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CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINASSAU CACOAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA Acadêmica: Nayara Reis da Silva Gonçalves Matrícula: 36015484 RELATÓRIO DE AULA PRATICA DO EXAME ASLO E VDRL 1- Objetivo ASLO: Método para determinação qualitativa e semi-quantitativa da Anti-Estreptolisina O mediante aglutinação de partículas de látex. VDRL: Pesquisar anticorpos não traponêmicos em soro para diagnostico de sífilis através do método qualitativa e semi-quantitativo. 2- Materiais ASLO - Suspensão de látex recoberta com Estreptolisina O; - Soro controle positivo; - Soro de controle negativo; - Amostra de soro do paciente; - Tubos de ensaio para diluição e titulação (caso der reagente ou seja aglutinação); - Pipeta; - Ponteira; - Cartões de teste escuro; - Luvas; - Descarte. VDRL - Amostra de soro do paciente; - kit diagnóstico de VDRL (solução antigênica); CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINASSAU CACOAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA - Pipeta 50ul e 20ul; - Ponteiras; - Tubos de ensaio para diluição e titulação; - Placa de kline com escavações; - luvas; - descarte; - Salina 0,9%; - Agitador. 3- Procedimento ASLO Pipetou- se 50ul de controle + em uma área do cartão de teste, em outra 50ul de controle – e em outra 50ul de soro do paciente. Após foi colocado 50ul de látex ao lado e misturado bem. Em cada pipetagem foi trocado a pipeta. Logo após misturado, foi feito movimentos de rotação por 2 minutos e observou-se se ocorreu aglutinação ou não. VLDR Primeiramente foi feito a diluição de amostra em solução salina a 1/2, 1/4, 1/8. Pipetou- se 50ul de cada diluição em uma cavidade da placa escavada. Logo, pipetou-se 20ul da suspensão antigênica homogeneizada em cada diluição. Agitou- se a placa no agitador por 4 minutos. Após levou- se para o microscópio optico. 4- Resultados e dicussões ASLO No 1º foi colocado controle negativo, no 2º foi colocado controle positivo e na 3º amostra do paciente. Como observado na (figura 1), não houve aglutinação em látex sensibilizado com estreptolesina – o. Portanto o resultado foi: Não reagente < 200ui/ml. Nesse caso não é preciso fazer a titulação por diluição. Mas, para conhecimento fizemos uma simulação para aprender como é a técnica do procedimento. CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINASSAU CACOAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA Figura1: Cartão teste para exame de ASLO Fonte: autor VDRL Após a agitação levamos para o microscópio, e não foi observada nenhuma floculação, nesse caso o resultado foi não reagente. Observa- se as figuras 2,3 e 4 logo abaixo. Figura 2: Controle positivo teste VDRL Fonte: autor CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINASSAU CACOAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA Figura 3: Controle positivo teste VDRL Fonte: autor Figura 4: teste com amostra do paciente Fonte: autor Questionário sobre VDRL 1- Quando considerar que o teste é falso positivo? Os testes não treponêmicos podem apresentar resultados falso- reagentes, uma vez que os anticorpos anticardiolipina detectados por esses testes não são produzidos exclusivamente como consequência da sífilis, mas CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINASSAU CACOAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA também em decorrência de outros agravos que levam igualmente à destruição celular. Os resultados falso-reagentes em testes não treponêmicos devem ser investigados quando descartado o diagnóstico de sífilis. Geralmente, os resultados falso-reagentes apresentam títulos com diluições inferiores a 1:4. Embora menos frequentes, as amostras com resultados falso-reagentes apresentando altos títulos de anticorpos podem ocorrer, por exemplo, em pessoas que utilizam drogas injetáveis, em pessoas com hanseníase, nas colagenoses G e em pessoas vivendo com HIV – PVHIV . Os resultados falso-reagentes são classificados em dois tipos: transitórios, quando a reatividade do teste persiste por até seis meses, e permanentes, quando a reatividade do teste persiste por mais de seis meses (Quadro 2). De acordo com o Manual Técnico de Sífilis do Ministério da Saúde, quando o resultado de um teste de VDRL for reagente, deve-se realizar um novo teste, o teste treponêmico, isto é, um teste mais específico para o T. pallidum. Normalmente, para esta etapa é realizado o teste chamado de FTA-Abs, que é um teste que avalia a presença de anticorpos da doença.