Avaliação I - Individual biologia molecular

Prévia do material em texto

Prova Impressa
GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:883916)
Peso da Avaliação 1,50
Prova 74655520
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 8/2
Nota 8,00
A transcrição reversa é uma reação que ocorre pela ação da enzima transcriptase reversa ou RT. Essa 
enzima é uma DNA polimerase dependente de RNA, ou seja, ela é capaz de sintetizar uma fita de 
DNA utilizando como molde a fita simples de RNA. Sua descoberta se deu a partir da observação de 
que, quando os retrovírus, cujo material genético é um RNA, infectam um hospedeiro, o RNA viral é 
convertido em DNA. Sobre a RT-PCR, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para o processo de transcrição reversa são necessários Oligonucleotídeos sintéticos, os quatro 
dNTPs, a amostra de RNA e os cofatores enzimáticos. Ao invés da Taq DNA polimerase, essa técnica 
utiliza a enzima transcriptase reversa.
PORQUE
II- O objetivo final da técnica é originar o DNA complementar ou cDNA, que é formado por essa 
enzima.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições falsas.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição verdadeira, mas a II é uma proposição falsa.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
A técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) se refere à replicação in vitro de um 
fragmento de DNA. Sobre o PCR, assinale a alternativa CORRETA:
A A ligação dos primers à fita de DNA é denominado como desnaturação.
 VOLTAR
A+ Alterar modo de visualização
1
2
B A enzima DNA polimerase humana é uma das principais responsáveis pelo sucesso da técnica in
vitro.
C O processo de replicação in vitro, depende do uso de primers (oligonucleotídeos sintéticos), com
sequências de 18 a 22 nucleotídeos, que seja complementar ao gene de interesse.
D O processo do PCR não necessita da utilização de nucleotídeos.
O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de 
plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. 
Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a plataforma MinION, avalie as asserções a 
seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a serem 
sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA a 
passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são detectadas.
PORQUE
II- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é 
formada rapidamente.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições falsas.
B A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser 
isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a técnica 
de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de 
diferença. 
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um 
agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. 
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar, 
enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de agarose.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I, II e III estão corretas.
B Somente a sentença II está correta.
C Somente a sentença I está correta.
3
4
D Somente a sentença III está correta.
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática 
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação 
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o 
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia 
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de 
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre 
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta 
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem 
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a opção III está correta.
B Somente a opção I está correta.
C Somente a opção II está correta.
D As opções I, II, III e IV estão corretas.
O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de 
expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR. 
Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
I- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA complementar 
(cDNA).
II- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando 
5
6
como molde uma fita simples de RNA. 
III- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de 
cDNA.
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a sentença II está correta.
B As sentenças I e II estão corretas.
C Somente a sentença III está correta.
D As sentenças I e III estão corretas.
A clonagem de DNA se refere à produção, dentro de uma célula, de diversas cópias de uma 
sequência específica de um fragmento de DNA. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a 
relação proposta entre elas:
I- A clonagem de DNA depende da utilização de um vetor, do fragmento de DNA e, posteriormente, 
de um organismo hospedeiro.
PORQUE
II- O fragmento de DNA de interesse, será inserido em uma molécula de DNA genômico com 
capacidade de autorreplicação (DNA do vetor), originando o DNA recombinante. Essa inserção se dá 
através de enzimas de restrição e enzimas de ligação. 
Assinale a alternativa CORRETA:
A A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C As asserções I e II são proposições falsas.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice Wilkins e 
Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da replicação e transmissão da 
informação genética de uma célula à outra. Sobre o DNA, assinale a alternativa CORRETA:
A O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.
B O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, citosina e
guanina.
C O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si.
D O DNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela pentose, denominada desoxirribose, os
nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato.
7
8
O RNA é uma molécula muito semelhante ao DNA, originado a partir do processo de 
transcrição, em que carrega informações contidas no DNA para fora do núcleo. Essas informações, 
darão origem à síntese de proteínas, através do processo de tradução. Sobre o RNA, assinale a 
alternativa CORRETA:
A O RNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.
B O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeosadenina, timina, citosina e
guanina.
C O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pela pentose denominada como ribose; os
nucleotídeos adenina, uracila, citosina e guanina e fosfato.
D O RNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela desoxirribose, nucleotídeos e fosfato.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de sangue 
no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
9
10
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - III - IV - I.
B IV - III - II - I.
C I - II - IV - III.
D I - II - III - IV.
Imprimir