metade da velocidade máxima de uma reação. Cinética e Inibição enzimática Inibição Enzimática Inibidores são compostos que se ligam a enzima, afetando sua atividade. Podem ser Irreversíveis ou Reversíveis. Inibidores Irreversíveis: Reagem quimicamente com a enzima. Exemplos: Organofosforados inseticidas – ligam-se a Acetilcolinesterase, havendo aumento de acetilcolina . Ácido acetilsalicílico (AAS) – Inativa as Cicloxigenases (COX 1 e COX 2). Não há produção de prostaglandinas. Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Inibição Enzimática Ácido Acetilsalicílico (AAS) – Inibidor de COX 1 e COX 2 Diclofenaco Celecoxibe Inibidores específicos de COX 2 Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Inibidor Competitivo: Liga-se ao sítio ativo da enzima, inativando-a. Inibidores Reversíveis Cinética e Inibição enzimática Inibidor Incompetitivo: Liga-se em sítios diferentes, mas apenas ao complexo ES já formado. Cinética e Inibição enzimática Inibidor Misto: Liga-se a sítios diferentes, mas pode se ligar tanto na E quanto ao complexo ES já formado. Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Cinética e Inibição enzimática Referências Bibliográficas CAPÍTULO 5 – Enzimas MARZZOCO, Anita; TORRES, Bayardo Baptista. Bioquímica básica. 4ª ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2015. CAPÍTULO 6 – Enzimas NELSON, David. L.; COX, Michael M. Princípios de Bioquímica de Lehninger. Porto Alegre: 6ª ed. Artmed, 2014.