Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
MICROBIOLOGIA 3º RELATÓRIO Aluna: Aldacira da Fonseca Xavier Matrícula: 12212020057 AÇÃO DO CALOR E DE AGENTES QUÍMICOS SOBRE AS CÉLULAS MICROBIANAS INTRODUÇÃO É sabido que os micróbios habitam a Terra muita antes dos seres humanos. A ubiqüidade desses organismos é possível pelo seu tamanho reduzido, sua grande capacidade de transferência horizontal de genes, e principalmente, pela variabilidade e flexibilidade metabólica, que permite se adaptar e tolerar rapidamente às condições ambientais desfavoráveis e, muitas vezes, extremas. Embora sua importância seja inquestionável, muitas vezes a presença dos micróbios causam problemas à vida humana. Problemas esses que podem ser mínimos, mas também drásticos, acarretando até mesmo, na morte de animais, vegetais e seres humanos. Por isso, faz-se necessário que práticas sejam utilizadas, seja em casa, em ambientes laboratoriais, industriais, hospitalares, dentre outros, de forma a diminuir ou impedir o crescimento microbiano. O crescimento celular pode ser controlado por diferentes métodos, dentre eles podemos citar os métodos físicos (temperatura, radiação, filtração, etc.) e os métodos químicos (desinfetantes, anticépticos, etc.). Nesta atividade prática, utilizaremos da elevação de temperatura (através da fervura), e o uso de agentes químicos para observação do comportamento microbiano. OBJETIVOS Empregar manobras assépticas adotadas no cotidiano dos laboratórios de microbiologia. Demonstrar a ação do calor sobre as células microbianas em estado vegetativo ou de esporo. Examinar a ação de agentes químicos (desinfetantes ou anti-sépticos) sobre células microbianas. MATERIAIS Terra de jardim Recipiente para preparo da amostra Placa de Petri com meio de cultura de Agar-leite Tubo de ensaio Alça de platina Bico de Bunsen Água filtrada Discos de papel filtro Pinça de madeira Álcool em gel Detergente de uso doméstico Veja multiuso de uso doméstico Pipeta conta gotas Tampas de garrafa MÉTODOS Parte 1 – Efeito do calor sobre as populações microbianas O primeiro procedimento a ser feito foi o preparo da amostra, onde colocou-se um pouco de terra (cerca de 1 colher de sopa), retirado do pátio do prédio onde funciona o Pólo, dentro de um recipiente junto com água mineral (por volta de 100ml), agitando-se em seguida. Após alguns instantes, quando aconteceu a decantação, o sobrenadante foi retirado e distribuído em 4 tubos de ensaio. Ainda sobrou parte deste suco de terra para ser utilizado na segunda da atividade. Desses 4 tubos de ensaio, 3 foram colocados na água fervente, durante um tempo diferente para cada um (2’, 5’ e 10’), e 1 tubo de ensaio não recebeu fervura. Feito isto, pegou-se uma placa de Petri com o meio de cultura devido e, com uma caneta própria para este fim, dividiu- se a placa em quatro partes, relativas aos quatro tipos de preparo. Os tubos de ensaio foram apoiados em um suporte, e se iniciou o processo de colocação dos preparados na Placa de Petri. Primeiro, com uma das mãos, a alça de platina foi flambada no bico de Bunsen e, em seguida, com a outra mão, destampou-se o tubo com o suco de terra fervida por 2 minutos, passando-o para o outro lado da chama. Logo após, inseriu-se a alça de platina dentro do tubo para recolher um pouco do caldo da terra. Mantendo a alça na posição inicial, o tubo foi fechado e colocado de volta para o suporte. Continuando, abriu-se a placa de Petri, e espalhou-se o conteúdo da alça, em forma de ziguezague, pela superfície do quadrante destinado ao material fervido por 2 minutos. Estes mesmos procedimentos foram repetidos, de igual forma, para o material fervido por cinco minutos, dez minutos e o material que não recebeu fervura. Em seguida, a placa foi lacrada com fita adesiva e guardada para posterior observação. Parte 2 – Efeito de desinfetantes e anti-sépticos Primeiro pegou-se uma placa de Petri e, com uma caneta, dividiu-a em 4 partes e identificada com cada agente químico utilizado.. Em seguida, executando as manobras assépticas, com o auxilio de uma pipeta conta gotas, impregnou-se toda a superfície da placa de Petri, já com o meio de cultura, com o suco que restou na parte anterior (sem fervura). À parte, foram colocados em 4 tampas de garrafa diferentes, os agentes químicos a serem utilizados, quais sejam: detergente de uso doméstico, multiuso Veja, álcool em gel, e água (que foi utilizada como controle). A seguir, com o auxílio de uma pinça, previamente flambada, pegou-se um disco de papel e mergulhou-o na tampa com detergente e o transferiu para a Placa de Petri no quadrante determinado para o disco com detergente. Da mesma forma, o procedimento foi repetido para o multiuso Veja, para o álcool em gel e para a água, esterilizando a pinça a cada agente químico diferente. Para concluir, vedou-se a placa de Petri para posterior observação. RESULTADOS Feito do calor Após 24 horas: E após 72 horas: Foi observado uma grande quantidade de micróbios (variando no tamanho da colônia, à textura e coloração) no quadrante sem fervura, e poucas bactérias no quadrante relativo à 2 minutos de fervura, após as 48h. Efeitos de agentes químicos Após 72h: O único agente, neste caso que teve algum efeito no que diz respeito ao controle do crescimento bacteriano foi o detergente, isso pode ser confirmado se pela presença de um halo formado em volta o disco. DISCUSSÃO Considerando os resultados da amostra submetida ao calor, era esperada a visualização de micróbios no quadrante sem fervura, mas para um leigo, talvez não se esperasse observar a presença dos mesmos nos outros quadrantes (com fervura). Percebe-se que no intervalo de 72 horas algumas poucas colônias foram visualizadas no quadrante de 2 minutos de fervura. Trata-se de micróbios que resistiram, provavelmente, sob a forma de esporo, durante a fervura, que era, pra ela, uma condição desfavorável para seu crescimento. Depois deste tempo, retornando às condições ambientais favoráveis, os esporos germinaram e fazendo esses micróbios crescerem novamente. Na observação do material submetido a agentes químicos, era esperado observar um halo (com alguma variação de tamanho) em volta dos três discos com produtos químicos, mas somente o disco com detergente apresentou certo controle no crescimento microbiano. Isso indica que a concentração do antimicrobiano (álcool e o multiuso Veja) não prejudica o metabolismo dos micróbios que foram inoculados na placa. CONCLUSÃO Nesta atividade pratica foi possível executar manobras de assepsia, que são adotadas nos laboratórios de Microbiologia. Foi possível também observar a presença de micróbios na terra e verificar que existem meios de controle e/ou impedimento de seu crescimento, sejam eles físico ou químicos. 1- Ao examinar a placa de Agar Leite inoculada com a amostra de solo fervida, você constatou a existência de bactérias sob a forma de esporo na terra: no meio de cultura, os esporos passaram para a forma vegetativa e começaram a crescer e duplicar, dando origem às colônias. Ao redor das colônias forma-se um halo transparente que vai aumentando com o tempo. A respeito desse halo. Explique: a) Qual a natureza dos produtos que estão sendo liberados pelas bactérias? Os produtos químicos, , era esperado observar um halo (com alguma variação de tamanho) em volta dos três discos com produtos químicos, mas somente o disco com detergente apresentou certo controle no crescimento microbiano. b) O que está acontecendo com os componentes originais do meio de cultura? Foi observado uma grande quantidade de micróbios (variando no tamanho da colônia, à textura e coloração) no quadrante sem fervura, e poucas bactérias no quadrante relativo à 2 minutos de fervura, após as 48h. c) Como fica a composição do meio de cultura, na região dos halos, em relação ao meio original? O único agente, neste caso que teve algum efeito no que diz respeito ao controle do crescimento bacteriano foi o detergente, isso pode ser confirmado se pela presença de um halo formado em volta o disco. REFERÊNCIAS - Liberto, MariaIsabel Madeira, et al. - Livro de Microbiologia. Fundação Cecierj/Consórcio Cederj, 2013. Volume 1, Módulo 1. 2ª Edição. - http://www.portaleducacao.com.br/fisioterapia/artigos/48942/metodos-fisicos-e-quimicos-de-controle-do-crescimento-microbiano -http://www.icb.ufmg.br/mic/index.php?secao=material&material=18 - http://pt-br.aia1317.wikia.com/wiki/Bacteriologia_Geral_Controle_Microbiano:_M%C3%A9todos_F%C3%ADsicos_e_Qu%C3%ADmicos
Compartilhar