Método Gram

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Método Gram
- Hans Christian Gram estudou e definiu a 
técnica para corar bactérias em 1884.
- Ele corou lâminas com esfregaços (uma 
“raspa” de determinado lugar do corpo ou de 
uma cultura que se queira fazer a pesquisa) 
com violeta genciana
- Ele percebeu que as bactérias existentes 
nestes esfregaços, uma vez coradas, não 
desbotavam com álcool, se previamente 
fossem tratadas com iodo.
- Aprimorando o método, adicionou “contra-
corantes”, como safranina e fucsina básica
- Esta coloração permite distinguir os mais 
variados tipos de bactérias e que tipo de 
parede celular elas tem (se mais simples ou 
mais complexas, com mais ou menos 
peptideoglicanos)
- O uso dos corantes permite aumentar o 
contraste e evidenciar a estrutura bacteriana.
- O procedimento de coloração de Gram 
permite que as bactérias retenham a cor 
com base nas diferenças nas propriedades 
químicas e físicas da parede celular
- As bactérias contidas no esfregaço podem 
ser classificadas como Gram-positivas 
(aproximadamente de cor roxa) ou Gram-
negativas (aproximadamente de cor 
vermelha) 
- Se for estruturalmente simples a coloração 
será positiva, se for estruturalmente 
complexa a coloração será então negativa
as três etapas principais 
•Coloração com violeta de cristal (um corante
solúvel em água, roxo);
•A descoloração (utilizando etanol / acetona);
•A contra-coloração (utilizando corante 
Safranina, vermelho).
gram-negativas 
- Descoram quando
submetidas à um
solvente orgânico
- Possuem uma 
parede de
peptidoglicano mais
fina, que não retém o cristal violeta durante o
processo, apresentando a cor vermelha no 
final
- Constituídas por uma endotoxina 
denominada LPS (lipopolissacarídeo), 
causadora de patogenicidade
- As proteobactérias compôem a maior parte
das bactérias gram negativas. As principais
são: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
gram-positivas 
- Permanecem
coradas mesmo
quando em contato
com o solvente
- Retém o cristal
violeta devido à
presença de uma espessa camada de 
peptidoglicano em suas paredes celulares
- Possuem a exotoxina rica em ácido 
lipoprotéico que confere aderência à bactéria
- Filo Firmicutes (Bacilos, Estreptococos, 
Estafilococos, Enterococos, Actinobacteria, 
Listeria, etc).
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